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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Invitrogen™ SuperScript™ VILO™ cDNA Synthesis Kit
- 规格:
50 reactions
Invitrogen™ SuperScript™ VILO™ cDNA Synthesis Kit
描述
SuperScript VILO cDNA 合成试剂盒用于制备两步法 RT-qPCR 应用所需的第一链 cDNA。该试剂盒以 2 根试剂管的形式供货,其中含有 VILO 反应混合物,同时采用单独的试剂管提供酶混合物。该酶混合物之中含有一种 SuperScript III 逆转录酶 (RT)。这是一种经过基因改造的 MMLV逆转录酶,具有更低的 RNase H 活性、更高的热稳定性,可实现高效的 cDNA 合成。该试剂盒可用于从不同起始量的 RNA 合成 cDNA。注意:为在两步法 RT-qPCR 之中实现更优异的第一链 cDNA 合成性能,我们建议使用 SuperScript IV VILO 预混液或含 ezDNase 酶 SuperScript IV VILO 的预混液。该预混液为方便的单试剂管预混液,其中包含了 cDNA 合成反应所需的所有组分。凭借高持续合成能力、热稳定的 SuperScript IV 逆转录酶及进一步优化的缓冲液,其将可靠的 VILO 技术提升至全新维度。该预混液支持在更短的时间内以更高的温度高效地进行 cDNA 合成,即便纯度欠佳或模板有限的情况下,也能够获得出色的 cDNA 得率和灵敏度。
规格
| Reverse Transcriptase: | SuperScript™ III |
|---|---|
| Ribonuclease H Activity: | Reduced |
| Downstream Application: | Real-Time Quantitative PCR (qPCR) |
| Reaction Format: | SuperMix or Master Mix |
| Sample Type (General): | RNA |
| Final Product Size(s): | 10 kb or less |
| Optimal Reaction Temperature: | 42° C |
| Primer Type: | Random Primers |
| Product Line: | SuperScript™, VILO™ |
| Product Size: | 50 reactions |
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文献和实验cDNA synthesis using superscript II
SuperScript II 1 µl water 4 µl Prepare this mix as a master mix and add then 20 µl to each reaction. Synthesize the cDNA in a thermocycler: 1.
,从而节省了花费在筛选大量PCR产物上的时间。图一 示意GeneRacer™的工作原理。RNA样品经CIP和TAP处理,保证GeneRacer™寡聚RNA仅同全长转录本连接。然后使用SuperScriptⅡ逆转录酶对这些转录本逆转录,得到的cDNA做为PCR的模板。GeneRacer™寡聚RNA序列做为GeneRacer™ 5’引物结合位点,这样,只有具有全长5’末端的cDNA才会被扩增。使用GeneRacer™步骤及高保真度Platinum® Taq DNA聚合酶,就可以确保得到最高效的实验结果。敏感
有SMART cDNA 合成和文库构建到? TriplEx2 或者Creator 供体载体 pDNR-LIB所需的试剂。因为该试剂盒是特别针对文库构建来设计的,所以它与Clontech™ PCR-Select™cDNA 差减杂交试剂盒不能配合使用。 SMART PCR cDNA Synthesis Kit 可以用来与Clontech™ PCR-Select™ cDNA 差减技术一起使用。总RNA 不能直接用来做差减实验,但可以通过SMART PCR cDNA Synthesis Kit 来扩增出
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