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- 百奥莱博
- ALH328-PNZ
- 北京
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Gateway entry Clone Construction Kit
- 保质期：
12个月
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
20次
特别提示：包括Gateway entry clone构建试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：Gateway entry clone构建试剂盒
英文名称：Gateway entry Clone Construction Kit
产品货号：ALH328
产品规格：20次
本试剂盒采用了世界zuì先进的定向拓扑异构酶克隆技术可以在5分钟内将待表达目的基因（高保真酶扩增的平末端片段）一步法定向克隆到Gateway入门载体，得到的入门克隆可以和各种Gateway目的载体通过LR重组反应，生成表达克隆。方便目的基因在原核/哺乳动物细胞/酵母/昆虫表达系统切换表达。
试剂盒组份：
Gateway入门载体(30ng/μl)—————20μl
10×Enhancer-———————————20μl
产品特点：
1. 简单快速，加入待表达基因片段室温仅需5分钟便可完成入门克隆构建。
2. 定向克隆技术，超过90%插入为正确方向插入，减少克隆筛选耗费的时间。
3. 构建的入门克隆不含原核表达Shine-Dalgarno（SD)序列，因此构建原核表达克隆时应选择带SD序列的目的载体进行Gateway LR重组。
储存条件：-20℃，有效期12个月。
本制品别名：Gateway入门克隆构建试剂盒
我公司销售的Gateway entry clone构建试剂盒，Gateway入门克隆构建试剂盒质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验gateway技术近两年开辟了高效克窿 转载新方法，特转载一篇于大家共赏，也欢迎更详细资料. GATEWAYTM克隆中基因看上去是什么样的？ 基因两端应该有att位点，在Entry克隆中是att L序列（100bp），而在表达克隆中是att B序列（25bp）[Hartley, J. L., Temple, G. F., 和Brasch, M. A. (2000) Gen. Res. 101788.]。在att位点间的所有序列会和你的
Vector）混合，加入含有Int、IHF的BP重组酶混合物，25度保温1小时，37度蛋白酶K处理10分钟，根据与上面相同的原理，attP和attB序列也能发生重组，生成带有目的基因的入门载体（Entry Vector）和带自杀基因的表达载体。同样，由于抗性不同以及自杀基因的作用，只有含目的基因的入门载体能被筛选出来。这即是BP反应。需要特别注意的是表达载体如果也是卡那霉素抗性，就必须选择另外一个供体质粒以便筛选。使用Gateway系统的第一步即为入门载体的构建，有以下几种方法： A、 PCR重组
，C-末端含有attB2位点。网站上有链接到GATEWAY信息，你通过点击按键即可在你的引物上按顺序加上att位点。你可以利用限制性内切酶和连接酶将你的基因克隆到Entry Vectors中或者购买已包含attB载体的cDNA文库(PCMV.SPORT6或PSPORT-P)。 为什么你们推荐在PCR引物中加上attB位点并且转化PCR产物到一个供体载体中，然后被重组(与attL)进attR位点?为什么PCR引物不能包含attL位点以便直接重组到目标载体中而不需要Entry
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