- ¥3980
- QIAGEN
- 73404
- 德国
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
5
- 英文名：
RNeasy Plus Universal Tissue Mini Kit
- 保质期：
18个月
- 供应商：
新疆宝信源柏生物技术有限公司
- 保存条件：
RT
- 规格：
50次
从各种类型组织中纯化总RNA，配有gDNA Eliminator柱
- 适用于所有组织溶液类型
- 整合RNeasy和QIAzol技术，节省时间
- 不使用酶，快速去除基因组DNA
- RNA纯度高，适用于下游应用
RNeasy Plus Universal Kits可快速、方便的纯化RNA，同时有效地去除基因组DNA。优化的实验方案可从各种组织类型，包括难裂解组织中纯化高品质RNA。该试剂盒含有QIAzol Lysis Reagent和RNeasy离心柱，前者用于裂解脂肪组织和其他组织类型，后者用于纯化高品质RNA。该试剂盒有两种规格：RNeasy Plus Universal Mini Kit可从至多50 mg组织中纯化RNA，RNeasy Plus Universal Midi Kit可从至多250 mg组织中纯化RNA。RNeasy Plus Universal Mini Kit可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化进行纯化。
高效去除基因组DNA。
使用RNeasy Plus Universal Mini Kit从图示量的RNAlater稳定的大鼠肾脏中分离RNA，或者使用Supplier AII的沉淀试剂进行沉淀。使用QuantiFast Probe RT-PCR Kit和Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪对RNA洗脱液进行real-time RT-PCR分析，包括或不包括逆转录步骤。
高品质RNA。
使用RNeasy Plus Universal Mini Kit，从加入或者不加入gDNA Eliminator Solution的大鼠组织中纯化RNA。[A] 使用从25 mg冷冻的肝脏组织中分离的RNA进行real-time RT-PCR分析。所有样本的CT值相当。如果未使用gDNA Eliminator Solution，则在–RT对照中可检测到DNA污染，而使用gDNA Eliminator Solution分离的样本中则几乎无DNA污染。[B] 从25 mg稳定的心脏组织中纯化RNA。使用QIAxcel系统获取的数据证明，无论是否使用gDNA Eliminator Solution分离RNA，RNA均具有极佳的完整性。
RNeasy Plus Universal Mini和Midi实验流程。
性能
RNeasy Plus Universal操作流程可从各种类型的组织中得到高的RNA，重复性好，包括脂肪组织和不易裂解的组织（见表）。不同物种和不同发育阶段的组织的纯化产量不同，尤其是脂肪组织。
| 大鼠/小鼠组织(10 mg) | 总RNA产量 (µg) |
|---|---|
| 脂肪组织 | 0.5–2.5 |
| 脑 | 5–20 |
| 心脏 | 5–25 |
| 肠 | 10–60 |
| 肾 | 5–40 |
| 肝 | 15–80 |
| 肺 | 5–15 |
| 肌肉 | 5–35 |
| 皮肤 | 2–5 |
| 脾 | 15–100 |
使用real-time RT-PCR和QIAxcel体系分析纯化得到的RNA，表明这些RNA具有较好的完整性。gDNA Eliminator Solution和RNeasy技术可高效去除大部分基因组DNA污染，无需进行DNase处理。
原理
RNeasy Plus Universal操作流程可从各种类型组织中纯化RNA，包括脂肪或不易裂解的组织。RNeasy Plus Universal Kits整合了苯酚/胍裂解技术和硅胶膜总RNA纯化技术。试剂盒中包含的QIAzol Lysis Reagent是一种由苯酚和硫氢酸胍组成的单相溶液，专为方便的裂解各种组织设计，并能抑制RNases的活性。高效的裂解以及通过有机抽提去除污染物，使RNeasy离心柱可用于处理更大量的组织。gDNA Eliminator溶液能有效去除基因组DNA污染，非常有助于DNA分离到中间相。
操作流程
RNeasy Plus Universal操作流程易于进行，与苯酚/氯仿处理后回收相比，此方法更快、更有效，能得到更高纯度和产量的RNA。RNeasy Plus Universal Mini Kit可从50 mg组织中纯化RNA；RNeasy Plus Universal Midi Kit可从250 mg组织中纯化RNA。
可使用TissueRuptor、TissueLyser LT或TissueLyser II在QIAzol Lysis Reagent中进行样本匀质化。加入gDNA Eliminator Solution和氯仿后，匀浆离心分为水相和有机相。收集含有RNA的上层水相，加入乙醇，使用RNeasy离心柱纯化RNA。总RNA结合到离心柱膜上，苯酚和其他污染物被高效洗去。获得的高品质RNA可用RNase-free水洗脱下来。
该实验方案适用于富集mRNA，不包括大部分小于200nt的RNAs（如rRNAs和tRNAs）。RNeasy Plus Universal操作流程稍作修改后可从培养细胞中纯化包含miRNA等小RNAs的总RNA。
应用
RNeasy Plus Universal Kits纯化得到的RNA非常适用于对少量DNA敏感的下游应用，如定量real-time RT-PCR。纯化得到的RNA还可以用于其他应用。
| 特点 | 参数 |
| Applications | PCR, real-time PCR, microarray |
| Elution volume | Mini: 30µl; Midi:150µl |
| For automated processing | Mini format can be automated on the QIAcube |
| Format | Mini and Midi Format |
| Integrated removal of genomic DNA | Yes |
| Main sample type | Tissue samples including difficult-to-lyse and demanding tissues |
| Processing | Manual (centrifugation), automated (QIAcube) |
| Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | RNA |
| Sample amount | Mini: 5-50 mg; Midi: 50-250 mg |
| Technology | QIAzol/Spin column technology |
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文献和实验【共享】经验:The RNeasy Mini Kit from Qiagen
The RNeasy Mini Kit from Qiagen is designed for RNA extraction, although the basic format is similar to other Qiagen products designed to purify nucleic acids: ion exchange columns specifically bind RNA which is purified by wash steps
Isolation of Total RNA from Animal Cells use RNeasy Mini Kit
.) to 70 µl Buffer RDD. Mix gently. 8. Add the DNase I incubation mix (80 µl) directly onto the RNeasy membrane, 20–30°C for 15 min. 9. Run 700µl RW1 through the mini column, 15 seconds at 12,000 rpm. 10.
are used in the procedure. With the AllPrep DNA/RNA Micro Kit and AllPrep DNA/RNA Mini Kit, spin columns are used in the procedure. B AllPrep 96 DNA plate (left) and RNeasy 96 plate (right). By allowing the analysis of DNA and RNA
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