GT115 电击感受态细胞50ul*20

GT115 电击感受态细胞50ul*20培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
产品名称：GT115 电击感受态细胞50ul*20
规格：50ul*20
分类：克隆感受态细胞
保存条件（保质期）：   -80℃（6个月）

GT115 电击感受态细胞50ul*20注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3.  当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
ULBP2 Others Human 人 ULBP2 / N2DL-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙酸铵(分子生物学级)Ammonium acetate质量规格：>98%,分子生物学级
KG-1 人髓性红白血病细胞微晶纤维素(100 um)Cellulose, Microcrystalline质量规格：BR,100 um
HeLa 229人细胞 HeLa 229 human cervical cancer cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS乳糖；α-乳糖,一水alpha-Lactose, monohydrate质量规格：BR
HGF Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白氯化钙二水Calcium chloride, dihydrate质量规格：>99%,BR
小鼠周神经成纤维细胞(MPNF)(5×105) HL-60, 人早幼粒白血病细胞 Human乙二醇Ethylene glycol质量规格：BR
SPN Others Mouse 小鼠 SPN / CD43 人细胞裂解液 (阳性对照) 布地奈德-d8Budesonide-d8质量规格：美国进口
EJ 人膀胱癌细胞6α-羟基布地奈德6α-Hydroxy Budesonide质量规格：美国进口
SW1116人结肠腺癌细胞 SW1116 human colon adenocarcinoma cells L-15培养基(GIBCO)+10%FBS6β-羟基布地奈德6β-Hydroxy Budesonide质量规格：美国进口
CD70 Protein Rat 重组大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 标签)亚叶酸钙水合物Folinic acid calcium salt hydrate质量规格：美国进口
人脂肪细胞-内脏(HPA-v)(1×106 ) MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞 Human喜树碱钠盐Sodium Camptothecin质量规格：美国进口
乙基betaD吡喃葡萄糖苷 HPLC≥98% 5mg RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA试剂盒大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酸(肉)桂酯 HPLC≥98% 5mg RaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISAKit大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酸Delta香树精酯 HPLC≥98% 5mg RaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISA试剂盒大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酸茶酸酯 HPLC≥98% 5mg RaeninELISAKit大鼠肾素(Renin)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酸东莨菪素酯 HPLC≥98% 5mg RaeninELISA试剂盒大鼠肾素(Renin)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酸二聚松柏酯 HPLC≥98% 5mg raesistinELISAKit大鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酸六棱菊亭酯 HPLC≥98% 5mg raesistinELISA试剂盒大鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酸维生素E HPLC≥98% 20mg Raetinol-bindingprotein,RBPELISAKit大鼠视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰胺 HPLC≥98% 5mg Raetinol-bindingprotein,RBPELISA试剂盒大鼠视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙酰基异柏烯酸 HPLC≥98% 5mg Raetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit大鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T
GT115 电击感受态细胞50ul*20RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKL大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒规格：96T/48T 叶下珠脂素 HPLC≥98% 5mg
RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA试剂盒大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙基betaD吡喃葡萄糖苷 HPLC≥98% 5mg
RaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAES大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酸(肉)桂酯 HPLC≥98% 5mg
RaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISA试剂盒大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酸Delta香树精酯 HPLC≥98% 5mg
Raenin大鼠肾素(Renin)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酸茶酸酯 HPLC≥98% 5mg
RaeninELISA试剂盒大鼠肾素(Renin)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酸东莨菪素酯 HPLC≥98% 5mg
raesistin大鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酸二聚松柏酯 HPLC≥98% 5mg
raesistinELISA试剂盒大鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酸六棱菊亭酯 HPLC≥98% 5mg
Raetinol-bindingprotein,RBP大鼠视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酸维生素E HPLC≥98% 20mg
Raetinol-bindingprotein,RBPELISA试剂盒大鼠视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乙酰胺 HPLC≥98% 5mg
GT115 电击感受态细胞50ul*20操作说明：
1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19；   --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。