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- 库存:
264
- 英文名:
Fast&HiFi Long DNA PCR MasterMix
- 保质期:
2年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1ml|5ml
特别提示:包括长片段DNA快速高保真PCR MasterMix(含红色示踪染料)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:长片段DNA快速高保真PCR MasterMix(含红色示踪染料)
英文名称:Fast&HiFi Long DNA PCR MasterMix
产品货号:ALH610
产品规格:1ml|5ml
本产品包含高速高保真长片段DNA聚合酶、dNTPs和优化的反应缓冲液,浓度为2×。使用时只需加入模板、引物,并补足水至Mix终浓度为1×即可。所含DNA聚合酶为多种采用较先进基因工程改造而来的超保真酶添加延伸因子混合而成,极大的提高了扩增长度、扩增速度、保真性和产量。本品是长片段超保真快速扩增的shǒu选产品。本制品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。
产品特点:
1. 扩增速度快:延伸速度可以达到3~4kb/min,是pfu的6~8倍。
2. 扩增产量高:一般PCR产物量比传统pfu产量高50%-100%。
3. 优异保真性:保真度是taq的54倍以上。一般随机挑一个菌测序便是正确无突变落。
4. 扩增长度长:以复杂基因组DNA为模板适合扩增不超过10kb左右的产物,以简单基因组、质粒和噬菌体DNA为模板适合扩增不超过15kb左右的产物。
注意事项
1. 本系统扩增速度快,质粒和简单基因组等简单模板可以采用10~15秒/kb,复杂模板如人类基因组可以采用20~25秒/kb。
2. 如果电泳发现主带上下拖尾模糊现象,或者泳道出现从上样孔拖下来的涂抹带现象,一般提示延伸时间过长,梯度缩短延伸时间(建议10~15秒/kb为梯度减少延伸时间)直到获得满意结果。
3. 对于GC含量很高的模板,预变性和变性温度可以提高到98℃。本聚合酶耐热性强,98℃对本聚合酶的活性无改变。
4. 如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时,可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%~8%,按照1%梯度增加摸索最佳浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1~1.7 M。并采用降落PCR(Touchdown PCR)。
储存条件:-20℃,有效期2年。
本制品别名:2×PCR MasterMix|长片段PCR MasterMix|高保真PCR MasterMix
我公司销售的长片段DNA快速高保真PCR MasterMix(含红色示踪染料),长片段PCR MasterMix,高保真PCR MasterMix,2×PCR MasterMix质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验的PCRMIX,是目前最“傻瓜”的 PCR 反应体系之一,不论是质粒、菌液、CDNA、基因组 DNA、或者是直接裂解的粗提物,GC 含量高达 75% 的模板,都能轻松扩增,不需要费力的“摸条件”! 本产品包含酶、dNTP、特殊稳定剂和优化的反应缓冲液,浓度为 2x。DNA 扩增时,只需加入模板,引物和水,使 MasterMix 溶液的浓度为 1× 即可进行反应。具有快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。进行 PCR 扩增可以减少操作时间,避免因多步操作带来的污染,特别适宜高通量筛选基因的扩增
转基因生物的等位基因分型。(A)可用针对目标区域的特异性PCR引物来检测基因位点是野生型序列(深灰色)还是转基因序列(黄色)。(B)如该凝胶照片所示,PCR 产物可用于确定基因型。在这些实验中,使用了野生型 (+/+)和转基因 (+/–和–/–) 小鼠的基因组 DNA。 但是如果为了检测特定核苷酸突变,则必须对扩增的序列进行进一步分析。例如, PCR 扩增子测序就是研究单核苷酸变异(SNVs)和单核苷酸多态性(SNP)的方法之一。强烈推荐使用高保真 DNA 聚合酶,以防止在 PCR 过程中引入多余
【分享】Taq DNA聚合酶、Pfu DNA聚合酶等酶的特点及应用
Platinum:热启动高保真耐热DNA聚合酶。如果对保真度要求很高,而用Pfu扩增有难度,可选用Taq Platinum,一般扩增长度可达4kb。 根据不同的实验目的选择最合适的酶, 克隆普通长度的目的DNA 片段:Taq、Taq Plus 保真度要求较高,片段比较短,如点突变、基因筛选等:Pfu、Taq Platinum 高保真长片段扩增,如构建基因图谱及分子遗传学研究等:Long Taq、Taq Plus 扩增基因组模板,需要降低背景:Hotstart Taq、Taq Platinum
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