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近岸蛋白
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12次/24次
| 规格: | 12次 | 产品价格: | 询价 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 24次 | 产品价格: | 询价 |
- Cleavage Under Target & Tagmentation (CUT&Tag®)是一种新兴的DNA-蛋白质互作研究方法。CUT&Tag® 以融合了protein A/G 的Tn5 转座酶为核心,融合蛋白通过protein A/G 与抗体结合,使得Tn5 被栓系在靶位点周围,从而在目的位点附近进行酶切反应,并同时引入二代测序所必需的接头序列,产物DNA 经过后续提取与PCR 扩增后,得到直接用于测序的文库。CUT&Tag®与传统的ChIP-Seq 技术相比较,实验不需要超声打断,也不需要传统的连接法添加测序接头,操作简单、周期短、信噪比高、重复性好、细胞用量少,为极低起始细胞量和单细胞测序研究提供了可能性。
- 自 2019 年 CUT&Tag 技术诞生以来,经过大量的实践,发现该技术在组蛋白修饰及部分转录因子与 DNA 互作研究中可以获得高信噪比的结果,但是针对一些与 DNA 结合力较弱或者结合具有高度动态性的 DNA 结合蛋白,较难得到理想的实验结果。针对此问题,近岸蛋白开发了可对细胞进行高浓度甲醛交联的CUT&Tag实验流程。为转录因子 -DNA 互作研究提供一种新的思路,这种需要甲醛交联的CUT&Tag实验被称为fcCUT&Tag(formaldehyde crosslinking CUT&Tag)。
- NovoNGS® CUT&Tag® 4.0 High-Sensitivity Kit (for Illumina)试剂盒包含常规非交联细胞CUT&Tag及甲醛交联细胞fcCUT&Tag实验中所需的各种缓冲液、ConA磁珠、DNA纯化磁珠、引物等全套建库试剂,可以用于组蛋白修饰和转录因子的染色质结合状态研究。与传统的CUT&Tag试剂盒相比,该试剂盒既可以对自然状态的细胞进行蛋白质-DNA互作研究,也可以对高浓度甲醛交联的细胞进行蛋白质-DNA互作研究,一盒两用。
- 试剂盒包含CUT&Tag® 实验中孵育抗体、转座体、构建文库的相关试剂,可以用于组蛋白修饰和转录因子的染色质结合状态研究。本试剂盒包含高活性的ChiTag® pAG-Tn5, 相较于最初版本的pA-Tn5 转座酶,pAG结构域对兔、鼠等多种来源抗体具有广谱的强亲和性,在实验抗体的选择上具有更大的空间。
- 针对CUT&Tag®打断产物DNA 提取过程中小片段丢失的问题,本试剂盒提供优化的Tagment DNA Extract Beads, 相较于常规的片段分选磁珠可以完整的回收CUT&Tag® 产物中的小片段DNA, 大大简化了酚氯仿-乙醇沉淀法的繁琐操作。此外,本试剂盒还提供了阳性抗体H3K4me3(兔抗)以及相应的二抗(羊抗兔IgG) ,用于阳性对照实验(仅B 包装提供阳性抗体)。
DNA-Target Protein-Antibody-ChiTag®结合示意图
CUT&Tag 4.0 实验流程简图
结果表明:近岸蛋白CUT&Tag试剂盒能够兼容不同细胞量的CUT&Tag实验,且下机数据重复性好,信噪比高。
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