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室温运输和保存即可
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有效期5年
- 英文名:
Agarose
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大量
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
100g(10208ES60)/500g(10208ES76)
| 规格: | 100g(10208ES60) | 产品价格: | ¥158.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 500g(10208ES76) | 产品价格: | ¥758.0 |
琼脂糖(Agarose)是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体,提取自琼脂或者含琼脂的海藻,结构上是一种线性聚合物,由β-D-吡喃半乳糖(1-4)连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂,常用于通过凝胶电泳或者印迹法(如Northern或Southern)来进行日常核酸分析,也适用于蛋白应用,如辐射状免疫扩散(RID)实验。
琼脂糖的基本参数,包括:
1)硫酸盐含量(sulfate content)——纯度指标,因为硫酸根是存在琼脂糖内的主要离子基团;
2)凝胶强度(gel strength)——施加于凝胶使之断裂的外力;
3)胶凝点(Gel point)——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中,琼脂糖溶液具有滞后性,因此,胶凝点不等同于胶熔点;
4)电渗(EEO)——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移,但是解离的阳离子就会朝负极迁移,从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动,则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。
- 高性价比
- 稳定性好
室温干燥保存,有效期5年。
Q:为什么跑出的条带弥散?
A:可能凝胶时间过短,胶不均匀。1%的琼脂糖最少凝胶时间为 30min。Q2:高分辨琼脂糖能够分开多大的条带?
A:高分辨率琼脂糖和 3:1 琼脂糖的分辨率均为 2%左右(即片段 30bp 的话,则能分开 30*0.02;100bp 片段则 100*0.02。)
Q:低熔点琼脂可以用来做脉冲场凝胶电泳吗?
A:不可以,脉冲场凝胶电泳要求是电渗要很低,强度要很高。
Q:低熔点琼脂糖是不是无菌无核酸酶的?其他类型的琼脂糖呢?
A:无菌无核酸酶,低熔点琼脂糖常用来做细胞空斑实验,细胞培养可放心使用。其他类型的琼脂糖也是无菌的,无核酸酶的。
Q:琼脂糖会比较软,这个是什么原因?
A:软硬和凝胶强度有关,琼脂糖都是琼脂提取物,强度高低都是会有一定差异的,不可能每一批都相同。琼脂糖的强度指标是大于等于 1200,只要在这个范围以上就是合格的。
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文献和实验[1] Wang M, Zhang S, Zheng G, et al. Gain-of-Function Mutation of Card14 Leads to Spontaneous Psoriasis-like Skin Inflammation through Enhanced Keratinocyte Response to IL-17A. Immunity. 2018;49(1):66-79.e5. doi:10.1016/j.immuni.2018.05.012(IF:19.734)
[2] Zhang Y, Ding H, Wang X, et al. MK2 promotes Tfcp2l1 degradation via β-TrCP ubiquitin ligase to regulate mouse embryonic stem cell self-renewal. Cell Rep. 2021;37(5):109949. doi:10.1016/j.celrep.2021.109949(IF:9.423)
[3] Zhu Z, Zhang L, Sheng R, Chen J. Microfluidic-Based Cationic Cholesterol Lipid siRNA Delivery Nanosystem: Highly Efficient In Vitro Gene Silencing and the Intracellular Behavior. Int J Mol Sci. 2022;23(7):3999. Published 2022 Apr 3. doi:10.3390/ijms23073999(IF:5.924)
[4] Zhao C, Yang D, Ye Y, et al. Inhibition of Pim-2 kinase by LT-171-861 promotes DNA damage and exhibits enhanced lethal effects with PARP inhibitor in multiple myeloma. Biochem Pharmacol. 2021;190:114648. doi:10.1016/j.bcp.2021.114648(IF:5.858)
[5] Yu J, Yang W, Xing S, et al. Blended gold/MnO2@BSA nanoparticles for fluorometric and magnetic resonance determination of ascorbic acid. Mikrochim Acta. 2019;186(2):89. Published 2019 Jan 10. doi:10.1007/s00604-018-3205-8(IF:5.479)
把琼脂糖,即几乎不含硫酸根的主要成分为多糖的琼脂,溶于热水,冷却制成的凝胶。制成的小颗粒用于凝胶过滤。适于用 sephadex不能分级分离的大分子的凝胶过滤,若使用 5%以下浓度的凝胶,也能够分级分离细胞颗粒、病毒等。利用其吸附性小的特点,有时用它代替琼脂、以作为免疫电泳或凝胶内沉降反应的支持物。
的影响,所以回收率并非是一成不变的。所以Qiagen以严谨的态度提供多种条件下的详细介绍:使用QIAquick回收之前和回收之后再混合的DNA 片段 (大小已指出) 。对所有尺寸的片段均获得了接近80%的回收率。A 1-5 : 回收之前; P : 回收之后再混合。样品使用 1.5% 琼脂糖凝胶分析(TAE buffer)。B 1-3: 回收之前; P : 回收之后混合。样品于 3.5% 高分辨琼脂糖凝胶上分析( TAE buffer)。M : pTZ-HinfI marker。记得《分子克隆II
1. 用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净,放在制胶平板上,封闭模具边缘,架好梳子; 2. 根据欲分离 DNA 片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶:准确称量琼脂糖干粉,加入到配胶用的三角烧瓶内,定量加入电泳缓冲液(一般20~30 ml) ; 3. 放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻,加入一滴荧光染料,轻轻旋转以充分 混匀凝胶溶液,倒入电泳槽中,待其凝固; 4. 室温下 30~ 45 分钟后凝胶完全凝结, 小心拔出梳子, 将凝胶安放在电泳内槽; 5. 向电泳槽中倒入电泳











