小鼠免疫组化(IHC)检测试剂盒

产品信息

产品名称	产品编号	规格	价格（元）
Immunohischemistry Kit for Mouse Primary Antibody 小鼠免疫组化（IHC）检测试剂盒	36311ES75	300T	1256.00

产品描述
翌圣IHC Kit for Mouse Primary Antibody可用于检测以小鼠单克隆或多克隆抗体为一抗的免疫组化实验，检测原理基于高特异性高亲和力的链霉亲和素-生物素结合：已固定或培养细胞的抗原与一抗形成抗原抗体复合物，生物素化二抗特异性结合上述复合物，经辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素特异性识别生物素（即抗原所在位置），最后经辣根过氧化物酶底物显色即可检测相应抗原。
本品可适用于多种类型样本，如石蜡包埋切片、冰冻切片、培养细胞涂片及血液标本等。

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
36311-A	Normal goat serum for IHC 封闭液（10%）	7.5 mL×2
36311-B	Biotin-conjugated Anti-mouse IgG 生物素标记抗小鼠二抗	7.5 mL×2
36311-C	HRP-conjugated Streptavidin HRP 标记链霉亲和素	7.5 mL×2
36311-D	20× DAB-A	800 µL
36311-E	1×DAB-B	16 mL

运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存，有效期1年。勿冰冻！

注意事项
1）检测样本时需同时做阴性对照和阳性对照
2）DAB是一潜在致癌物，使用时请注意自我防护。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

需准备试剂
1）二甲苯、乙醇、甲醇
2）去离子水
3）30%过氧化氢溶液
4）10 mM PBS, pH7.4或50 mM TBS, pH7.8
5）苏木素染色液（Cat#60502）
6）封片剂（Cat#36313）
7) 一抗（小鼠抗体）
使用方法
1 样品准备
染色前用PBS浸泡组织或细胞涂片10min。石蜡切片于室温下用二甲苯常规脱蜡、入水、抗原修复。
【注】从此步骤起，严禁标本或组织切片干燥。
2 染色（以石蜡切片为例）
1）将处理好的石蜡切片放入3% H₂O₂-甲醇溶液中浸泡10min，以消除内源性过氧化氢酶的作用。
2）清洗：PBS清洗3次，2min/次。
3）封闭：加一滴试剂A于组织切片上（需完全覆盖待检组织）孵育10min。
4）倒掉或吸干液体（不要冲洗）。
5）一抗：每张切片加2滴（100 μL）或适量一抗（需完全覆盖待检组织），湿盒内孵育30-60min。
6）清洗：PBS清洗3次，2min/次。
7）二抗：每张切片加一滴试剂B（需完全覆盖待检组织），孵育10min。
8）清洗：PBS清洗3次，2min/次。
9）酶孵育：每张切片加一滴试剂C（需完全覆盖待检组织），孵育10min。
10）清洗：PBS清洗3次，2min/次。
11）制备DAB显色液。
按照【20×DAB-A：1×DAB-B=1:20】的比例进行配制显色液，以1张切片为例，分别吸取试剂D、E溶液2.5 µL和50 µL充分混匀即可。
【注】① DAB显色液需现配现用，避光放置，且在30min内使用。
② 可根据需要一次染多张切片，各种试剂量按照上述比例放大即可。
12）显色：向切片上滴加一滴上述DAB显色液，室温显色2-5min（此步可在显微镜下控制显色程度）。
13）自来水充分冲洗。
14）用合适复染剂复染，盐酸酒精分化。
15）继续后续脱水、透明、封片、镜检。
2 结果判定
阳性结果处显处染棕黄或棕褐色。
HB190403