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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
53
- 英文名:
K599 电击感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50ul*50
K599 电击感受态细胞50ul*50注意事项:
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述:
K599 电击感受态细胞50ul*50操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
IL17RD Others Canine 狗 IL17RD 人细胞裂解液 (阳性对照) 溴化钾(光谱SP)Potassium bromide质量规格:光谱SP
大鼠骨肉瘤细胞;UMR-106偶氮胂Ⅰ水合物(90%)Arsenazo I Hydrate质量规格:0.9
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E1 舌鳞癌细胞,Tca-8113细胞 MADB106细胞,大鼠腺癌细胞系无水硫酸钠(SP)Sodium sulfate anhydrous质量规格:SP
人胚胎气管组织来源细胞;CCC-HBE-2二甲基砜(核磁共振定量标准品)Dimethyl sulfone质量规格:核磁共振定量标准品
PECAM1 Others Mouse 小鼠 PECAM1 / CD31 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,3-(标准品)1,3-Propanediol质量规格:分析标准品
CD40 Others Rat 大鼠 CD40 / TNFRSF5 人细胞裂解液 (阳性对照) N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸钠TAPS Sodium Salt质量规格:>99%,BR
Wistar大鼠骨髓间质干细胞 Wistar rat bone marrow mesenchymal stem cellsTAN[=1-(2-噻唑偶氮)-2-萘酚](>99.0%(T))TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]质量规格:>99.0%(T)
SH-SY5Y细胞,人神经上皮瘤细胞 粘质沙雷氏菌 人肝细胞RNAHH miRNA5 μg二甲基偶氮磺IIIDimethylsulfonazo III质量规格:碱性稀土金属用的分光光度试剂及硫酸根用钡的沉淀滴定指示剂
SK-CO-1(人结直肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2偶氮磺III(>90.0%(HPLC))Sulfonazo III 质量规格:>90.0%(HPLC)
HCT-8(人盲肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0402NCI-H520(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴肾细胞;MMK32-(4-磺基苯偶氮)-1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸三钠盐水合物(>95.0%(HPLC))3sodium 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate质量规格:>95.0%(HPLC)
妥布霉素A Tobramycin A 质量规格:美国进口 英文名称MouseGlp-1ElisaKit小鼠胰高糖素肽(Glp-1)规格:96T/48T
生物素基妥布霉素酰胺 Biotinyl Tobramycin Amide 质量规格:美国进口 英文名称MouseGlycogenphosphorylaseBBELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GPBB)规格:96T/48T
妥布霉素硫酸盐 Tobramycin sulphate 质量规格:美国进口 英文名称MouseGlycogenphosphorylaseIIELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GPII)规格:96T/48T
氘化妥布霉素 Tobramycin Deuterated 质量规格:美国进口 英文名称MouseGlycogenphosphorylaseMMELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GPMM)规格:96T/48T
盐酸拓扑替康标记 d6 Topotecan Hydrochloride Labeled d6 质量规格:美国进口 英文名称MouseGlycoprotein96ELISAKit小鼠肿瘤排斥性抗原gp96(gp96)规格:96T/48T
N-去甲基拓扑替康 N-Desmethyl Topotecan 质量规格:美国进口 英文名称Mousegp130solublefragmeELISAKIT小鼠gp130规格:96T/48T
拓扑替康羧酸钠盐 Topotecan Carboxylic Acid Sodium Salt 质量规格:美国进口 英文名称MouseHAELISAKit小鼠透明质酸(HA)规格:96T/48T
拓扑替康 Topotecan 质量规格:美国进口 英文名称MouseHbA1cELISAKit小鼠糖化血红蛋白(HbA1c)规格:96T/48T
15-酮基氟前列醇异丙酯 15-keto Fluprostenol isopropyl ester 质量规格:美国进口 英文名称MouseHCYELISAKit小鼠同型半胱氨(HCY)规格:96T/48T
曲唑酮盐酸盐-d6 Trazodone-d6 Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称Mousehemeoxygenase-1ELISAKit小鼠血红素氧合酶1(HO-1)规格:96T/48T
K599 电击感受态细胞50ul*50英文名称MouseGATA4小鼠心肌转录因子(GATA4)规格:96T/48T (R)-(+)-马来酸噻吗洛尔 (R)-(+)-Timolol Maleate 质量规格:美国进口
英文名称MouseGCP-2小鼠中性粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2)规格:96T/48T (S)-(-)-马来酸噻吗洛尔 (S)-(-)-Timolol Maleate 质量规格:美国进口
英文名称MouseGelsolin小鼠Gelsolin规格:96T/48T 替硝唑标记d4 Tinidazole Labeled d4 质量规格:美国进口
英文名称MouseGlp-1小鼠胰高糖素肽(Glp-1)规格:96T/48T 妥布霉素A Tobramycin A 质量规格:美国进口
英文名称MouseGlycogenphosphorylaseBB小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GPBB)规格:96T/48T 生物素基妥布霉素酰胺 Biotinyl Tobramycin Amide 质量规格:美国进口
英文名称MouseGlycogenphosphorylaseII小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GPII)规格:96T/48T 妥布霉素硫酸盐 Tobramycin sulphate 质量规格:美国进口
英文名称MouseGlycogenphosphorylaseMM小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GPMM)规格:96T/48T 氘化妥布霉素 Tobramycin Deuterated 质量规格:美国进口
英文名称MouseGlycoprotein96小鼠肿瘤排斥性抗原gp96(gp96)规格:96T/48T 盐酸拓扑替康标记 d6 Topotecan Hydrochloride Labeled d6 质量规格:美国进口
英文名称Mousegp130solublefragme小鼠gp130规格:96T/48T N-去甲基拓扑替康 N-Desmethyl Topotecan 质量规格:美国进口
英文名称MouseHA小鼠透明质酸(HA)规格:96T/48T 拓扑替康羧酸钠盐 Topotecan Carboxylic Acid Sodium Salt 质量规格:美国进口
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述:
| 产品名称 | 包装 | 分类 |
| K599 电击感受态细胞50ul*50 | 50ul*50 | 发根农杆菌感受态细胞 |
K599 电击感受态细胞50ul*50操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
IL17RD Others Canine 狗 IL17RD 人细胞裂解液 (阳性对照) 溴化钾(光谱SP)Potassium bromide质量规格:光谱SP
大鼠骨肉瘤细胞;UMR-106偶氮胂Ⅰ水合物(90%)Arsenazo I Hydrate质量规格:0.9
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E1 舌鳞癌细胞,Tca-8113细胞 MADB106细胞,大鼠腺癌细胞系无水硫酸钠(SP)Sodium sulfate anhydrous质量规格:SP
人胚胎气管组织来源细胞;CCC-HBE-2二甲基砜(核磁共振定量标准品)Dimethyl sulfone质量规格:核磁共振定量标准品
PECAM1 Others Mouse 小鼠 PECAM1 / CD31 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,3-(标准品)1,3-Propanediol质量规格:分析标准品
CD40 Others Rat 大鼠 CD40 / TNFRSF5 人细胞裂解液 (阳性对照) N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸钠TAPS Sodium Salt质量规格:>99%,BR
Wistar大鼠骨髓间质干细胞 Wistar rat bone marrow mesenchymal stem cellsTAN[=1-(2-噻唑偶氮)-2-萘酚](>99.0%(T))TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]质量规格:>99.0%(T)
SH-SY5Y细胞,人神经上皮瘤细胞 粘质沙雷氏菌 人肝细胞RNAHH miRNA5 μg二甲基偶氮磺IIIDimethylsulfonazo III质量规格:碱性稀土金属用的分光光度试剂及硫酸根用钡的沉淀滴定指示剂
SK-CO-1(人结直肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2偶氮磺III(>90.0%(HPLC))Sulfonazo III 质量规格:>90.0%(HPLC)
HCT-8(人盲肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0402NCI-H520(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴肾细胞;MMK32-(4-磺基苯偶氮)-1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸三钠盐水合物(>95.0%(HPLC))3sodium 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate质量规格:>95.0%(HPLC)
妥布霉素A Tobramycin A 质量规格:美国进口 英文名称MouseGlp-1ElisaKit小鼠胰高糖素肽(Glp-1)规格:96T/48T
生物素基妥布霉素酰胺 Biotinyl Tobramycin Amide 质量规格:美国进口 英文名称MouseGlycogenphosphorylaseBBELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GPBB)规格:96T/48T
妥布霉素硫酸盐 Tobramycin sulphate 质量规格:美国进口 英文名称MouseGlycogenphosphorylaseIIELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GPII)规格:96T/48T
氘化妥布霉素 Tobramycin Deuterated 质量规格:美国进口 英文名称MouseGlycogenphosphorylaseMMELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GPMM)规格:96T/48T
盐酸拓扑替康标记 d6 Topotecan Hydrochloride Labeled d6 质量规格:美国进口 英文名称MouseGlycoprotein96ELISAKit小鼠肿瘤排斥性抗原gp96(gp96)规格:96T/48T
N-去甲基拓扑替康 N-Desmethyl Topotecan 质量规格:美国进口 英文名称Mousegp130solublefragmeELISAKIT小鼠gp130规格:96T/48T
拓扑替康羧酸钠盐 Topotecan Carboxylic Acid Sodium Salt 质量规格:美国进口 英文名称MouseHAELISAKit小鼠透明质酸(HA)规格:96T/48T
拓扑替康 Topotecan 质量规格:美国进口 英文名称MouseHbA1cELISAKit小鼠糖化血红蛋白(HbA1c)规格:96T/48T
15-酮基氟前列醇异丙酯 15-keto Fluprostenol isopropyl ester 质量规格:美国进口 英文名称MouseHCYELISAKit小鼠同型半胱氨(HCY)规格:96T/48T
曲唑酮盐酸盐-d6 Trazodone-d6 Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称Mousehemeoxygenase-1ELISAKit小鼠血红素氧合酶1(HO-1)规格:96T/48T
K599 电击感受态细胞50ul*50英文名称MouseGATA4小鼠心肌转录因子(GATA4)规格:96T/48T (R)-(+)-马来酸噻吗洛尔 (R)-(+)-Timolol Maleate 质量规格:美国进口
英文名称MouseGCP-2小鼠中性粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2)规格:96T/48T (S)-(-)-马来酸噻吗洛尔 (S)-(-)-Timolol Maleate 质量规格:美国进口
英文名称MouseGelsolin小鼠Gelsolin规格:96T/48T 替硝唑标记d4 Tinidazole Labeled d4 质量规格:美国进口
英文名称MouseGlp-1小鼠胰高糖素肽(Glp-1)规格:96T/48T 妥布霉素A Tobramycin A 质量规格:美国进口
英文名称MouseGlycogenphosphorylaseBB小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GPBB)规格:96T/48T 生物素基妥布霉素酰胺 Biotinyl Tobramycin Amide 质量规格:美国进口
英文名称MouseGlycogenphosphorylaseII小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GPII)规格:96T/48T 妥布霉素硫酸盐 Tobramycin sulphate 质量规格:美国进口
英文名称MouseGlycogenphosphorylaseMM小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GPMM)规格:96T/48T 氘化妥布霉素 Tobramycin Deuterated 质量规格:美国进口
英文名称MouseGlycoprotein96小鼠肿瘤排斥性抗原gp96(gp96)规格:96T/48T 盐酸拓扑替康标记 d6 Topotecan Hydrochloride Labeled d6 质量规格:美国进口
英文名称Mousegp130solublefragme小鼠gp130规格:96T/48T N-去甲基拓扑替康 N-Desmethyl Topotecan 质量规格:美国进口
英文名称MouseHA小鼠透明质酸(HA)规格:96T/48T 拓扑替康羧酸钠盐 Topotecan Carboxylic Acid Sodium Salt 质量规格:美国进口
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