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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
333
- 英文名:
ARE Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
60μl
特别提示:包括ARE凝胶迁移突变探针(1.75μM)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:ARE凝胶迁移突变探针(1.75μM)
英文名称:ARE Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
产品货号:YT206
产品规格:60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的ARE consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-ARE的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。
EMSA突变探针-ARE的序列如下:
5"-ACT GAG GGT GAC TCA ATA AAA TC-3"
3"-TGA CTC CCA CTG AGT TAT TTT AG-5"
EMSA突变探针-ARE中ARE的公认的位点发生了突变,从而使相应的转录因子无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和ARE的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和相应转录因子的结合的条带不会被抑制。参考下图。
一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1. 阴性对照反应(标记探针);
2. 常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3. 探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4. 突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5. Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
我公司销售的ARE凝胶迁移突变探针(1.75μM)北京供应商,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验高福院士团队 Lancet 发文:北京 COVID-19 病例分析表明,疫情爆发期间未出现新变种
.2.1) 和 22B/Omicron (BF.7 和 BA.5.2) 在 2022 年期间主导了北京的流行感染。但 2022 年 11 月中旬之后,22B 在北京成为绝对主导流行毒株。 图片来源:Lancet 自 2022 年 11 月 14 日起,北京市新增确诊病例大幅增加,共检测确诊病例 413 例,其中本地病例 350 例,境外输入病例 63 例。在这些本地病例中,BF.7 占 265 株 (75.71%),成为 11 月 14 日以后的优势菌株,BA.5.2(16.29%)和 BA
(1)什么是凝胶迁移或电泳迁移率实验?凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA复合物或RNA复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链
实验时间 | 还在为凝胶迁移实验(EMSA)发愁?老司机为你指路
实验步骤01 探针的标记如下设置探针标记的反应体系:体系为 10 微升待标记探针 (1.75 pmol / 微升) :2 微升。T4 Polynucleotide Kinase Buffer (10×) :1 微升。Nuclease-Free Water :5 微升。[γ-32P] ATP(3 000 Ci/mmol at 10 mCi/ml) :1 微升。T4 Polynucleotide Kinase (5-10 u / 微升) :1 微升。依次加入各种试剂,加入同位素后混匀,再加入 T
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