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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
413
- 英文名:
LIC Cloning Kit for PCR
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货PCR专用LIC克隆套装哪里买,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:PCR专用LIC克隆套装
英文名:LIC Cloning Kit for PCR
品牌:百奥莱博
编号:BTN120402
产地:国产|进口
规格:1μg
本产品就是基于LIC原理开发的即用型载体。LIC就是不依赖于连接的克隆技术(Ligation-Independent Cloning),它是继限制性内切酶切/连接酶克隆方法后出现的第二代DNA克隆技术,它效率高,尤其适用于大规模分子克隆,其原理如下:

产品特点:
1. 操作简单,一管式一步反应,只需加入插入片段即可,客户不需要购买任何额外的酶。
2.时间短,整个过程只要15分钟。
3.高效,比常用的AT克隆效率更高,阳性率接近于100%。
4. 克隆方向和位置精准和可控,适合表达型克隆工作。
5. 便于自动化,适合高通量克隆。
6.适用于长片段克隆。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| LIC载体(50μg/μL) | 1μg |
| 溶液A | 10μl |
| 溶液B | 150μl |
| 阳性对照插入片段 | 8μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:-20℃运输及保存,有效期一年。
一. PCR引物设计,合成和PCR反应
1. 按常规方法设计PCR引物,只是必须在一条引物5´端再加上GGCGGCCGCGGTAC序列,在另一条引物5´端加上GGCGCCGGCGGTAC序列。此序列决定克隆的方向,如果不在乎方向,可以随机组合。
2. 所用引物最好为HPLC纯化获得。注意:如果购买本公司产品,免费合成LIC引物一对。
3. 按常规的方法进行PCR,最好使用高保真DNA聚合酶。
4. 按常规的胶回收的方法回收PCR片段。注意:必须去除残余的dNTP和PCR引物,否则会极大降低LIC效率。
5. 对PCR片段电泳定量,即电泳后通过肉眼比较PCR片段和DNA Marker的相对强度,通过DNA Marker条带的浓度(一般商品化的DNA Marker每条带的浓度都是已知的)推测出PCR片段的浓度。
二. PCR片段与载体退火
1.在纯化的2μL PCR产物中加入0.4μL溶液A、2μL载体(100ng)以及5μL溶液B,混合。
注意:PCR产物跟载体的摩尔数比例最好是1:1。
2.室温放置5分钟。注意:保温时间长短很关键,不要轻易延长或缩短。
3.在PCR仪器上按75℃ 10分钟,然后放冰上或-20℃待用。
三.转化
1. 按常规方法进行转化。
2. 按菌落PCR方法筛选,可选用我公司的菌落PCR试剂盒(BTN50901)。进行快速筛选,需要T7和SP6 RNA聚合酶启动子引物。
关键词:PCR专用LIC克隆套装,LIC Cloning Kit for PCR,BTN120402
关于北京现货PCR专用LIC克隆套装哪里买的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
| 编号 | 名称 |
| BTN120626 | UTP溶液(100mM) |
| BTN130564 | 大肠杆菌Tuner(DE)plysS感受态细胞 |
| BTN130976 | Oligo(dT)再生溶液 |
| BTN100878 | Western印迹膜封膜液(尼龙膜) |
| BTN60705 | 一管式植物DNA提取试剂盒 |
| BTN150801 | 大肠杆菌BL21 Star(DE3)化学感受态细胞 |
| BTN151203 | 生物素标记UTP溶液(Biotin-16-UTP ) |
| BTN130967 | 丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")干粉(19:1) |
| BTN120401 | 热启动Taq DNA聚合酶 |
| BTN130855 | T4 RNA连接酶2(双链RNA连接酶) |
| BTN130593 | HRP标记内参抗体(GAPDH) |
| BTN100839 | PCR级甲酰胺 |
| BTN90602J | DNA marker(λ-EcoT14 I) |
| BTN111116A | 一站式GST标记蛋白质微量纯化套装 |
| BTN120520 | 大肠杆菌OrigamiB(DE3)化学感受态细胞 |
| BTN130662 | Tth RecA蛋白 |
| BTN60804 | PCR抑制物清除剂 |
| BTN70705 | DNA洗脱液 |
| BTN131043 | CHAPS |
| BTN130848D | 即用型LB平板培养基(含Tet) |
| BTN90602H | DNA marker(φX174 DNA/HaeIII) |
| BTN60602 | 柱式植物DNA提取试剂盒 |
| BTN131247 | 4%多聚甲醛(RNA专用) |
| BTN110809 | 6mL亲和层析柱 |
| BTN101001 | Benzonase核酸酶 |
| BTN140645 | 大肠杆菌TB1感受态细胞 |
| BTN100841 | 电泳级β-巯基乙醇 |
| BTN130535 | APMSF溶液(10mg/mL) |
| BTN80904 | 柱式真菌RNA大量提取试剂盒 |
| BTN120504 | 柱式藻类RNA大量提取试剂盒 |
| BTN140378 | 大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞 |
| BTN131283 | 多聚甲醛-*氧化*固定液 |
| BTN130869 | 人超氧化物歧化酶 |
| BTN120699 | 多粘菌素B硫*(代"酸")盐 |
| BTN130630 | 糖原PAS染色液(真菌专用) |
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很多新手在问做原核表达需要考虑的载体和菌株的选择,现系统地解答一下,供新手借鉴。
的 pET 系统不断扩大,提供了用于表达的新技术和选择,目前共包括 36 种载体类型、 15 种不同宿主菌和设计用于有效检测和纯化目标蛋白的许多其它相关产品。 优点 · 是原核蛋白表达引用最多的系统 · 在任何大肠杆菌表达系统中,基础表达水平最低 · 真正的调节表达水平的“变阻器”控制 · 提供各种不同融合标签和表达系统配置 · 可溶性蛋白生产、二硫键形成、蛋白外运和多肽生产等专用载体和宿主菌 · 许多载体以 LIC 载体试剂盒提供,用于迅速定向克隆 PCR 产物 · 许多宿主
; 2)PCR扩增区,包括反应液的配制和PCR扩增; 3)产物分析区,凝胶电泳分析,产物拍照及重组克隆的制备。 各工作区要有一定的隔离,操作器材专用,要有一定的方向性。如:标本制备→PCR扩增→产物分析→产物处理。 切记:产物分析区的产物及器材不要拿到其他两个工作区。 使用一次性吸头,严禁与PCR产物分析室的吸头混用,吸头不要长时间暴露于空气中,避免气溶胶的污染; 操作多份样品时,制备反应混合液,先将dNTP、缓冲液、引物
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