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Y1HGold 感受态细胞100ul*10

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  • 博湖
  • BH-G2243
  • 进口、国产
  • 2025年07月16日
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    • 英文名

      Y1HGold 感受态细胞

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海博湖

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      100ul*10

    Y1HGold 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37,培养箱湿度为70%-80%
    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
    产品名称:Y1HGold 感受态细胞100ul*10
    规格:100ul*10
    分类:酵母感受态细胞
    保存条件(保质期):   -806个月)

    产品细节图片1
    Y1HGold 感受态细胞100ul*10注意事项:
    1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10--
    2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
    3.   DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。 
    4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
    5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
    6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
    7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
    力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
    8.电击感受态细胞保存在-80以下,高于-80超期储存会导致转化效率会下降。
    HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 酞菁铜(II)(β-)(>90.0%(T))Copper(II) Phthalocyanine (β-form)质量规格:>90.0%(T)

    小鼠子细胞;U14(1,3-二苯基-1,3-丙二酮基)(1,10-邻二氮杂菲)()(>95.0%(T))Tris(1,3-diphenyl-1,3-propanedionato)(1,10-phenanthroline)europium(III)质量规格:>95.0%(T)
    METAP2 Others Mouse 小鼠 METAP2 / MAP2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 3-(2-苯并噻唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(HPLC)(T))3-(2-Benzothiazolyl)-7-(diethylamino)coumarin质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
    CM-M001小鼠肺微血管内皮细胞完全培养基100mL 3-(2-苯并咪唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(T))3-(2-Benzimidazolyl)-7-(diethylamino)coumarin质量规格:>98.0%(T)
    Hela, 人细胞系 小鼠成纤维细胞,3T3TK细胞 SPA-A1(肺腺癌细胞)4,4'-(5-甲基-2-苯并恶唑基)(升华提)(>96.0%(HPLC))4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene (purified by sublimation)质量规格:>96.0%(HPLC)
    JEG-3(人绒毛膜癌细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 轮环藤宁四乙酸/1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid质量规格:>95%

    人成骨肉瘤细胞;Saos-2p, p-DDE(标准品)p, p-DDE质量规格:分析标准品
    PPP3CA Others Human PPP3CA / 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) p, p-DDE标准溶液(100μg/ml,u=3%)p, p-DDE solution质量规格:100μg/ml,u=3%
    CL-0429Romas(人淋巴瘤细胞)5×106cells/瓶×2敌草腈(标准品)Dichlobenil质量规格:分析标准品
    人绒毛膜毛细血管内皮细胞 人胚胎皮肤成纤维细胞,CCC-ESF-1细胞 Sol8(小鼠骨骼肌肌肉母细胞)乙二醇苯(标准品)Ethylene glycol monophenyl ether质量规格:分析标准品,99.5%(GC)
    土贝母苷丙 HPLC98% 10mg HumanBigEndothelin,BigETELISAKit 人大内皮素(BigET)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

    土贝母苷甲 HPLC98% 20mg HumanBigEndothelin,BigETELISA试剂盒人大内皮素(BigET)ELISA试剂盒规格:96T/48T
    土贝母苷乙 HPLC98% 20mg HumanBlockingaibody,BAELISA试剂盒人封闭抗体(BA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
    土大黄苷 HPLC98% 20mg Humanbonealkalinephosphatase,BALPELISA试剂盒人骨碱性0酸酶(BALP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
    土槿皮甲酸OβD葡萄糖苷 HPLC98% 20mg HumanBonemorphogeneticproteieceptor1A,BMPR-1AELISA试剂盒人骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒规格:96T/48T
    土槿皮乙酸OβD葡萄糖苷 HPLC98% 20mg HumanBonemorphogeneticprotein2,BMP-2ELISA试剂盒人骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
    土荆皮甲酸 HPLC98% 10mg HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6ELISA试剂盒人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA试剂盒规格:96T/48T
    土荆皮乙酸 HPLC98% 20mg Humanbonemorphogeneticproteins,BMPsELISA试剂盒人骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒规格:96T/48T
    土克甾酮 HPLC98% 20mg HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISA试剂盒人骨特异性碱性0酸酶B(ALP-B)ELISA试剂盒规格:96T/48T
    土木香内酯 HPLC98% 20mg Humanbrainnaiureticpeptide,BNPELISA试剂盒人脑素/脑尿肽(BNP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
    Y1HGold 感受态细胞100ul*10HumanBigEndothelin,BigET 人大内皮素(BigET)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 土贝母苷丙 HPLC98% 10mg

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    Y1HGold 感受态细胞100ul*10操作说明:
    1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
    待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
    2. -80保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
    A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19   --
    B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
    3. 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--
    4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μFPC=200 ΩV=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
    5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml 37225 rpm 复苏 60 分钟。--
    6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37培养箱过夜培养 13-17 小时。

     

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