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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
364
- 英文名:
ARE Probe For EMSA(1.75μM)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
60μl
特别提示:包括ARE凝胶迁移探针(1.75μM)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:ARE凝胶迁移探针(1.75μM)
英文名称:ARE Probe For EMSA(1.75μM)
产品货号:YT203
产品规格:60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的ARE consensus oligonucleotide。这个双链寡核苷酸含有公认的ARE位点,可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的探针可以进行约30个同位素标记探针的反应,每次标记的探针可以测定约100个样品;或约可以进行20个生物素标记探针反应。如果作为未标记的探针用于同位素标记探针的冷竞争(cold competition),可以进行30-60个冷竞争反应。
ARE consensus oligo的序列如下:
5"-ACT GAG GGT GAC TCA GCA AAA TC-3"
3"-TGA CTC CCA CTG AGT CGT TTT AG-5"
ARE即Antioxidant Response Element(抗氧化响应元件),该顺式作用元件含有AP1结合位点,可以和AP1结合,但Nrf2是其更专一性结合的转录因子。例如NQO1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase)和HO-1(Heme Oxygenase-1)都受Nrf2通过ARE元件进行转录调控。
本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记,也可以用于生物素标记。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
我公司销售的ARE凝胶迁移探针(1.75μM)优惠促销,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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实验原理 带有地高辛标记的dUTP(图1)通过缺口翻译、随机翻译或PCR等反应而使探针核酸片段带有地高辛,进一步可与带有AP、CSP等各种抗地高辛抗体复合物发生免疫反应,使探针上带有AP等分钟,进一步能催化化学或发光反应。图2为各种DIG标记探针及检测类型汇总;图3为DIG标记探针的方法;图5为标记探针应用;图4为DIG标记探针的检测方法。 图1 图2 图3 图4 图5 实验步骤
Probe PCR/RT-PCR也是一个基于探针的定量PCR通用试剂盒。酶自然也是选择严格的Hotstart酶,试剂盒同时提供荧光内参、dNTP和优化缓冲液,价格要30元/次反应(50ul,如果你把反应体积减少到25ul,就可以将成本再减半),如果你是生物通新闻栏目的幸运读者能拿到最近生物通送出的优惠券,那几乎可以又便宜一半。如果你要做Multiplex多重PCR,或者同管内检测目的基因和管家基因,那么你还是不要再幻想自己配试剂了,QuantiTect Multiplex PCR应该是更好
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