C43(DE3) 电击感受态细胞50ul*10

产品名称：C43(DE3) 电击感受态细胞50ul*10
规格：50ul*10
分类：表达感受态细胞
保存条件（保质期）：   -80℃（6个月）

C43(DE3) 电击感受态细胞50ul*10培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
C43(DE3) 电击感受态细胞50ul*10注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3.  当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
C43(DE3) 电击感受态细胞50ul*10操作说明：
1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19；   --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-C盐酸沙氟沙星;盐酸沙拉沙星Sarafloxacin HCl质量规格：>97%,BR
Pt K1细胞，长鼻袋鼠肾细胞 人胰腺腺癌细胞,Panc 10.05细胞 CM-M095小鼠成年表皮角质形成层细胞完全培养基100mL盐酸沙氟沙星;盐酸沙拉沙星(标准品)Sarafloxacin HCl质量规格：HPLC≥98.0%,标准品
大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-1甲硫二苯马尼/二苯马尼甲硫酸盐Diphemanil mesylate质量规格：>98%
KDR Others Human 人 VEGFR2 / CD309 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲硫二苯马尼(标准品)Diphemanil mesylate质量规格：>98%,标准品
原代肾实质细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml吡嗪-2-羧酸，吡嗪单羧酸2-Pyrazinecarboxylic acid质量规格：含量98%，化学
PA319 人大肠癌细胞白鲜碱(标准品)Dictamnine质量规格：HPLC≥98%,标准品
CL-0466WI38/VA13(SV-40Z转化肺成纤维细胞)5×106cells/瓶×2罗替戈汀Rotigotine质量规格：>95%,BR
小鼠神经干细胞(EGFP标记)盐酸罗替戈汀Rotigotine Hydrochloride质量规格：>97%,BR
人淋巴细胞;1301 人肠动脉内皮细胞完全培养基 100mL右雷佐生盐酸盐;右丙亚胺盐酸盐Dexrazoxane HCl质量规格：>99%,BR
人肝星形细胞HHSteCSGI-1776SGI-1776；SGI1776质量规格：>98%,Pim1抑制剂
盐酸布比卡因(标准品)  Bupivacaine HCl  质量规格：标准品,用于含量测定 大鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA检测试剂盒RatE-SelectinELISAkit 96T/48T
盐酸布替萘芬  Butenafine HCl  质量规格：>99%,JP16 大鼠FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA检测试剂盒RatFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit 96T/48T
卡托普利  Captopril  质量规格：>98%,USP34,BR,可用于细胞培养 大鼠FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)ELISA检测试剂盒RatFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit 96T/48T
卡托普利（标准品）  Captopril  质量规格：HPLC>99%,标准品 大鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA检测试剂盒RatL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit 96T/48T
卡比多巴  (S)-Carbidopa  质量规格：>98.5%,BR,可用于细胞培养,一水合物 大鼠N端前脑素(-proBNP)ELISA检测试剂盒RatN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKIT 96T/48T
卡比多巴（标准品）  (S)-Carbidopa  质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA检测试剂盒RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit 96T/48T
醋酸氯地孕酮（标准品）  Chlormadinone Acetate  质量规格：>98%,标准品 大鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA检测试剂盒RatN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit 96T/48T
醋酸氯地孕酮  Chlormadinone Acetate  质量规格：>98% 大鼠p16基因甲基化检测试剂盒20
盐酸环丙沙星  Ciprofloxacin HCL  质量规格：>99%,USP34,BR,可用于细胞培养 大鼠PDGFβ基因甲基化检测试剂盒20
盐酸环丙沙星（标准品）  Ciprofloxacin HCL  质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠PGES基因甲基化检测试剂盒20
C43(DE3) 电击感受态细胞50ul*10大鼠ERβ基因甲基化检测试剂盒20 盐酸布比卡因  Bupivacaine HCl  质量规格：>95%,USP
大鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA检测试剂盒RatE-Selectin 96T/48T 盐酸布比卡因(标准品)  Bupivacaine HCl  质量规格：标准品,用于含量测定
大鼠FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA检测试剂盒RatFMS-liketyrosinekinase3,Flt3 96T/48T 盐酸布替萘芬  Butenafine HCl  质量规格：>99%,JP16
大鼠FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)ELISA检测试剂盒RatFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3L 96T/48T 卡托普利  Captopril  质量规格：>98%,USP34,BR,可用于细胞培养
大鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA检测试剂盒RatL-Phenylalanineammonla-lyase,PAL 96T/48T 卡托普利（标准品）  Captopril  质量规格：HPLC>99%,标准品
大鼠N端前脑素(-proBNP)ELISA检测试剂盒RatN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNP 96T/48T 卡比多巴  (S)-Carbidopa  质量规格：>98.5%,BR,可用于细胞培养,一水合物
大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA检测试剂盒RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG 96T/48T 卡比多巴（标准品）  (S)-Carbidopa  质量规格：HPLC>98%,标准品
大鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA检测试剂盒RatN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP 96T/48T 醋酸氯地孕酮（标准品）  Chlormadinone Acetate  质量规格：>98%,标准品
大鼠p16基因甲基化检测试剂盒20 醋酸氯地孕酮  Chlormadinone Acetate  质量规格：>98%
大鼠PDGFβ基因甲基化检测试剂盒20 盐酸环丙沙星  Ciprofloxacin HCL  质量规格：>99%,USP34,BR,可用于细胞培养