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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
373
- 英文名:
Extremely Stable BL21(DE3) Competent Cells
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-80℃
- 规格:
100μl×10支
特别提示:包括常温稳定BL21(DE3)感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:常温稳定BL21(DE3)感受态细胞
英文名称:Extremely Stable BL21(DE3) Competent Cells
产品货号:MT0079
产品规格:100μl×10支
本制品室温可保存1个月、-20℃可保存2年(推荐保存温度)、-80℃可长期保存性能无下降。运输过程中无需干冰,可室温运输、可常规冰袋运输(推荐运输温度)。本BL21(DE3)感受态细胞为热激感受态细胞,专门用于蛋白表达(不可用于克隆和载体构建),经42℃热激1分钟可获得105~106cfu/μg效价,可满足质粒转化要求。该制品使用简单、运输、储存方便。
产品组成:
| 组分 | 规格 |
| RTS BL21(DE3) Competent Cell | 10支 |
| Nano E.coli Transfection Reagent | 600μl |
保存条件:-20℃可保存半年,-70度可保存2年;可室温运输。
使用方法:
1.从-20℃冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent彻底融化,放置于冰上。
注意:该试剂含长链带电化合物,允许反复冻融20次,使用完毕后继续-20℃保存。
2.取50μl Nano E.coli Transfection Reagent置于0.2ml EP管中,加入1~20ng质粒DNA(不可使用连接产物),枪头吹打混合均匀,冰上放置2~5分钟。
注意:放置时间不要超过30分钟,过长时间会导致核酸聚合,从而影响转化效价。
3.将上述混合物(50μl Nano E.coli Transfection Reagent和质粒DNA)加入到一支RTS BL21(DE3)感受态细胞干粉中,枪头轻轻吹打,彻底溶解细胞干粉,置于冰上15分钟。
注意:使用RTS BL21(DE3)感受态细胞干粉前,轻甩干粉至管底部,如果发现干粉已经溶解则不可使用。
4.置于42℃热激1分钟后,迅速置于冰上急冷2分钟。
5.向热激完毕的感受态细胞中,加入450μl不含抗生素的SOC培养基(或LB培养基),37℃振荡(225 rpm)培养60分钟。使质粒上抗性标记基因表达,菌体复苏。
6.取200μl复苏菌液涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。
7.将平板置于37℃培养,12~18小时后可出现菌落。
8.获得的表达菌,可使用IPTG进行诱导表达,从而获得重组蛋白。
我公司销售的常温稳定BL21(DE3)感受态细胞报价,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验特点: 具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性. 用途: 分子克隆和 质粒 提取. BL21(DE3)菌株 基因型: F- ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3 [lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5).
Xl1-Blue菌株 基因型:endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+)。 特点:具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。 用途:分子克隆和质粒提取。 BL21(DE3)菌株 基因型:F– ompT gal dcm
的宿主菌基因型,并使细胞生长加快(当天获得菌落),已经成功应用于25kb超螺旋DNA和8kb连接DNA的克隆。XL10-Gold®,BL21-Gold,BL21-CodonPlus®,SoloPack® Gold 和96Pack® Gold等系列细胞都带有这个新的性状。超级感受态细胞 Stratagene提供多种>5 x 109 转化子/μg 超螺旋DNA转化效率的化学法超级感受态细胞正是克隆获得大质粒、连接DNA克隆和建库时最值得推荐的。电转化感受态细胞 Stratagene
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