DH10Bac化学感受态细胞优惠促销

特别提示：包括DH10Bac化学感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：DH10Bac化学感受态细胞
英文名称：DH10Bac Chemically Competent Cell
产品货号：MQ0018
产品规格：10×100μl/50×100μl

DH10Bac感受态主要用于生产重组杆状病毒分子(Bac-to-Bac杆状病毒表达系统)。
DH10Bac菌株中含有父本杆粒bMON14272、辅助质粒pMON7124：父本杆粒bMON14272
包含mini-F复制子，卡那抗性基因，attTn7位点和lacZα互补因子；辅助质粒pMON7124含有tnsABCD区(tnsABCD region supplies the transposition proteins required for insertion of the mini-Tn7 from the donor plasmid into its target site on the parent bacmid)，具有四环素抗性，在细胞扩增过程中丢失，但可提高供体质粒pFastBac转化后的基因转座效率。
mcrA、mcrBC 及 mrr突变使DH10Bac菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA(Therefore，genomic DNA，both prokaryotic and eukaryotic，can be cloned efficiently in DH10Bac)。
recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。
φ80dlacZ∆M15的存在使DH10Bac可用于蓝白斑筛选，DH10Bac感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率>108cfu/μg。
保存条件：-80℃
基因型：
F-mcrA(mrr-hsdRMS-mcrBC)80lacZM15 lacX74 recA1 endA1 araD139 ∆(ara,leu)7697 galU g alK λ-rpsL nupG /pMON14272 / pMON7124
操作说明：
1.DH10Bac感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中)，加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养液(2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少13h。
注意事项：
1.感受态细胞zuì好在冰上融化。
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少zuì终用于涂板的菌量。

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