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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量现货
- 英文名:
Hifair® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR
- 保质期:
有效期1年
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
10 T(11142ES10)/100 T(11142ES60)
| 规格: | 10 T(11142ES10) | 产品价格: | ¥355.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100 T(11142ES60) | 产品价格: | ¥1455.0 |
产品描述
Hifair® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR是Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)的升级版,可在同一管中进行逆转录和基因组去除两个反应,操作简便,可有效降低复杂加样过程造成的样品污染和RNA降解的风险。本产品中5×Hifair® One Step RT SuperMix中含逆转录反应所需的全部试剂(Hifair® V Reverse Transcriptase, RNase Inhibitor, Oligo(dT)18 Primer, Random Primer, dNTPs, Buffer),反应时只需加入gDNA Remover Mix、模板RNA和水即可高效地合成第一链cDNA,同时去除基因组DNA污染。另外,本产品提供了5×Hifair® One Step No-RT Control SuperMix,用于配置无逆转录酶的对照,判断qPCR模板是否来自cDNA。
本产品中的Hifair® V Reverse Transcriptase可耐受高达60°C的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,非常适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。逆转录产物兼容探针法与染料法qPCR,探针法与染料法qPCR Mix分别推荐翌圣Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (Cat#11211)和Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix (Cat#11184),进行高性能基因表达分析。

产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 产品规格 | |
| 11142ES10 (10 T) | 11142ES60 (100 T) | ||
| 11142-A | 5×Hifair® One Step RT SuperMix | 40 μL | 400 μL |
| 11142-B | gDNA Remover Mix | 10 μL | 100 μL |
| 11142-C | 5×Hifair® One Step No-RT Control SuperMix | 20 μL | 40 μL |
| 11142-D | RNase free H2O | 1 mL | 2×1 mL |
产品应用
后续适用于qPCR实验。
运输和保存方法
冰袋运输。-20°C保存,有效期12个月。
注意事项
1)所有操作均应在冰上进行,且操作过程应避免RNase污染。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3)本产品仅作科研用途!
第一链cDNA合成操作步骤
1. 反应体系配置:在冰上融化11142-A/B/C组分,将试剂各组分充分震荡混匀,并在RNase-free离心管中配置如下体系:
| 组分 | 使用量 |
| RNase-free H2O | To 20 μL |
| 5×Hifair® One Step RT SuperMix | 4 μL |
| gDNA Remover Mix | 1 μL |
| Total RNA | 10 ng-1μg |
No-RT Control反应(可选)
5×Hifair® One Step No-RT Control SuperMix,用于配置无逆转录酶的对照,判断qPCR模板是否来自cDNA。
| 组分 | 使用量 |
| RNase-free H2O | To 20 μL |
| 5×Hifair® One Step No-RT Control SuperMix | 4 μL |
| gDNA Remover Mix | 1 μL |
| Total RNA | 10 ng-1μg |
2. 轻轻混匀,按照如下程序进行逆转录
| 温度 | 时间 |
| 30°C | 5 min |
| 55°C | 15 min |
| 85°C | 5 min |
【注】:1. 逆转录温度:推荐使用55°C。对于高GC含量模板或者复杂模板,可将逆转录温度提高到60°C。
- 逆转录产物可立即用于后续qPCR反应,也可-20°C短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80°C保存,避免反复冻融。
HB221019
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文献和实验[1] Ji C, Li J, Jiang C, et al. Zinc and nitrogen synergistic act on root-to-shoot translocation and preferential distribution in rice. J Adv Res. 2021;35:187-198. Published 2021 Apr 20. doi:10.1016/j.jare.2021.04.005(IF:10.479)
大家一臂之力,里面包含单独成管的 Oligo (dT)20VN 及 Random hexamers,可以根据模板类型和后续实验需求灵活选择或按比例混和;还有 HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)(R323),包含逆转录反应所需的所有组分,当然 Random primers 和 Oligo (dT)20VN 的混合引物也直接在这管 SuperMix 中,只需加入模板 RNA,20 min 内即可完成逆转录反应,极为方便! 第三个选择就是基因
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