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- 2025年11月24日
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![NCI-H460 [H460] 人大细胞肺癌细胞](https://img1.dxycdn.com/2020/0426/459/3409902238603443814-14.jpg!wh200)
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 供应商：
复祥生物
- 细胞类型：
普通细胞株-科研实验
- 物种来源：
人
- 运输方式：
常温
- 生长状态：
正常
- 规格：
株
MRC-5-EGFP+puro 人胚肺成纤维细胞
EMEM+10%XFSlone灭活血清+2ug/ml puromycin。细胞货期8-10个工作日
上海复祥生物提供 ATCC 细胞|细胞系|细胞株|肿瘤细胞|细胞|贴壁细胞|悬浮细胞|,细胞库管理规范,提供的细胞株背景清楚,提供参考文献和培养条件,网站上有细胞照片,欢迎各位老师来电咨询!
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文献和实验| 传代方法: | 收到细胞后，取出培养瓶在显微镜下观察细胞生长情况。 （一）如果细胞未超过80%汇合度时，用75%酒精喷洒整个瓶身消毒后放到超净台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。 (二)如果细胞已超过80%汇合度时，可根据情况进行传代培养。具体步骤如下： 1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）润洗1-2次。 2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置37℃培养箱中1-3分钟预热，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清，补加1-2ml培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5ml培养基的新皿中或者培养瓶中。 5. 2-3天换液一次。 注意：收到细胞后将细胞放入37度培养箱中预温1-2小时后再做处理，以稳定细胞状态。传代后细胞应该用新鲜的培养液，原瓶的培养液不能再使用。在运输过程中可能会导致一些贴壁不牢的细胞发生部分脱落，可离心吹打后重新种入瓶中培养。（收到细胞后3天内发现细胞异常请及时拍照并联系） |
| 冻存方法: | 冻存液：90%完全培养液，10%DMSO（现用现配） 储存：液氮储存 |
实验材料： 1. 肺组织：取自妊娠14—18周的胎儿； 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2； 3. 消化液：0.25%胰蛋白酶（pH7.6—7.8），0.02%EDTA溶液； 4. 培养液：DMEM或RPMI1640，加10%—20%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml； 5. 保存液：10%二甲亚砜或10%甘油； 6. 眼科剪、眼科镊等无菌消毒手术器械；
丁香园网友hyong915的观点为：成纤维细胞培养（一） 原代培养1、在手术室无菌条件下，切取新鲜的皮肤，增殖性瘢痕和瘢痕疙瘩组织，修除表皮和皮下组织，盐水反复冲洗后放入含PS的DMEM培养液内带回无菌工作间。2、把组织块置于培养皿内，Hank,s液漂洗三遍后吸净Hank,s液，眼科剪反复剪切组织块成0.5－1mm3大小。用弯头吸管吸取组织块接种于40ml培养方瓶瓶壁上，组织块间留约0.3－0.5cm的间距。3、 塞好瓶塞，放入37℃电热恒温培养箱内3.5小时使培养的组织小块微干涸
liupeizc 请问哪位高手知道成纤维细胞的生长周期啊，更确切的是血管外膜成纤维细胞生长周期，谢谢！ zhujoker 估计都没人做过，你如果需要观察其生物学功能，就自己做一次，也算原创了啊！ freecell 这里有： http://www.currentprotocols.com/protocol/cb0201 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意
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