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无锡莱弗思生物实验器材有限公司
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文献和实验实验大纲 骨髓间充质干细胞是多能干细胞。因此,作为再生医学的细胞来源,它是活性研究和临床应用的目标。当骨髓液或骨髓细胞接种在培养皿上时,间充质干细胞会作为粘附细胞增殖。因此,间充质干细胞可以从漂浮的血细胞中分离出来。在此,我们报告了使用 Evident Prov CM20 培养监测系统对间充质干细胞原代培养的远程监测结果。 试验程序 使用补充了 10% 胎牛血清(FBS)和 1% 青霉素链霉素的 Iscove 改良 Dulbecco 培养基(IMDM),将市售人骨髓细胞以 950,000
培养细胞。 19、干细胞在更换外泌体专用间充质干细胞培养基的过程中,遇到干细胞生长缓慢,甚至死亡的现象,该如何处理? 答:干细胞在更换培养基的过程中,对于培养环境比较敏感,尤其是从高营养环境(血清/HPL添加培养基)更换到低营养环境(化学成分确定培养基)的过程中会遇到干细胞生长缓慢,甚至死亡的现象,这些都是更换培养体系过程中经常遇到的问题。 解决方案 1:提高更换培养基时干细胞的融合度。细胞融合度从说明书中 20% 提高到50%-60% 时,然后更换外泌体专用间充质干细胞培养基,然后在细胞融合度 70%-80
。 4、培养细胞时,如何去除血清来源的外泌体? 多数情况下,细胞在体外培养时需要血清,而血清中一般都含有外泌体,为避免血清对细胞外泌体的污染,可采用以下两种方法: 将细胞培养用的血清通过 1×105g 超速离心 >10 h 以去除血清外泌体; 选择无血清完全替代培养基进行细胞培养。 5、无外泌体血清(或者外泌体专用培养基)在什么时候使用? 使用无外泌体血清培养基:细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后,细胞汇合度在60% - 70% 时,移去原有含血清的培养基,换成新鲜的无外泌体血清培养基,继续
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