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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
48
- 英文名：
EHA105 感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100ul*50
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述：
| 产品名称 | 包装 | 分类 |
| EHA105 感受态细胞100ul*50 | 100ul*50 | 根癌农杆菌感受态细胞 |
EHA105 感受态细胞100ul*50操作方法：
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞，用含目的片段的T载体质粒转化（阳性对照）能长出密密麻麻的菌落，而用另一种载体和目的片段的连接产物转化，却一个菌都没长出来，重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关，还是连接出了问题？哪个可能性大些？
答：应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照，确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了，还能用来转化质粒吗？
答：如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况，是可以用来转化的，但是由于冻存时间过长，转化效率会有所下降，如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的，如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
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乙二醇（标准品） Ethylene Glycol 质量规格：供检查用 小鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA检测试剂盒MouseRetinol-bindingprotein4,RBP-4ELISAKit 96T/48T
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硫酸肼（标准品） Hydrazine sulfate 质量规格：供TLC法系统适用性试验用 小鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)ELISA试剂盒 ，英文名： CyPA ELISA Kit
硫酸肼（标准品） Hydrazine sulfate 质量规格：供检查用 小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA试剂盒 ，英文名： Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit
环扁桃酯（标准品） Cyclandelate 质量规格：HPLC法含量测定 小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA试剂盒 ，英文名： Eotaxin 2/CCL24 ELISA Kit
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小鼠生长调节致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA试剂盒 ，英文名： GROα/CXCL1/MGSA ELISA Kit 草酸（标准品） Oxalic acid 质量规格：含量测定
小鼠生长抑素(SS)ELISA试剂盒 ，英文名： SS ELISA Kit 硝酸奥昔康唑（标准品） Oxiconazole Nitrate 质量规格：HPLC法含量测定
小鼠生长因子(GH)ELISA检测试剂盒Mousegrowthhormone,GH 96T/48T 普瑞巴林（标准品） Pregabalin 质量规格：HPLC法含量测定
小鼠视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA检测试剂盒MouseRetinol-bindingprotein,RBP 96T/48T (S)-(+)-苯乙醇酸（普瑞巴林杂质）（标准品） [(S)-(+)-MandelicAcid] （Pregabalin impurity） 质量规格：供检查用
小鼠视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒 ，英文名： RBP ELISA Kit 山梨醇（标准品） D-Sorbitol 质量规格：供检查用
小鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA检测试剂盒MouseRetinol-bindingprotein4,RBP-4 96T/48T 乙二醇（标准品） Ethylene Glycol 质量规格：供检查用
小鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒 ，英文名： RBP-4 ELISA Kit 降二氢辣椒碱 Nordihydrocapsaicin 质量规格：HPLC≥95%,标准品
小鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)ELISA检测试剂盒MousecyclophilinA,CyPA 96T/48T 4-甲氨基安替比林（标准品） 4-(Methylamino)-antipyrine 质量规格：供检查用
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