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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
20
- 英文名:
BL21 感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ul*10
产品描述:
BL21 感受态细胞100ul*10注意事项:
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
人胚肺成纤维细胞;CCC-HPF-1依泽替米贝β-D-葡萄糖苷酸Ezetimibe β-D-Glucuronide质量规格:美国进口
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 安普那韦-d4Amprenavir-d4质量规格:美国进口
支气管成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)4'-羟基华法林4'-Hydroxy Warfarin质量规格:美国进口
ASGR2 Others Human 人 ASGR2 人细胞裂解液 (阳性对照) 6-羟基华法林6-Hydroxy Warfarin质量规格:美国进口
大鼠子宫内膜上皮细胞完全培养基 100mL7-羟基华法林7-Hydroxy Warfarin质量规格:美国进口
EGF Protein Human 重组人 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 标签)变色酸2RChromotrope 2R质量规格:AR
293ET(人胚肾细胞(SV40T和EBNA1基因修饰细胞)) 5×106cells/瓶×2 原代心肌细胞特制基础培养基Many types of cells包装:500/250/100ml1钼酸Phosphomolybdic acid hydrate质量规格:BC
人虹膜色素上皮细胞cDNAHIPEpiC cDNA甘氨酸Glycine质量规格:>99%,美仑
小鼠骨髓间充质肝细胞(MMSC-bm)(5×105)甘氨酸(Sigma)Glycine质量规格:>98%,sigma分装
大鼠脑胶质瘤细胞;C6L-甘氨酸(标准品)L-Glycine质量规格:HPLC≥98%,标准品
氧代坡模酸甲酯 HPLC≥95% 20mg RatIerferonγ,IFN-γELISA试剂盒大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Alpha生育三烯酚 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin1,IL-1ELISAKit大鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
佛波醇 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin1,IL-1ELISA试剂盒大鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
三七皂苷T HPLC≥95% 20mg RatIerleukin10,IL-10ELISAKit大鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格:96T/48T
帕克醇 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin10,IL-10ELISA试剂盒大鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格:96T/48T
没食子酰基奎宁酸 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin11,IL-11ELISAKit大鼠白介素11(IL-11)ELISA试剂盒规格:96T/48T
没食子酰基奎宁酸 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin11,IL-11ELISA试剂盒大鼠白介素11(IL-11)ELISA试剂盒规格:96T/48T
去氧苏木查耳酮 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin12,IL-12/P40ELISAKit大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒规格:96T/48T
过氧去氢土莫酸 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin12,IL-12/P40ELISA试剂盒大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒规格:96T/48T
去氢土莫酸 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin12,IL-12/P70ELISAKit大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒规格:96T/48T
BL21 感受态细胞100ul*10RatIerferonγ,IFN-γ大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 贝萼皂苷元甲酯 HPLC≥95% 20mg
RatIerferonγ,IFN-γELISA试剂盒大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 氧代坡模酸甲酯 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin1,IL-1大鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T Alpha生育三烯酚 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin1,IL-1ELISA试剂盒大鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T 佛波醇 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin10,IL-10大鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格:96T/48T 三七皂苷T HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin10,IL-10ELISA试剂盒大鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格:96T/48T 帕克醇 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin11,IL-11大鼠白介素11(IL-11)ELISA试剂盒规格:96T/48T 没食子酰基奎宁酸 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin11,IL-11ELISA试剂盒大鼠白介素11(IL-11)ELISA试剂盒规格:96T/48T 没食子酰基奎宁酸 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin12,IL-12/P40大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒规格:96T/48T 去氧苏木查耳酮 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin12,IL-12/P40ELISA试剂盒大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒规格:96T/48T 过氧去氢土莫酸 HPLC≥95% 20mg
BL21 感受态细胞100ul*10操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
| 产品名称 | 包装 | 分类 |
| BL21 感受态细胞100ul*10 | 100ul*10 | 表达感受态细胞 |
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
人胚肺成纤维细胞;CCC-HPF-1依泽替米贝β-D-葡萄糖苷酸Ezetimibe β-D-Glucuronide质量规格:美国进口
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 安普那韦-d4Amprenavir-d4质量规格:美国进口
支气管成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)4'-羟基华法林4'-Hydroxy Warfarin质量规格:美国进口
ASGR2 Others Human 人 ASGR2 人细胞裂解液 (阳性对照) 6-羟基华法林6-Hydroxy Warfarin质量规格:美国进口
大鼠子宫内膜上皮细胞完全培养基 100mL7-羟基华法林7-Hydroxy Warfarin质量规格:美国进口
EGF Protein Human 重组人 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 标签)变色酸2RChromotrope 2R质量规格:AR
293ET(人胚肾细胞(SV40T和EBNA1基因修饰细胞)) 5×106cells/瓶×2 原代心肌细胞特制基础培养基Many types of cells包装:500/250/100ml1钼酸Phosphomolybdic acid hydrate质量规格:BC
人虹膜色素上皮细胞cDNAHIPEpiC cDNA甘氨酸Glycine质量规格:>99%,美仑
小鼠骨髓间充质肝细胞(MMSC-bm)(5×105)甘氨酸(Sigma)Glycine质量规格:>98%,sigma分装
大鼠脑胶质瘤细胞;C6L-甘氨酸(标准品)L-Glycine质量规格:HPLC≥98%,标准品
氧代坡模酸甲酯 HPLC≥95% 20mg RatIerferonγ,IFN-γELISA试剂盒大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Alpha生育三烯酚 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin1,IL-1ELISAKit大鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
佛波醇 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin1,IL-1ELISA试剂盒大鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
三七皂苷T HPLC≥95% 20mg RatIerleukin10,IL-10ELISAKit大鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格:96T/48T
帕克醇 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin10,IL-10ELISA试剂盒大鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格:96T/48T
没食子酰基奎宁酸 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin11,IL-11ELISAKit大鼠白介素11(IL-11)ELISA试剂盒规格:96T/48T
没食子酰基奎宁酸 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin11,IL-11ELISA试剂盒大鼠白介素11(IL-11)ELISA试剂盒规格:96T/48T
去氧苏木查耳酮 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin12,IL-12/P40ELISAKit大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒规格:96T/48T
过氧去氢土莫酸 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin12,IL-12/P40ELISA试剂盒大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒规格:96T/48T
去氢土莫酸 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin12,IL-12/P70ELISAKit大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒规格:96T/48T
BL21 感受态细胞100ul*10RatIerferonγ,IFN-γ大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 贝萼皂苷元甲酯 HPLC≥95% 20mg
RatIerferonγ,IFN-γELISA试剂盒大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 氧代坡模酸甲酯 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin1,IL-1大鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T Alpha生育三烯酚 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin1,IL-1ELISA试剂盒大鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T 佛波醇 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin10,IL-10大鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格:96T/48T 三七皂苷T HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin10,IL-10ELISA试剂盒大鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格:96T/48T 帕克醇 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin11,IL-11大鼠白介素11(IL-11)ELISA试剂盒规格:96T/48T 没食子酰基奎宁酸 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin11,IL-11ELISA试剂盒大鼠白介素11(IL-11)ELISA试剂盒规格:96T/48T 没食子酰基奎宁酸 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin12,IL-12/P40大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒规格:96T/48T 去氧苏木查耳酮 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin12,IL-12/P40ELISA试剂盒大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒规格:96T/48T 过氧去氢土莫酸 HPLC≥95% 20mg
BL21 感受态细胞100ul*10操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
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