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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
26
- 英文名：
F-BL21(DE3) 感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100ul*50
产品名称：F-BL21(DE3) 感受态细胞100ul*50
规格：100ul*50
分类：表达感受态细胞
保存条件（保质期）： -80℃（6个月）
F-BL21(DE3) 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
F-BL21(DE3) 感受态细胞100ul*50注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
F-BL21(DE3) 感受态细胞100ul*50操作说明：
1. 0.1
cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19； --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸罗沙替丁醋酸酯Roxatidine acetate HCl质量规格：>98%
大鼠子宫平滑肌细胞完全培养基 100mL培美曲塞酸Pemetrexed质量规格：>98%
CHO-K1仓鼠卵巢细胞亚株 CHO-K1 Chinese hamster ovary cell subline F-12K+10%FBS培美曲塞酸(标准品)Pemetrexed质量规格：HPLC≥98%,标准品
胰岛素样生长因子周效磺胺(磺胺多辛)sulphadoxine质量规格：>99%,BR
E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 人卵巢成纤维细胞HOF周效磺胺(标准品)sulphadoxine质量规格：HPLC>98%,标准品
人结肠平滑肌细胞(HCSMC)(5×105 )巴氯芬Baclofen质量规格：度>99,USP
CL-0358HKC(人胚肾上皮细胞)5×106cells/瓶×2氨氯地平Amlodipine质量规格：>99.0%,BR
人胰腺癌细胞;AsPC-1 大鼠皮肤肥大细胞完全培养基 100mL氨氯地平（标准品）Amlodipine质量规格：HPLC>98%,标准品
EMT-6 小鼠癌尼扎替丁Nizatidine质量规格：>98.5%,USP31
MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人细胞裂解液 (阳性对照) 羧甲基纤维素Carboxymethyl cellulose 质量规格：粘度(1%,25℃) ≥500 mpa.s
亚麻酸甲酯 GC≥98% 100mg MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISA试剂盒小鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
去乙酰毛花苷丙 HPLC≥98% 20mg MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISA试剂盒小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒规格：96T/48T
醋酸泼尼松 HPLC≥98% 100mg MouseVasoactiveIestinalPeptide,VIPELISA试剂盒小鼠血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
正癸酸 GC≥98% 5ml MouseVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISA试剂盒小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA试剂盒规格：96T/48T
盐酸西替利嗪 HPLC≥98% 100mg MouseVitaminB6,VB6ELISA试剂盒小鼠维生素B6(VB6)ELISA试剂盒规格：96T/48T
优葛缕酮 HPLC≥98% 100mg MouseVitaminC,VCELISA试剂盒小鼠维生素C(VC)ELISA试剂盒规格：96T/48T
蛔蒿素 HPLC≥98% 100mg MousevonWillebrandFactor,vWFELISA试剂盒小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
(R)()桃金娘烯醛 HPLC≥98% 100mg MouseypsinELISA试剂盒规格：96T/48T
多索茶碱 HPLC≥98% 250mg MouseypsinELISA试剂盒小鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA试剂盒规格：96T/48T
腺苷一二钠盐 HPLC≥98% 20mg Mouseα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISA试剂盒小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
F-BL21(DE3) 感受态细胞100ul*50MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1/Flt1ELISA试剂盒小鼠血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)ELISA试剂盒规格：96T/48T 芹菜素C葡萄糖C木糖苷 HPLC≥98% 20mg
MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISA试剂盒小鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T 亚麻酸甲酯 GC≥98% 100mg
MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISA试剂盒小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒规格：96T/48T 去乙酰毛花苷丙 HPLC≥98% 20mg
MouseVasoactiveIestinalPeptide,VIPELISA试剂盒小鼠血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 醋酸泼尼松 HPLC≥98% 100mg
MouseVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISA试剂盒小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA试剂盒规格：96T/48T 正癸酸 GC≥98% 5ml
MouseVitaminB6,VB6ELISA试剂盒小鼠维生素B6(VB6)ELISA试剂盒规格：96T/48T 盐酸西替利嗪 HPLC≥98% 100mg
MouseVitaminC,VCELISA试剂盒小鼠维生素C(VC)ELISA试剂盒规格：96T/48T 优葛缕酮 HPLC≥98% 100mg
MousevonWillebrandFactor,vWFELISA试剂盒小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)ELISA试剂盒规格：96T/48T 蛔蒿素 HPLC≥98% 100mg
MouseypsinELISA试剂盒规格：96T/48T (R)()桃金娘烯醛 HPLC≥98% 100mg
MouseypsinELISA试剂盒小鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA试剂盒规格：96T/48T 多索茶碱 HPLC≥98% 250mg
规格：100ul*50
分类：表达感受态细胞
保存条件（保质期）： -80℃（6个月）
F-BL21(DE3) 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
F-BL21(DE3) 感受态细胞100ul*50注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
F-BL21(DE3) 感受态细胞100ul*50操作说明：
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19； --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸罗沙替丁醋酸酯Roxatidine acetate HCl质量规格：>98%
大鼠子宫平滑肌细胞完全培养基 100mL培美曲塞酸Pemetrexed质量规格：>98%
CHO-K1仓鼠卵巢细胞亚株 CHO-K1 Chinese hamster ovary cell subline F-12K+10%FBS培美曲塞酸(标准品)Pemetrexed质量规格：HPLC≥98%,标准品
胰岛素样生长因子周效磺胺(磺胺多辛)sulphadoxine质量规格：>99%,BR
E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 人卵巢成纤维细胞HOF周效磺胺(标准品)sulphadoxine质量规格：HPLC>98%,标准品
人结肠平滑肌细胞(HCSMC)(5×105 )巴氯芬Baclofen质量规格：度>99,USP
CL-0358HKC(人胚肾上皮细胞)5×106cells/瓶×2氨氯地平Amlodipine质量规格：>99.0%,BR
人胰腺癌细胞;AsPC-1 大鼠皮肤肥大细胞完全培养基 100mL氨氯地平（标准品）Amlodipine质量规格：HPLC>98%,标准品
EMT-6 小鼠癌尼扎替丁Nizatidine质量规格：>98.5%,USP31
MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人细胞裂解液 (阳性对照) 羧甲基纤维素Carboxymethyl cellulose 质量规格：粘度(1%,25℃) ≥500 mpa.s
亚麻酸甲酯 GC≥98% 100mg MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISA试剂盒小鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
去乙酰毛花苷丙 HPLC≥98% 20mg MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISA试剂盒小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒规格：96T/48T
醋酸泼尼松 HPLC≥98% 100mg MouseVasoactiveIestinalPeptide,VIPELISA试剂盒小鼠血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
正癸酸 GC≥98% 5ml MouseVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISA试剂盒小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA试剂盒规格：96T/48T
盐酸西替利嗪 HPLC≥98% 100mg MouseVitaminB6,VB6ELISA试剂盒小鼠维生素B6(VB6)ELISA试剂盒规格：96T/48T
优葛缕酮 HPLC≥98% 100mg MouseVitaminC,VCELISA试剂盒小鼠维生素C(VC)ELISA试剂盒规格：96T/48T
蛔蒿素 HPLC≥98% 100mg MousevonWillebrandFactor,vWFELISA试剂盒小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
(R)()桃金娘烯醛 HPLC≥98% 100mg MouseypsinELISA试剂盒规格：96T/48T
多索茶碱 HPLC≥98% 250mg MouseypsinELISA试剂盒小鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA试剂盒规格：96T/48T
腺苷一二钠盐 HPLC≥98% 20mg Mouseα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISA试剂盒小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
F-BL21(DE3) 感受态细胞100ul*50MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1/Flt1ELISA试剂盒小鼠血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)ELISA试剂盒规格：96T/48T 芹菜素C葡萄糖C木糖苷 HPLC≥98% 20mg
MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISA试剂盒小鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T 亚麻酸甲酯 GC≥98% 100mg
MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISA试剂盒小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒规格：96T/48T 去乙酰毛花苷丙 HPLC≥98% 20mg
MouseVasoactiveIestinalPeptide,VIPELISA试剂盒小鼠血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 醋酸泼尼松 HPLC≥98% 100mg
MouseVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISA试剂盒小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA试剂盒规格：96T/48T 正癸酸 GC≥98% 5ml
MouseVitaminB6,VB6ELISA试剂盒小鼠维生素B6(VB6)ELISA试剂盒规格：96T/48T 盐酸西替利嗪 HPLC≥98% 100mg
MouseVitaminC,VCELISA试剂盒小鼠维生素C(VC)ELISA试剂盒规格：96T/48T 优葛缕酮 HPLC≥98% 100mg
MousevonWillebrandFactor,vWFELISA试剂盒小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)ELISA试剂盒规格：96T/48T 蛔蒿素 HPLC≥98% 100mg
MouseypsinELISA试剂盒规格：96T/48T (R)()桃金娘烯醛 HPLC≥98% 100mg
MouseypsinELISA试剂盒小鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA试剂盒规格：96T/48T 多索茶碱 HPLC≥98% 250mg
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