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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
31
- 英文名:
GT115 电击感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50ul*5
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述:
| 产品名称 | 包装 | 分类 |
| GT115 电击感受态细胞50ul*5 | 50ul*5 | 克隆感受态细胞 |
GT115 电击感受态细胞50ul*5操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
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甲酰胺 Formamide 质量规格:>99%,BR 淡绿(LIGHTGREEN)复染试剂盒50
GT115 电击感受态细胞50ul*5单核白细胞/淋巴细胞分离试剂盒10 月桂酰基肌氨酸钠(分子生物学级) Sodium lauroyl sarcosine 质量规格:>95%,分子生物学级
单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA检测试剂盒Monkeymonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP1/MCAF 96T/48T 乙酸铵(分子生物学级) Ammonium acetate 质量规格:>98%,分子生物学级
单核细胞增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20 微晶纤维素(100 um) Cellulose, Microcrystalline 质量规格:BR,100 um
单酸甘油脂脂解酶(monoacylglycerollipase)活性比色法定量检测试剂盒20 乳糖;α-乳糖,一水 alpha-Lactose, monohydrate 质量规格:BR
单线态氧气清除(scavenging)活性比色法筛选试剂盒20 氯化钙二水 Calcium chloride, dihydrate 质量规格:>99%,BR
单线态氧气清除(scavenging)活性荧光筛选试剂盒20 乙二醇 Ethylene glycol 质量规格:BR
胆转运功能检测试剂盒20 硫酸镁七水(分子生物学级) Magnesium sulfate, heptahydrate 质量规格:>98%,分子生物
胆红素(Bilirubin)定量检测试剂盒50 糖化酶;葡萄糖淀粉酶 Glucozyme 质量规格:BR,10万u/G
胆碱酯酶(CHE)定量检测试剂盒50 聚乙二醇4000 PEG 4000 质量规格:>99%,BR
胆碱酯酶(CHE)活性比色法定量检测试剂盒20 无水氢二钾 Potassium phosphate, dibasic, anhydrous 质量规格:>98%,BR
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