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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
22
- 英文名:
C58C1 感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ul*100
C58C1 感受态细胞100ul*100培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
产品名称:C58C1 感受态细胞100ul*100
规格:100ul*100
分类:发根农杆菌感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
C58C1 感受态细胞100ul*100注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
ENG Others Mouse 小鼠 Endoglin / ENG / CD105 人细胞裂解液 (阳性对照) 硝酸益康唑(标准品)Econazole nitrate质量规格:HPLC>98%,标准品
心肌成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)恩替卡韦Entecavir质量规格:>99.5%,一水合物,BR,可用于细胞培养
CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照) 恩替卡韦(标准品)Entecavir质量规格:HPLC>98%,标准品
大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-2H3依帕司他Epalrestat 质量规格:>99%
WI-38AV13细胞,人SV-40转化肺成纤维细胞 大鼠胸主动脉平滑肌细胞,VSMC细胞 CL-0010786-O(人肾透明细胞癌细胞)5×106cells/瓶×2盐酸表阿霉素Epirubicin HCl质量规格:>98%,BR
IL18R1 Others Human 人 IL18R1 / CD218a 人细胞裂解液 (阳性对照) 6‘-羟基多沙唑嗪6'-Hydroxy Doxazosin质量规格:美国进口
人导管癌细胞;HCC38Prosapogenin CP6Prosapogenin CP6质量规格:HPLC≥98%,标准品
LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人细胞裂解液 (阳性对照) CrovatinCrovatin质量规格:HPLC≥98%,标准品
COLO 205 人结肠癌细胞CroverinCroverin质量规格:HPLC≥98%,标准品
U-2 OS-EGFP+puro人骨肉瘤细胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS-EGFP+puro McCoy's 5A+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinlevatinlevatin质量规格:HPLC≥98%,标准品
脱氟帕罗西汀盐酸盐 Defluoro Paroxetine, Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称RatHeatShockProtein70ELISAKit大鼠热休克蛋白70(HSP70)规格:96T/48T
帕罗西汀马来酸盐 Paroxetine maleate 质量规格:美国进口 英文名称RatHeatShockProtein70ELISAKit大鼠热休克蛋白70(HSP70)规格:96T/48T
4-羟基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸乙酯 1,1-二氧化物 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylic acid ethyl ester 1,1-Dioxide 质量规格:美国进口 英文名称RatHeatShockProtein90ELISAKit大鼠热休克蛋白90(HSP90)ELISA试剂盒规格:96T/48T
甲基4-羟基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物 Methyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide 质量规格:美国进口 英文名称RatHeatShockProtein90ELISAKit大鼠热休克蛋白90(HSP90)ELISA试剂盒规格:96T/48T
去甲基吡罗昔康(吡罗昔康杂质B) Desmethyl Piroxicam (Piroxicam Impurity B) 质量规格:美国进口 英文名称Rathemeoxygenase-1ELISAKit大鼠血红素氧合酶1(HO-1)规格:96T/48T
甲基4-羟基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物 Methyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide 质量规格:美国进口 英文名称Rathemeoxygenase-1ELISAKit大鼠血红素氧合酶1(HO-1)规格:96T/48T
异丙基4-羟基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物 (吡罗昔康杂质I) Isopropyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide (Piroxicam Impurity I) 质量规格:美国进口 英文名称Rathemeoxygenase-2ELISAKit大鼠血红素氧合酶2(HO-2)规格:96T/48T
乙基4-羟基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物(吡罗昔康杂质 K) Ethyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide(Piroxicam Impurity K) 质量规格:美国进口 英文名称Rathemeoxygenase-2ELISAKit大鼠血红素氧合酶2(HO-2)规格:96T/48T
异丙基 4-羟基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物 (吡罗昔康杂质 L) Isopropyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide (Piroxicam Impurity L) 质量规格:美国进口 英文名称RatHIF-1αELISAKit大鼠低氧诱导因子-1α(HIF-1α)规格:96T/48T
沙卡林N-(2-醋酸异丙基酯)(吡罗昔康杂质 F) Saccharin N-(2-Acetic Acid Isopropyl Ester)(Piroxicam Impurity F) 质量规格:美国进口 英文名称RatHIF-1αELISAKit大鼠低氧诱导因子-1α(HIF-1α)规格:96T/48T
C58C1 感受态细胞100ul*100英文名称RatHeatShockProtein40大鼠热休克蛋白40(HSP40)规格:96T/48T α-去环己基-α-苯基奥昔布宁 α-Descyclohexyl-α-phenyl Oxybutynin 质量规格:美国进口
英文名称Ratheatshockprotein60大鼠热休克蛋白60(Hsp60)规格:96T/48T (S)-N-去乙基盐酸奥昔布宁 (S)-N-Desethyl Oxybutynin Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称Ratheatshockprotein60大鼠热休克蛋白60(Hsp60)规格:96T/48T (S)-盐酸奥昔布宁 (S)-Oxybutynin hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称RatHeatShockProtein70大鼠热休克蛋白70(HSP70)规格:96T/48T 脱氟帕罗西汀盐酸盐 Defluoro Paroxetine, Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称RatHeatShockProtein70大鼠热休克蛋白70(HSP70)规格:96T/48T 帕罗西汀马来酸盐 Paroxetine maleate 质量规格:美国进口
英文名称RatHeatShockProtein90大鼠热休克蛋白90(HSP90)ELISA试剂盒规格:96T/48T 4-羟基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸乙酯 1,1-二氧化物 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylic acid ethyl ester 1,1-Dioxide 质量规格:美国进口
英文名称RatHeatShockProtein90大鼠热休克蛋白90(HSP90)ELISA试剂盒规格:96T/48T 甲基4-羟基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物 Methyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide 质量规格:美国进口
英文名称Rathemeoxygenase-1大鼠血红素氧合酶1(HO-1)规格:96T/48T 去甲基吡罗昔康(吡罗昔康杂质B) Desmethyl Piroxicam (Piroxicam Impurity B) 质量规格:美国进口
英文名称Rathemeoxygenase-1大鼠血红素氧合酶1(HO-1)规格:96T/48T 甲基4-羟基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物 Methyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide 质量规格:美国进口
英文名称Rathemeoxygenase-2大鼠血红素氧合酶2(HO-2)规格:96T/48T 异丙基4-羟基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物 (吡罗昔康杂质I) Isopropyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide (Piroxicam Impurity I) 质量规格:美国进口
C58C1 感受态细胞100ul*100操作说明:
1. 0.1
cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
产品名称:C58C1 感受态细胞100ul*100
规格:100ul*100
分类:发根农杆菌感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
C58C1 感受态细胞100ul*100注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
ENG Others Mouse 小鼠 Endoglin / ENG / CD105 人细胞裂解液 (阳性对照) 硝酸益康唑(标准品)Econazole nitrate质量规格:HPLC>98%,标准品
心肌成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)恩替卡韦Entecavir质量规格:>99.5%,一水合物,BR,可用于细胞培养
CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照) 恩替卡韦(标准品)Entecavir质量规格:HPLC>98%,标准品
大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-2H3依帕司他Epalrestat 质量规格:>99%
WI-38AV13细胞,人SV-40转化肺成纤维细胞 大鼠胸主动脉平滑肌细胞,VSMC细胞 CL-0010786-O(人肾透明细胞癌细胞)5×106cells/瓶×2盐酸表阿霉素Epirubicin HCl质量规格:>98%,BR
IL18R1 Others Human 人 IL18R1 / CD218a 人细胞裂解液 (阳性对照) 6‘-羟基多沙唑嗪6'-Hydroxy Doxazosin质量规格:美国进口
人导管癌细胞;HCC38Prosapogenin CP6Prosapogenin CP6质量规格:HPLC≥98%,标准品
LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人细胞裂解液 (阳性对照) CrovatinCrovatin质量规格:HPLC≥98%,标准品
COLO 205 人结肠癌细胞CroverinCroverin质量规格:HPLC≥98%,标准品
U-2 OS-EGFP+puro人骨肉瘤细胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS-EGFP+puro McCoy's 5A+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinlevatinlevatin质量规格:HPLC≥98%,标准品
脱氟帕罗西汀盐酸盐 Defluoro Paroxetine, Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称RatHeatShockProtein70ELISAKit大鼠热休克蛋白70(HSP70)规格:96T/48T
帕罗西汀马来酸盐 Paroxetine maleate 质量规格:美国进口 英文名称RatHeatShockProtein70ELISAKit大鼠热休克蛋白70(HSP70)规格:96T/48T
4-羟基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸乙酯 1,1-二氧化物 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylic acid ethyl ester 1,1-Dioxide 质量规格:美国进口 英文名称RatHeatShockProtein90ELISAKit大鼠热休克蛋白90(HSP90)ELISA试剂盒规格:96T/48T
甲基4-羟基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物 Methyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide 质量规格:美国进口 英文名称RatHeatShockProtein90ELISAKit大鼠热休克蛋白90(HSP90)ELISA试剂盒规格:96T/48T
去甲基吡罗昔康(吡罗昔康杂质B) Desmethyl Piroxicam (Piroxicam Impurity B) 质量规格:美国进口 英文名称Rathemeoxygenase-1ELISAKit大鼠血红素氧合酶1(HO-1)规格:96T/48T
甲基4-羟基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物 Methyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide 质量规格:美国进口 英文名称Rathemeoxygenase-1ELISAKit大鼠血红素氧合酶1(HO-1)规格:96T/48T
异丙基4-羟基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物 (吡罗昔康杂质I) Isopropyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide (Piroxicam Impurity I) 质量规格:美国进口 英文名称Rathemeoxygenase-2ELISAKit大鼠血红素氧合酶2(HO-2)规格:96T/48T
乙基4-羟基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物(吡罗昔康杂质 K) Ethyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide(Piroxicam Impurity K) 质量规格:美国进口 英文名称Rathemeoxygenase-2ELISAKit大鼠血红素氧合酶2(HO-2)规格:96T/48T
异丙基 4-羟基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物 (吡罗昔康杂质 L) Isopropyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide (Piroxicam Impurity L) 质量规格:美国进口 英文名称RatHIF-1αELISAKit大鼠低氧诱导因子-1α(HIF-1α)规格:96T/48T
沙卡林N-(2-醋酸异丙基酯)(吡罗昔康杂质 F) Saccharin N-(2-Acetic Acid Isopropyl Ester)(Piroxicam Impurity F) 质量规格:美国进口 英文名称RatHIF-1αELISAKit大鼠低氧诱导因子-1α(HIF-1α)规格:96T/48T
C58C1 感受态细胞100ul*100英文名称RatHeatShockProtein40大鼠热休克蛋白40(HSP40)规格:96T/48T α-去环己基-α-苯基奥昔布宁 α-Descyclohexyl-α-phenyl Oxybutynin 质量规格:美国进口
英文名称Ratheatshockprotein60大鼠热休克蛋白60(Hsp60)规格:96T/48T (S)-N-去乙基盐酸奥昔布宁 (S)-N-Desethyl Oxybutynin Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称Ratheatshockprotein60大鼠热休克蛋白60(Hsp60)规格:96T/48T (S)-盐酸奥昔布宁 (S)-Oxybutynin hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称RatHeatShockProtein70大鼠热休克蛋白70(HSP70)规格:96T/48T 脱氟帕罗西汀盐酸盐 Defluoro Paroxetine, Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称RatHeatShockProtein70大鼠热休克蛋白70(HSP70)规格:96T/48T 帕罗西汀马来酸盐 Paroxetine maleate 质量规格:美国进口
英文名称RatHeatShockProtein90大鼠热休克蛋白90(HSP90)ELISA试剂盒规格:96T/48T 4-羟基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸乙酯 1,1-二氧化物 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylic acid ethyl ester 1,1-Dioxide 质量规格:美国进口
英文名称RatHeatShockProtein90大鼠热休克蛋白90(HSP90)ELISA试剂盒规格:96T/48T 甲基4-羟基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物 Methyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide 质量规格:美国进口
英文名称Rathemeoxygenase-1大鼠血红素氧合酶1(HO-1)规格:96T/48T 去甲基吡罗昔康(吡罗昔康杂质B) Desmethyl Piroxicam (Piroxicam Impurity B) 质量规格:美国进口
英文名称Rathemeoxygenase-1大鼠血红素氧合酶1(HO-1)规格:96T/48T 甲基4-羟基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物 Methyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide 质量规格:美国进口
英文名称Rathemeoxygenase-2大鼠血红素氧合酶2(HO-2)规格:96T/48T 异丙基4-羟基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物 (吡罗昔康杂质I) Isopropyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide (Piroxicam Impurity I) 质量规格:美国进口
C58C1 感受态细胞100ul*100操作说明:
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
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