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389
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
特别提示:包括2×Taq Plus PCR MasterMix在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:2×Taq Plus PCR MasterMix
产品规格:1ml×5
本制品是将PCR反应所需的Taq Plus DNA 聚合酶、dNTP混合物、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。2×Taq Plus PCR MasterMix专为DNA大片段PCR扩增反应优化,扩增长度增加,保真度 好,扩增速度快,反应效率高,适合于扩增1–20kb长度的片段。使用时,只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,大大 地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。使用本制品扩增得 到的PCR产物具有3′端"A"突出,因此可直接克隆于T-vector中。
2×Taq Plus PCR MasterMix提供普通型/快速上样型两种形式供您选择。经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。
产品特点:
更高效:以 DNA为模板,扩增长度可达20kb。
更灵敏:比Taq酶扩增灵敏度更高(图例一)。
稳定:反复冻融几十次,4℃放置30天,室温放置一周后, 扩增性能不受影响。
快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
便利:10μl, 25μl 或50μl体系全部适用。PCR反应后可直接电 泳(含染料形式)。
产品用途:
1、可替代大部分2×Taq PCR MasterMix的用途;
2、需高灵敏度的PCR扩增;
3、大片段PCR扩增反应 (可达30kb)。
应用实例:
图例一) 50μl扩增体系中,分别以100ng~0.1ng小鼠基因组DNA为模板,可很好地扩增出1.1kb DNA片段(IL-1b 基因)。
泳道M:DNA 2000 Ladder 泳道1:100ng;泳道2:10ng; 泳道3:1ng;泳道4:0.1ng;
常用反应体系(50μl):
| 组分 | 体积 |
| 2×PCR MasterMix* | 25μl |
| 上游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
| 下游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
| 模板 | 1-50ng(质粒) |
| 10ng-1μg(基因组) | |
| ddH2O | 至50μl |
| *Mg2+终浓度为2mM | |
常用PCR循环:
| 当扩增片段<3K: | |
| 94℃ | 1分钟30秒 |
| 30次循环 | 94℃,20秒 57℃,20秒 72℃,根据产物长度调整,60秒/kb |
| 72℃ | 5分钟 |
| 4℃ | 保温 |
| 当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp): | |
| 94℃ | 20秒 |
| 30次循环 | 94℃,5秒 68℃,根据产物长度调整,60秒/kb |
| 72℃ | 5分钟 |
| 4℃ | 保温 |
PCR MasterMix选购指南:
| 编号 | 产品名称 | 特点 |
| 适用于菌落鉴定、菌液鉴定及常规PCR鉴定实验的Mix系列 | ||
| JN0030 | 2×Taq PCR MasterMix | 高性价比PCR Mix,使用简便,扩增灵敏度高 |
| JN0034 | 2×Complex Taq PCR MasterMix | JN0030改进版,性能更均衡,适用面更广 |
| JN0040 | 2×Fast Taq PCR MasterMix | 最快速的PCR试剂,常规PCR鉴定45分钟内知道结果 |
| JN0035 | 2×RoomTop Taq PCR MasterMix | 可放在手边的PCR试剂,室温稳定存放60天 |
| JN0036 | 2×RoomTop Fast Taq PCR MasterMix | 室温稳定存放60天,高速PCR试剂,常规PCR鉴定45分钟内知道结果 |
| 适用于一些较难扩增的PCR条带的鉴定及短片段克隆 | ||
| JN0032 | 2×Taq Plus PCR MasterMix | 扩增效率更高及较好的保真度 |
| JN0038 | 2×Hot Start Taq PCR MasterMix | 采用热启动Taq,可获得很好的特异性 |
| JN0041 | 2×Ultra Taq PCR MasterMix | 高速扩增酶,优化配方,解决PCR扩增难题的,灵敏度高 |
| 高保真酶试剂,适用于长片段基因克隆 | ||
| JN0031 | 2×Pfu PCR MasterMix | 采用高保真酶,适用于基因克隆 |
| JN0043 | 2×Fast Pfu PCR MasterMix | 采用改良型高保真酶,更好的扩增效果,4倍扩增速度;扩增迅速 |
| 防止PCR产物二次污染、极高检测灵敏度的PCR试剂 | ||
| JN0047 | 2×PCR MasterMix(防污染) | 采用dUTP/UDG酶系统,从根本上杜绝PCR产物二次污染 |
| JN0033 | 2×Genotyping PCR Kit(nomal) | 极高检测灵敏度,可达到普通PCR试剂102至104倍扩增灵敏度 |
PCR MasterMix性能对比表:
| 名称 | 编号 | 扩增时间 | 扩增长度 | 是否有3"-A | 基因组扩增 |
| 2×Taq PCR MasterMix | JN0030 | 1min/kb | ≤8kb | √ | + |
| 2×RoomTop Taq PCR MasterMix | JN0035 | 1min/kb | ≤8kb | √ | ++ |
| 2×Complex Taq PCR MasterMix | JN0034 | 1min/kb | ≤8kb | √ | + |
| 2×Fast Taq PCR MasterMix | JN0040 | 15s/kb | ≤8kb | √ | + |
| 2×RoomTop Fast Taq PCR MasterMix | JN0036 | 15s/kb | ≤8kb | √ | ++ |
| 2×Ultra Taq PCR MasterMix | JN0041 | 15s/kb | ≤8kb | √ | +++ |
| 2×Taq Plus PCR MasterMix | JN0032 | 1min/kb | ≤20kb | √ | ++++ |
| 2×Ultra Taq Plus PCR MasterMix | JN0042 | 15s/kb | ≤30kb | √ | ++++ |
| 2×Hot Start Taq PCR MasterMix | JN0038 | 1min/kb | ≤8kb | √ | ++++ |
| 2×Hot Start Taq Plus PCR MasterMix | JN0039 | 1min/kb | ≤20kb | √ | ++++ |
| 2×Pfu PCR MasterMix | JN0031 | 1min/kb | ≤6kb | × | + |
| 2×Fast Pfu PCR MasterMix | JN0043 | 30min/kb | ≤12kb | × | + |
| 2×SYBR Green Realtime PCR MasterMix | JN0049 | 1min/kb | ≤8kb | √ | ++ |
| 2×Genotyping PCR Kit(Normal) | JN0033 | 1min/kb | ≤8kb | √ | +++++ |
| 2×Genotyping PCR Kit(Fast) | JN0044 | 15s/kb | ≤8kb | √ | +++++ |
| 2×PCR MasterMix(防污染) | JN0047 | 1min/kb | ≤8kb | √ | + |
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文献和实验bp 片段,以 pBS 菌液为模板扩增 1500 bp 片段。 模板:菌液 OD600=0.8 时 2 μL /50 μL PCR 扩增程序:同上 a 扩增程序同。 结果:Bioteke 2×power Taq PCR MasterMix 试剂对于质粒或菌液均可高效率的扩增。取扩增产物 10 μL 用 1% 琼脂糖凝胶电泳进行分析可见明亮条带。 二、genomic DNA扩增 1.大肠杆菌DNA扩增 模板:大肠杆菌DNA 50 ng/50 μL PCR扩增程序: 循环数 Step 温度
for both DNA sample and reaction mixture preparation, is strongly recommended.The reagents for PCR should be prepared separately and used solely for this purpose. Autoclaving of all solutions, except dNTPs, primers and Taq DNA Polymerase is recommended
Cloning of Taq polymerase-amplified PCR products
" vector) Taq polymerase has a nontemplate-dependent terminal transferase activity that adds a single deoxyadenosine (A) to the 3´ ends of PCR products. The linearized vector supplied in this kit has single, overhanging 3´ deoxythymidine (T) residues
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