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- 详细信息
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- 技术资料
- 库存:
48
- 英文名:
C43(DE3)pLysS 感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ul*10
产品描述:
C43(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*10注意事项:
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
原代肾实质细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1ml盐酸曲美他嗪Trimetazidine dihydrochloride质量规格:>97%,EP
IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 人细胞裂解液 (阳性对照) 胶原蛋白(I型)Collagen质量规格:I型,牛跟踺
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS2维替泊芬Verteporfin质量规格:>97%,BR
Calu-6细胞,人肺癌细胞系(未分化) 大鼠肝星形细胞,CFSC-2G细胞 CM-M097小鼠皮下脂肪细胞完全培养基100mL胶原蛋白(BR)Collagen质量规格:BR,鱼鳞或鱼皮提取
SK-BR-3(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2右雷佐生;右丙亚胺Dexrazoxane质量规格:>98%,BR
人肝细胞RNAHH miRNA5 μg白蜡树素(标准品)Dimethylfraxetin质量规格:HPLC≥98%,标准品
大鼠心肌细胞(RCM)(1×106)白术内酯Ⅰ(标准品)Atractylenolide I质量规格:HPLC≥98%,标准品
荷兰白花奶牛牛肺细胞;DCL1白术内酯III(标准品)Atractylenolide III质量规格:HPLC≥98%,标准品
T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795 小鼠肾成纤维细胞完全培养基 100mL白头翁皂苷B4(标准品)Anemoside B4质量规格:HPLC≥98%,标准品
人绒毛间充质成纤维细胞 Human百秋李醇Patchouli alcohol质量规格:TLC≥98%,标准品
盐酸贝那替嗪(标准品) BENACTYZINE HYDROCHLORIDE 质量规格:含量测定 小鼠镍纹蛋白(MEN)ELISA试剂盒 ,英文名: MEN ELISA Kit
安替比林(标准品) Antipyrine 质量规格:≥99%(GC),标准品 小鼠凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX1)ELISA试剂盒 ,英文名: LOX1 ELISA Kit
安替比林 Antipyrine 质量规格:>99%,进口分包 小鼠凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)ELISA试剂盒 ,英文名: LOX-1 ELISA Kit
麝香草酚(标准品) Thymol 质量规格:含量测定 小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒 ,英文名: Gelsolin ELISA Kit
荧光素钠(标准品) Fluorescein disodium salt 质量规格:含量测定 小鼠凝溶胶蛋白(GS)ELISA试剂盒 ,英文名: GS ELISA Kit
甲硝唑杂质A(2-甲基-5-硝基咪唑)标准品 2-Methyl-5-nitroimidazole 质量规格:检查 小鼠凝血酶/抗凝血酶复合体(TAT)ELISA试剂盒 ,英文名: TAT ELISA Kit
硫酸双肼屈嗪(标准品) Dihydralazine sulphate 质量规格:含量测定 小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
盐酸阿米替林(标准品) Amitriptyline HCl 质量规格:含量测定 小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA检测试剂盒Mousethrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit 96T/48T
异丙托铵(标准品) IPRATROPIUM BROMIDE 质量规格:含量测定 小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒 ,英文名: TAT ELISA Kit
赖氨匹林(标准品) DL-Lysine Acetylsalicylate 质量规格:UV法含量测定 小鼠凝血酶受体()ELISA检测试剂盒Mousethrombieceptor,ELISAKit 96T/48T
C43(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*10小鼠尿调蛋白(UMOD)ELISA试剂盒 ,英文名: UMOD ELISA Kit 盐酸赛庚啶(标准品) CYPROHEPTADINE HYDROCHLORIDE 质量规格:HPLC法含量测定
小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA试剂盒 ,英文名: ALB ELISA Kit 氨基比林(标准品) Amidopyrine/aminopyrine 质量规格:含量测定
小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 沙利度胺(标准品) Thalidomide 质量规格:含量测定
小鼠镍纹蛋白(MEN)ELISA试剂盒 ,英文名: MEN ELISA Kit 盐酸贝那替嗪(标准品) BENACTYZINE HYDROCHLORIDE 质量规格:含量测定
小鼠凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX1)ELISA试剂盒 ,英文名: LOX1 ELISA Kit 安替比林(标准品) Antipyrine 质量规格:≥99%(GC),标准品
小鼠凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)ELISA试剂盒 ,英文名: LOX-1 ELISA Kit 安替比林 Antipyrine 质量规格:>99%,进口分包
小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒 ,英文名: Gelsolin ELISA Kit 麝香草酚(标准品) Thymol 质量规格:含量测定
小鼠凝溶胶蛋白(GS)ELISA试剂盒 ,英文名: GS ELISA Kit 荧光素钠(标准品) Fluorescein disodium salt 质量规格:含量测定
小鼠凝血酶/抗凝血酶复合体(TAT)ELISA试剂盒 ,英文名: TAT ELISA Kit 甲硝唑杂质A(2-甲基-5-硝基咪唑)标准品 2-Methyl-5-nitroimidazole 质量规格:检查
小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 硫酸双肼屈嗪(标准品) Dihydralazine sulphate 质量规格:含量测定
C43(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*10操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
| 产品名称 | 包装 | 分类 |
| C43(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*10 | 100ul*10 | 表达感受态细胞 |
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
原代肾实质细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1ml盐酸曲美他嗪Trimetazidine dihydrochloride质量规格:>97%,EP
IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 人细胞裂解液 (阳性对照) 胶原蛋白(I型)Collagen质量规格:I型,牛跟踺
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS2维替泊芬Verteporfin质量规格:>97%,BR
Calu-6细胞,人肺癌细胞系(未分化) 大鼠肝星形细胞,CFSC-2G细胞 CM-M097小鼠皮下脂肪细胞完全培养基100mL胶原蛋白(BR)Collagen质量规格:BR,鱼鳞或鱼皮提取
SK-BR-3(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2右雷佐生;右丙亚胺Dexrazoxane质量规格:>98%,BR
人肝细胞RNAHH miRNA5 μg白蜡树素(标准品)Dimethylfraxetin质量规格:HPLC≥98%,标准品
大鼠心肌细胞(RCM)(1×106)白术内酯Ⅰ(标准品)Atractylenolide I质量规格:HPLC≥98%,标准品
荷兰白花奶牛牛肺细胞;DCL1白术内酯III(标准品)Atractylenolide III质量规格:HPLC≥98%,标准品
T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795 小鼠肾成纤维细胞完全培养基 100mL白头翁皂苷B4(标准品)Anemoside B4质量规格:HPLC≥98%,标准品
人绒毛间充质成纤维细胞 Human百秋李醇Patchouli alcohol质量规格:TLC≥98%,标准品
盐酸贝那替嗪(标准品) BENACTYZINE HYDROCHLORIDE 质量规格:含量测定 小鼠镍纹蛋白(MEN)ELISA试剂盒 ,英文名: MEN ELISA Kit
安替比林(标准品) Antipyrine 质量规格:≥99%(GC),标准品 小鼠凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX1)ELISA试剂盒 ,英文名: LOX1 ELISA Kit
安替比林 Antipyrine 质量规格:>99%,进口分包 小鼠凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)ELISA试剂盒 ,英文名: LOX-1 ELISA Kit
麝香草酚(标准品) Thymol 质量规格:含量测定 小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒 ,英文名: Gelsolin ELISA Kit
荧光素钠(标准品) Fluorescein disodium salt 质量规格:含量测定 小鼠凝溶胶蛋白(GS)ELISA试剂盒 ,英文名: GS ELISA Kit
甲硝唑杂质A(2-甲基-5-硝基咪唑)标准品 2-Methyl-5-nitroimidazole 质量规格:检查 小鼠凝血酶/抗凝血酶复合体(TAT)ELISA试剂盒 ,英文名: TAT ELISA Kit
硫酸双肼屈嗪(标准品) Dihydralazine sulphate 质量规格:含量测定 小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
盐酸阿米替林(标准品) Amitriptyline HCl 质量规格:含量测定 小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA检测试剂盒Mousethrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit 96T/48T
异丙托铵(标准品) IPRATROPIUM BROMIDE 质量规格:含量测定 小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒 ,英文名: TAT ELISA Kit
赖氨匹林(标准品) DL-Lysine Acetylsalicylate 质量规格:UV法含量测定 小鼠凝血酶受体()ELISA检测试剂盒Mousethrombieceptor,ELISAKit 96T/48T
C43(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*10小鼠尿调蛋白(UMOD)ELISA试剂盒 ,英文名: UMOD ELISA Kit 盐酸赛庚啶(标准品) CYPROHEPTADINE HYDROCHLORIDE 质量规格:HPLC法含量测定
小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA试剂盒 ,英文名: ALB ELISA Kit 氨基比林(标准品) Amidopyrine/aminopyrine 质量规格:含量测定
小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 沙利度胺(标准品) Thalidomide 质量规格:含量测定
小鼠镍纹蛋白(MEN)ELISA试剂盒 ,英文名: MEN ELISA Kit 盐酸贝那替嗪(标准品) BENACTYZINE HYDROCHLORIDE 质量规格:含量测定
小鼠凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX1)ELISA试剂盒 ,英文名: LOX1 ELISA Kit 安替比林(标准品) Antipyrine 质量规格:≥99%(GC),标准品
小鼠凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)ELISA试剂盒 ,英文名: LOX-1 ELISA Kit 安替比林 Antipyrine 质量规格:>99%,进口分包
小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒 ,英文名: Gelsolin ELISA Kit 麝香草酚(标准品) Thymol 质量规格:含量测定
小鼠凝溶胶蛋白(GS)ELISA试剂盒 ,英文名: GS ELISA Kit 荧光素钠(标准品) Fluorescein disodium salt 质量规格:含量测定
小鼠凝血酶/抗凝血酶复合体(TAT)ELISA试剂盒 ,英文名: TAT ELISA Kit 甲硝唑杂质A(2-甲基-5-硝基咪唑)标准品 2-Methyl-5-nitroimidazole 质量规格:检查
小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 硫酸双肼屈嗪(标准品) Dihydralazine sulphate 质量规格:含量测定
C43(DE3)pLysS 感受态细胞100ul*10操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
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