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        Invitrogen RT

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        反转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction RT-PCR)是一项有效的和广泛使用的研究工具,它可以用于多种应用,包括RNA检测、基因定量以及克隆。随着这项技术的逐渐普及,针对提高速度、方便性和多用途性的革新方案的需求,也变得越来越迫切。作为反转录的领先者,Invitrogen 不断地推出满足这些需求的、新颖的、高性能的解决方案,以提供快速的cDNA合成,方便的冻干试剂RT,直接从细胞进行高产量的cDNA合成,高保真的克隆的RT-PCR以及对困难RNA模板进行更加成功的RT-PCR。
        Invitrogen 性能卓越的系统整合了可以利用的最好的RT技术,包括SuperScript™ III RT和最新推出的Thermo-X™ RT。SuperScript™ III RT是M-MLV RT基因工程 升级版本,减少了RNaseH活性,提供更高的热稳定性(1-3)。这种酶可以在高达55℃的情况下合成cDNA,比以前使用的反转录酶提供更高的特异性,更高的cDNA产量以及更多的全长产物。Thermo-X™ RT克隆自一种嗜热真细菌,提供高达70℃的热稳定性,因而即使是最具挑战性的模板也可以进行有效的RT-PCR.。

        通过SuperMix形式快速合成cDNA
        SuperScript™ III First—Strand Synthesis SuperMix将所有进行强大的、灵敏的第一链cDNA合成所必须的组分组合成快速、易于使用的 SuperMix形式。SuperMix形式包含 2x RT缓冲反应混合物、dNTPs、MgCl2、 以及由SuperScript™ III RT和RNaseOUT™.组成的酶混合物。也提供优化的退火缓冲液以提高反应灵敏度和产量。性能卓越的混合物能够从低至0.1pg的总RNA中检测到看家基因(图1)和从长达12kb的靶标中高产量地合成cDNA,以进行多种RT-PCR 应用,包括基因检测和全长基因克隆。

        图1-SuperScript™ III First--Strand Synthesis SuperMix提供卓越的灵敏度

        使用SuperScript™ III First--Strand Synthesis SuperMix,0.1pg到100pg的总HeLa RNA,和如图所示的看家基因引物对在50℃进行cDNA反应。使用Platinum® PCR SuperMix.以1min/kb进行PCR反应。使用SuperScript™III First-Strand Synthesis System进行RT-PCR 合成cDNA作为对照反应。

        方便的室温稳定(Room Temperature Stable RTS)试剂
        SuperScript™ III RTS(室温稳定Room Temperature Stable)试剂整合了您需要的一切,以方便的、一次使用的冻干分装形式提供高产量第一链cDNA合成。使用专利的冻干程序,在有冷冻保护剂存在的情况下,预混合、分装和冻干每个系统的组分。提供在室温下长达一年的稳定,同时确保酶活性的最大恢复。再次悬浮快速而简单:简单地加入引物和模板,再次悬浮反应混合物,短时vortex振荡混匀,就可以进行合成了。

        SuperScript™ III RTS第一链cDNA合成系统
        这个系统包含进行第一链cDNA合成所需要的所有组分。可以用来从低至0.1pg的总RNA中检测看家基因(housekeeping genes)(见图2),以及通过RT-PCR 从长达12kb的靶标中合成高产量的cDNA。
        在室温度下运输、贮存和组合反应混合物,使得这个RTS试剂盒成为进行多种RT-PCR应用的理想选择。

        图2-SuperScript™III RTS First-Strand Synthesis System以方便的形式提供高灵敏度

        使用SuperScript™III RTS First-Strand Synthesis System,0.1pg到100pg的总HeLa RNA和和如图所示的看家基因引物对在50℃进行cDNA合成反应。使用Platinum® PCR SuperMix.以1min/kb进行PCR反应。使用SuperScript™III First-Strand Synthesis System进行RT-PCR合成cDNA作为对照反应。

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