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39
- 英文名：
MG1655 感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100ul*10
产品名称：MG1655 感受态细胞100ul*10
规格：100ul*10
分类：克隆感受态细胞
保存条件（保质期）： -80℃（6个月）
MG1655 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
MG1655 感受态细胞100ul*10注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
MG1655 感受态细胞100ul*10操作说明：
1. 0.1
cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19； --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
脂肪细胞培养基AdM胰凝乳蛋白酶原 AChymotrypsinogen A质量规格：酶活：>1500 U/mg,BC
CLEC1A Others Rat 大鼠 CLEC1A / CLEC-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 汽巴蓝Cibacron blue 3G-A质量规格：ACS Grade
大鼠胰岛细胞完全培养基 100mLDEAE葡聚糖DEAE Dextran质量规格：BR
MLE-12小鼠肺上皮细胞株 MLE-12 mouse lung epithelial cell lines DMEM/F12+2%FBS氟啶酮(>98%,植物激素级)Fluridone质量规格：>98%,植物激素级
NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 标签)组胺(>98%,BC)Histamine质量规格：>98%,BC
人滑膜细胞RNAHS miRNA5 μg丙谷胺（标准品）Proglumide质量规格：含量测定
LRRN3 Others Human 人 LRRN3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) GW501516GW501516(GSK-516; GW1516)质量规格：>98%,高度选择性的PPARβ/δ激动剂
牛胚气管细胞;EB (NBL-4)布洛芬（标准品）Ibuprofen质量规格：含量测定
A172细胞，胶质母细胞瘤细胞 肝细胞癌,HepG2细胞 人结直肠腺癌细胞;COLO 205比沙可啶（标准品）Bisacodyl质量规格：含量测定
小鼠肉瘤瘤株;S180醋酸氯己定（标准品）Chlorhexidine Acatate质量规格：含量测定
依前列醇钠 HPLC≥98% 20mg HumaumormarkerDR-70forlungcancer,DR-70TMELISAKit人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
*泊苷 HPLC≥98% 20mg Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AIL-R1ELISAKit人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(AIL-R1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰蝙蝠葛苏林碱 HPLC≥98% 10mg Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,AIL-R4ELISAKit人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(AIL-R4)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰丁香酮 GC≥98% 20mg HumaumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSFELISAKit人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TGSF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰哈巴苷 HPLC≥98% 20mg HumaypeⅡcollagenhelicalpeptide，HELIX-ⅡELISAKit人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰化白藜芦醇 HPLC≥98% 20mg Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰黄芪皂苷I HPLC≥98% 10mg Humayrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains1,Tie1ELISAKit人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰基二氢美味草素A HPLC≥98% 10mg HVA高效液相色谱电化学定量检测试剂盒20
乙酰蒲公英萜醇 HPLC≥98% 20mg Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISA试剂盒鸡17羟皮质类(17-OHCS)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰升麻醇OαL阿拉伯糖苷 HPLC≥98% 20mg IGF蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
MG1655 感受态细胞100ul*10HumaumormarkerDR-70forlungcancer,DR-70TM人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)ELISA试剂盒规格：96T/48T 依前列醇钠 HPLC≥98% 20mg
Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AIL-R1人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(AIL-R1)ELISA试剂盒规格：96T/48T *泊苷 HPLC≥98% 20mg
Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,AIL-R4人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(AIL-R4)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酰蝙蝠葛苏林碱 HPLC≥98% 10mg
HumaumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSF人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TGSF)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酰丁香酮 GC≥98% 20mg
HumaypeⅡcollagenhelicalpeptide，HELIX-Ⅱ人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酰哈巴苷 HPLC≥98% 20mg
Humayrosinekinase2,Tyk-2人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酰化白藜芦醇 HPLC≥98% 20mg
Humayrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains1,Tie1人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酰黄芪皂苷I HPLC≥98% 10mg
HVA高效液相色谱电化学定量检测试剂盒20 乙酰基二氢美味草素A HPLC≥98% 10mg
Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISA试剂盒鸡17羟皮质类(17-OHCS)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酰蒲公英萜醇 HPLC≥98% 20mg
IGF蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25 乙酰升麻醇OαL阿拉伯糖苷 HPLC≥98% 20mg
规格：100ul*10
分类：克隆感受态细胞
保存条件（保质期）： -80℃（6个月）
MG1655 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
MG1655 感受态细胞100ul*10注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
MG1655 感受态细胞100ul*10操作说明：
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19； --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
脂肪细胞培养基AdM胰凝乳蛋白酶原 AChymotrypsinogen A质量规格：酶活：>1500 U/mg,BC
CLEC1A Others Rat 大鼠 CLEC1A / CLEC-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 汽巴蓝Cibacron blue 3G-A质量规格：ACS Grade
大鼠胰岛细胞完全培养基 100mLDEAE葡聚糖DEAE Dextran质量规格：BR
MLE-12小鼠肺上皮细胞株 MLE-12 mouse lung epithelial cell lines DMEM/F12+2%FBS氟啶酮(>98%,植物激素级)Fluridone质量规格：>98%,植物激素级
NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 标签)组胺(>98%,BC)Histamine质量规格：>98%,BC
人滑膜细胞RNAHS miRNA5 μg丙谷胺（标准品）Proglumide质量规格：含量测定
LRRN3 Others Human 人 LRRN3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) GW501516GW501516(GSK-516; GW1516)质量规格：>98%,高度选择性的PPARβ/δ激动剂
牛胚气管细胞;EB (NBL-4)布洛芬（标准品）Ibuprofen质量规格：含量测定
A172细胞，胶质母细胞瘤细胞 肝细胞癌,HepG2细胞 人结直肠腺癌细胞;COLO 205比沙可啶（标准品）Bisacodyl质量规格：含量测定
小鼠肉瘤瘤株;S180醋酸氯己定（标准品）Chlorhexidine Acatate质量规格：含量测定
依前列醇钠 HPLC≥98% 20mg HumaumormarkerDR-70forlungcancer,DR-70TMELISAKit人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
*泊苷 HPLC≥98% 20mg Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AIL-R1ELISAKit人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(AIL-R1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰蝙蝠葛苏林碱 HPLC≥98% 10mg Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,AIL-R4ELISAKit人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(AIL-R4)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰丁香酮 GC≥98% 20mg HumaumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSFELISAKit人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TGSF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰哈巴苷 HPLC≥98% 20mg HumaypeⅡcollagenhelicalpeptide，HELIX-ⅡELISAKit人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰化白藜芦醇 HPLC≥98% 20mg Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰黄芪皂苷I HPLC≥98% 10mg Humayrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains1,Tie1ELISAKit人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰基二氢美味草素A HPLC≥98% 10mg HVA高效液相色谱电化学定量检测试剂盒20
乙酰蒲公英萜醇 HPLC≥98% 20mg Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISA试剂盒鸡17羟皮质类(17-OHCS)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰升麻醇OαL阿拉伯糖苷 HPLC≥98% 20mg IGF蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
MG1655 感受态细胞100ul*10HumaumormarkerDR-70forlungcancer,DR-70TM人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)ELISA试剂盒规格：96T/48T 依前列醇钠 HPLC≥98% 20mg
Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AIL-R1人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(AIL-R1)ELISA试剂盒规格：96T/48T *泊苷 HPLC≥98% 20mg
Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,AIL-R4人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(AIL-R4)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酰蝙蝠葛苏林碱 HPLC≥98% 10mg
HumaumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSF人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TGSF)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酰丁香酮 GC≥98% 20mg
HumaypeⅡcollagenhelicalpeptide，HELIX-Ⅱ人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酰哈巴苷 HPLC≥98% 20mg
Humayrosinekinase2,Tyk-2人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酰化白藜芦醇 HPLC≥98% 20mg
Humayrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains1,Tie1人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酰黄芪皂苷I HPLC≥98% 10mg
HVA高效液相色谱电化学定量检测试剂盒20 乙酰基二氢美味草素A HPLC≥98% 10mg
Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISA试剂盒鸡17羟皮质类(17-OHCS)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酰蒲公英萜醇 HPLC≥98% 20mg
IGF蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25 乙酰升麻醇OαL阿拉伯糖苷 HPLC≥98% 20mg
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