用于qRT-PCR的SuperScript™III第一链合成

Invitrogen RT-PCR 新工具

性，因而即使是最具挑战性的模板也可以进行有效的RT-PCR.。 通过SuperMix形式快速合成cDNA SuperScript™ III First—Strand Synthesis SuperMix将所有进行强大的、灵敏的第一链cDNA合成所必须的组分组合成快速、易于使用的 SuperMix形式。SuperMix形式包含 2x RT缓冲反应混合物、dNTPs、MgCl2、 以及由SuperScript™ III RT和RNaseOUT™.组成的酶混合物。也提供优化的退火缓冲

Invitrogen RT

性，更高的cDNA产量以及更多的全长产物。Thermo-X™ RT克隆自一种嗜热真细菌，提供高达70℃的热稳定性，因而即使是最具挑战性的模板也可以进行有效的RT-PCR.。 通过SuperMix形式快速合成cDNA SuperScript™ III First—Strand Synthesis SuperMix将所有进行强大的、灵敏的第一链cDNA合成所必须的组分组合成快速、易于使用的 SuperMix形式。SuperMix形式包含 2x RT缓冲反应混合物、dNTPs、MgCl

PCR和RT-PCR

37°C-50°C    ThermoScript™ RT 42°C-65°C  RNA在高于65℃时开始水解，对于≤1kb的RNA第一链合成温度可以为70℃，对于＞1kb的RNA则需要＜65℃。 Tth热稳定聚合酶在Mg 存在条件下 作为DNA聚合酶，在Mn 存在条件下作为RNA聚合酶。它可以在最高65℃条件下保温。然而，PCR过程中Mn 的存在会降低忠实性，这使得Tth聚合酶不太适合用于高精确度的扩增，如cDNA的克隆。另外，Tth的逆转录效率较低，这会降低灵敏