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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
29
- 英文名:
HB101 感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ul*50
HB101 感受态细胞100ul*50注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
产品名称:HB101 感受态细胞100ul*50
规格:100ul*50
分类:克隆感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
HB101 感受态细胞100ul*50操作说明:
1. 0.1
cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
CGB7 Others Human 人 CGB7 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 硬脂酸钠(>95%,BR)Sodium stearate质量规格:>95%,BR
CL-0073DH82(犬巨噬细胞)5×106cells/瓶×2硫代硫酸钠无水(>98.5%,BC)Sodium thiosulfate anhydrous质量规格:>98.5%,BC
QGY-7701, 人肝癌细胞 肝癌细胞,Hep3B细胞 Hs 578T(癌细胞)Sulfo NHS LC BiotinSulfo NHS LC Biotin质量规格:BR
小鼠胚胎成骨细胞前体细胞;MC3T3-E1Sulfo NHS SS BiotinSulfo NHS SS Biotin质量规格:BR
SERPIND1 Others Mouse 小鼠 SerpinD1 / HCII 人细胞裂解液 (阳性对照) 四乙酰核糖(>98% (HPLC),BC)Tetraacetylribose质量规格:>98% (HPLC),BC
人成纤维母细胞-胎儿(HDF-f)( 5×105 )达格列嗪;达格列净Dapagliflozin质量规格:>97%,BR,生化试剂级
RN-s, 大鼠纹状体神经元甘草查而酮 A(标准品)Licochalcone A质量规格:含量≥98.0%,标准品
人T淋巴瘤细胞Jurkat亚系;Jurkat77 大鼠肾成纤维细胞完全培养基 100mL三氯卡班Triclocarban 质量规格:>98.0%
P815 小鼠肥大细胞癌细胞氯法齐明(标准品)Clofazimine质量规格:供TCL鉴别用
CDNF Others Mouse 小鼠 CDNF / ARMETL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 头孢呋辛酯Cefuroxime axetil质量规格:745~875μg/mg,USP
硬脂酸镁 Magnesium stearate 质量规格:BR 甲基纤维素细胞克隆试剂盒10/50/80
孔雀石绿盐酸盐(>90%,BS) Malachite green hydrochloride 质量规格:>90%,BS 甲萘醌溶液(1毫摩尔)50毫升
无水硫酸锰(>98%,BR) Manganese (II )sulfate anhydrous 质量规格:>98%,BR 甲紫(cresylviolet)复染试剂盒50
丙硫异烟胺 Prothionamide 质量规格:>98.5%,BR 简单细菌酚品红染色试剂盒50
丙硫异烟胺(标准品) Prothionamide 质量规格:>98%,标准品 简单细菌甲基蓝染色试剂盒50
重水,氧化氘(0.55ml*10) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.9% 简单细菌结晶紫染色试剂盒50
重水,氧化氘(0.6ml*10) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.9% 简易化学法冰冻切片抗原修复处理试剂盒50
重水,氧化氘(0.6ml*10) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.96% 简易化学法石蜡切片抗原修复处理试剂盒50
重水,氧化氘(10G) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.96% 胶原蛋白酶消化试剂盒20毫升
重水,氧化氘(25G) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.9% 胶原酶I(CollagenaseI)ELISA检测试剂盒MonkeyCollagenaseIELISAKit 96T/48T
HB101 感受态细胞100ul*50甲基绿复染试剂盒50 氢氧化镁(>99%,BR) Magnesium hydroxide 质量规格:>99%,BR
甲基纤维素细胞克隆试剂盒10/50/80 硬脂酸镁 Magnesium stearate 质量规格:BR
甲萘醌溶液(1毫摩尔)50毫升 孔雀石绿盐酸盐(>90%,BS) Malachite green hydrochloride 质量规格:>90%,BS
甲紫(cresylviolet)复染试剂盒50 无水硫酸锰(>98%,BR) Manganese (II )sulfate anhydrous 质量规格:>98%,BR
简单细菌酚品红染色试剂盒50 丙硫异烟胺 Prothionamide 质量规格:>98.5%,BR
简单细菌甲基蓝染色试剂盒50 丙硫异烟胺(标准品) Prothionamide 质量规格:>98%,标准品
简单细菌结晶紫染色试剂盒50 重水,氧化氘(0.55ml*10) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.9%
简易化学法冰冻切片抗原修复处理试剂盒50 重水,氧化氘(0.6ml*10) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.9%
简易化学法石蜡切片抗原修复处理试剂盒50 重水,氧化氘(0.6ml*10) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.96%
胶原蛋白酶消化试剂盒20毫升 重水,氧化氘(10G) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.96%
HB101 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
产品名称:HB101 感受态细胞100ul*50
规格:100ul*50
分类:克隆感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
HB101 感受态细胞100ul*50操作说明:
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
CGB7 Others Human 人 CGB7 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 硬脂酸钠(>95%,BR)Sodium stearate质量规格:>95%,BR
CL-0073DH82(犬巨噬细胞)5×106cells/瓶×2硫代硫酸钠无水(>98.5%,BC)Sodium thiosulfate anhydrous质量规格:>98.5%,BC
QGY-7701, 人肝癌细胞 肝癌细胞,Hep3B细胞 Hs 578T(癌细胞)Sulfo NHS LC BiotinSulfo NHS LC Biotin质量规格:BR
小鼠胚胎成骨细胞前体细胞;MC3T3-E1Sulfo NHS SS BiotinSulfo NHS SS Biotin质量规格:BR
SERPIND1 Others Mouse 小鼠 SerpinD1 / HCII 人细胞裂解液 (阳性对照) 四乙酰核糖(>98% (HPLC),BC)Tetraacetylribose质量规格:>98% (HPLC),BC
人成纤维母细胞-胎儿(HDF-f)( 5×105 )达格列嗪;达格列净Dapagliflozin质量规格:>97%,BR,生化试剂级
RN-s, 大鼠纹状体神经元甘草查而酮 A(标准品)Licochalcone A质量规格:含量≥98.0%,标准品
人T淋巴瘤细胞Jurkat亚系;Jurkat77 大鼠肾成纤维细胞完全培养基 100mL三氯卡班Triclocarban 质量规格:>98.0%
P815 小鼠肥大细胞癌细胞氯法齐明(标准品)Clofazimine质量规格:供TCL鉴别用
CDNF Others Mouse 小鼠 CDNF / ARMETL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 头孢呋辛酯Cefuroxime axetil质量规格:745~875μg/mg,USP
硬脂酸镁 Magnesium stearate 质量规格:BR 甲基纤维素细胞克隆试剂盒10/50/80
孔雀石绿盐酸盐(>90%,BS) Malachite green hydrochloride 质量规格:>90%,BS 甲萘醌溶液(1毫摩尔)50毫升
无水硫酸锰(>98%,BR) Manganese (II )sulfate anhydrous 质量规格:>98%,BR 甲紫(cresylviolet)复染试剂盒50
丙硫异烟胺 Prothionamide 质量规格:>98.5%,BR 简单细菌酚品红染色试剂盒50
丙硫异烟胺(标准品) Prothionamide 质量规格:>98%,标准品 简单细菌甲基蓝染色试剂盒50
重水,氧化氘(0.55ml*10) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.9% 简单细菌结晶紫染色试剂盒50
重水,氧化氘(0.6ml*10) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.9% 简易化学法冰冻切片抗原修复处理试剂盒50
重水,氧化氘(0.6ml*10) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.96% 简易化学法石蜡切片抗原修复处理试剂盒50
重水,氧化氘(10G) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.96% 胶原蛋白酶消化试剂盒20毫升
重水,氧化氘(25G) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.9% 胶原酶I(CollagenaseI)ELISA检测试剂盒MonkeyCollagenaseIELISAKit 96T/48T
HB101 感受态细胞100ul*50甲基绿复染试剂盒50 氢氧化镁(>99%,BR) Magnesium hydroxide 质量规格:>99%,BR
甲基纤维素细胞克隆试剂盒10/50/80 硬脂酸镁 Magnesium stearate 质量规格:BR
甲萘醌溶液(1毫摩尔)50毫升 孔雀石绿盐酸盐(>90%,BS) Malachite green hydrochloride 质量规格:>90%,BS
甲紫(cresylviolet)复染试剂盒50 无水硫酸锰(>98%,BR) Manganese (II )sulfate anhydrous 质量规格:>98%,BR
简单细菌酚品红染色试剂盒50 丙硫异烟胺 Prothionamide 质量规格:>98.5%,BR
简单细菌甲基蓝染色试剂盒50 丙硫异烟胺(标准品) Prothionamide 质量规格:>98%,标准品
简单细菌结晶紫染色试剂盒50 重水,氧化氘(0.55ml*10) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.9%
简易化学法冰冻切片抗原修复处理试剂盒50 重水,氧化氘(0.6ml*10) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.9%
简易化学法石蜡切片抗原修复处理试剂盒50 重水,氧化氘(0.6ml*10) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.96%
胶原蛋白酶消化试剂盒20毫升 重水,氧化氘(10G) Deuterium Oxide 质量规格:D,99.96%
HB101 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
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