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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
203
- 英文名:
Universal T vector colony PCR identification Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
80次|400次
特别提示:包括通用型T载体克隆菌落PCR检测试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:通用型T载体克隆菌落PCR检测试剂盒
英文名称:Universal T vector colony PCR identification Kit
产品货号:ALH351
产品规格:80次|400次
本试剂盒采用通用T载体引物研制的通用T载体菌落PCR鉴定试剂盒,只需购买一种试剂盒,便可用于市面上所有常见的T载体(包括pGEM,pUC,pBluescript系列) 连接阳性克隆的鉴定。此外,采用T3,T7或者SP6做引物的菌落PCR鉴定试剂盒引物距离插入位点的距离非常短,因此在鉴定100bp左右或者更小片段的插入时,阴性克隆的引物二聚体条带和阳性克隆扩增条带大小接近,无法区分。往往把引物二聚体的条带看成是阳性扩增条带,造成假阳性。反之,造成假阴性。本试剂盒通用T载体引物在未插入片段时的距离至少有150bp以上,加上插入片段的长度,可以清晰的区分是插入片段扩增出的条带还是引物二聚体扩增出的条带。避免假阳性或者假阴性,大大提高了准确性。本公司研发的一管便携式PCR MasterMix预混系统,无需您一一加入各种成分,直接加入需筛选单菌落,经过1小时左右的PCR反应和电泳检测即可得到重组菌落鉴定的结果。
试剂盒组份(400次):
2 × Taq PCR MasterMix——————5ml
Universal primer F————————250μl
Universal primer R————————250μl
ddH2O———————————————5ml
注意事项:
1. 重组菌落鉴定时,挑取单菌落前,应先做好标记,便于鉴定后使用。
2. 挑取菌落时,应选择单菌落,不要挑取太多菌体,以免影响PCR 结果。
3. 设定PCR 程序时,请根据插入片段大小决定延伸时间,如果插入片段大小为1 kb以下,延伸时间30-45 秒即可,如果片段更长,可按此比例增加延伸时间。
储存条件:-20℃。
本制品别名:T载体阳性克隆检测试剂盒
我公司销售的通用型T载体克隆菌落PCR检测试剂盒北京供应商,T载体阳性克隆检测试剂盒质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验法,在涂布有IPTG和X-Gal的筛选平板上,重组菌株为白色,未转入重组质粒的菌株为蓝色。 ◆ 可对小量提取的质粒DNA做限制性酶切,采用天为时代公司的质粒提取试剂盒,可快速提取多个样本,而且由于提取的质粒纯度高,不会有酶切切不开,影响实验的情况。 ◆ 也可直接用细菌菌落进行PCR反应,筛选存在目的片段的重组菌落。天为时代公司生产的一管便捷式PCR反应系统(MasterMix系列产品)特别适合这种方法。用灭菌的吸头挑取单个菌落到已加入MasterMix的PCR管中,加入特异引物,进行
原理将样品经增菌后划平板分离单菌落,挑取可疑菌落到胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉汤 (TPGY)培养基培养,对培养物用 DNA 提取试剂盒抽提 DNA,进行 PCR 扩增,用琼脂糖凝胶电泳检验 PCR 产物中是否含有肉毒杆菌的的特征条带,从而初步判断食品是否被肉毒杆菌污染。 二、仪器和试剂 紫外检测仪 NanoDrop1000 (Eppendorf),台式微量冷冻离心机 Microfuge 22R(Beckman Counter),凝胶成像分析系统 Gel DocTM XR (Bio
有很多单菌落,菌落PCR呈阳性,而酶切呈阴性(只要是K12株来源的大肠杆菌,或者是旁系,只要用但菌落做模板就能扩增出UNG酶基因,因此做本实验根本不需要购买基因组提取试剂盒) (2)表达载体经过SAP处理时,转化平板没有单菌落时。可以考虑购买的酶活性出问题。 得到的教训是在做表达载体构建时,做酶活性考核的对照实验是重要的。 5:表达与纯化(直接用taq酶的提取方案,只是所用操作要求低温,试剂需要冰上预冷) (1)取已鉴定的阳性克隆,转接20ml含卡那霉素的LB液体培养基,37℃培养,活化
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