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C43(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50

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  • 博湖
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  • 2025年07月07日
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    • 英文名

      C43(DE3)pLysS 感受态细胞

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海博湖

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      100ul*50

    同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
    答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
    产品描述:
    产品名称 包装 分类
    C43(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50 100ul*50 表达感受态细胞
    产品细节图片1
    产品细节图片2
    C43(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50注意事项:
    1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。 
    2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。 
    3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。

    HUAEC-c 人脐动脉内皮细胞(HUAEC) 500,000cells 肠静脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105(1ml)盐酸强力霉素/盐酸多西环素Doxycycline HCl质量规格:>97%,BR
    原代神经元细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装:500/100ml盐酸强力霉素/盐酸多西环素(标准品)Doxycycline HCl质量规格:含量测定
    SEMA4D Others Cynomolgus 食蟹猴 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人细胞裂解液 (阳性对照) 维生素K3,甲萘醌Menadione质量规格:>98%,BR
    EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0926维生素K3,甲萘醌(标准品)Menadione质量规格:分析标准品
    家猫肺细胞;FCA-L1 羊膜细胞,Ha Fe细胞 BaF3细胞,小鼠原B细胞株硝酸益康唑Econazole nitrate质量规格:>98%,BR
    EFNB1 Others Mouse 小鼠 EFNB1 / Ephrin-B1 人细胞裂解液 (阳性对照) 白桦脂醇Betulin质量规格:>98%,BR

    人肝细胞cDNAHH cDNA白桦脂醇(标准品)Betulin质量规格:HPLC98%,标准品
    CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人细胞裂解液 (阳性对照) 白桦脂醛(标准品)Betulinaldehyde质量规格:HPLC98%,标准品
    大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E白桦脂酸(标准品)Betulinic acid质量规格:HPLC98%,标准品
    HepG 2.2.1 .5细胞,人肝癌细胞 人星形胶质瘤细胞,U251细胞 大鼠肾系膜细胞;RMC白桦脂酸Betulinic acid质量规格:HPLC98%BR
    盐酸班布特罗(标准品)  Bambuterol Hydrochloride  质量规格:含量测定 小鼠神经细胞粘附分子1(NCAM1)ELISA试剂盒 ,英文名: NCAM1 ELISA Kit

    N-乙酰氨基葡萄糖(标准品)  N-Acetyl-D-Glucosamine  质量规格:>98%,标准品 小鼠神经型合成酶(nNOS/NOS1)ELISA试剂盒 ,英文名: nNOS/NOS1 ELISA Kit
    托吡卡胺(标准品)  Tropicamide  质量规格:含量测定 小鼠神经营养因子3(-3)ELISA检测试剂盒MouseNeuroophin3,-3ELISAkit 96T/48T
    奥拉西坦(标准品)  Oxiracetam  质量规格:供检查用 小鼠神经营养因子3(-3)ELISA试剂盒 ,英文名: -3 ELISA Kit
    盐酸贝凡洛尔(标准品)  Bevantolol hydrochloride  质量规格:含量测定 小鼠神经营养因子4(-4)ELISA检测试剂盒MouseNeuroophin4,-4ELISAKIT 96T/48T
    盐酸布比卡因(标准品)  Bupivacaine Hydrochloride Monohydrate  质量规格:含量测定 小鼠神经营养因子4(-4)ELISA试剂盒 ,英文名: -4 ELISA Kit
    双环醇(标准品)  Bicyclol  质量规格:含量测定 小鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA检测试剂盒Mouseadrenomedullin,ADMELISAKit 96T/48T
    盐酸贝尼地平(标准品)  Benidipine Hydrochloride  质量规格:含量测定 小鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒 ,英文名: ADM ELISA Kit
    甲异靛(标准品)  Meisoindigo  质量规格:供UV法含量测定用 小鼠肾素(Renin)ELISA检测试剂盒MouseReninELISAKit 96T/48T
    盐酸丁螺环酮(标准品)  Buspirone Hydrochloride  质量规格:含量测定 小鼠肾素(Renin)ELISA试剂盒 ,英文名: Renin ELISA Kit
    C43(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50小鼠神经调节蛋白2(G2)ELISA试剂盒 ,英文名: G2 ELISA Kit 辅酶Q9(标准品)  CoenzymeQ9  质量规格:>99%,标准品

    小鼠神经调节蛋白3(G3)ELISA试剂盒 ,英文名: G3 ELISA Kit 利可君(标准品)  Leucoson  质量规格:含量测定
    小鼠神经调节蛋白4(G4)ELISA试剂盒 ,英文名: G4 ELISA Kit 拉米夫定(标准品)  Lamivudine  质量规格:含量测定
    小鼠神经细胞粘附分子1(NCAM1)ELISA试剂盒 ,英文名: NCAM1 ELISA Kit 盐酸班布特罗(标准品)  Bambuterol Hydrochloride  质量规格:含量测定
    小鼠神经型合成酶(nNOS/NOS1)ELISA试剂盒 ,英文名: nNOS/NOS1 ELISA Kit N-乙酰氨基葡萄糖(标准品)  N-Acetyl-D-Glucosamine  质量规格:>98%,标准品
    小鼠神经营养因子3(-3)ELISA检测试剂盒MouseNeuroophin3,-3 96T/48T 托吡卡胺(标准品)  Tropicamide  质量规格:含量测定
    小鼠神经营养因子3(-3)ELISA试剂盒 ,英文名: -3 ELISA Kit 奥拉西坦(标准品)  Oxiracetam  质量规格:供检查用
    小鼠神经营养因子4(-4)ELISA检测试剂盒MouseNeuroophin4,-4 96T/48T 盐酸贝凡洛尔(标准品)  Bevantolol hydrochloride  质量规格:含量测定
    小鼠神经营养因子4(-4)ELISA试剂盒 ,英文名: -4 ELISA Kit 盐酸布比卡因(标准品)  Bupivacaine Hydrochloride Monohydrate  质量规格:含量测定
    小鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA检测试剂盒Mouseadrenomedullin,ADM 96T/48T 双环醇(标准品)  Bicyclol  质量规格:含量测定
    C43(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*50操作方法:
    1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
    2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
    3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
    4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
    5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
    感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
    答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。

     

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    • 【求助】BAC文库应用

      -1,pBADHis, pBADHislacZ,pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒:pCDFduet-1 以及pCDNA3.1,pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta(DE3),Rasettagame(DE3),Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒: pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi

    • 【交流】我的一些质粒,菌种,欢迎大家找我交换

      494(DE3) TB1(DE3) C41(DE3C43(DE3) Rosetta(DE3) Rosetta2(DE3Plyss Origami B (DE3) Rosetta-gami-B(DE3

    • 如何阅读质粒图谱

      相关,不同的载体是不一样的。一个载体可只看它的启动子到终止子那一段,其它的可以考虑少些。 pET 表达菌株的相关信息 ( DE3 )指宿主为 λ DE3 溶原菌,其染色体上带有一拷贝由 lacUV5 启动子控制的 T7 RNA 聚合酶基因。这类菌株适用于从克隆到 pET 载体的目标基因生产蛋白。命名为 pLysS 和 pLysE 的宿主菌带有编码 T7 溶菌酶(为 T7 RNA 聚合酶的天然抑制物)的 pET 相容性质粒。带有 pLysS 的细胞

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