Luciferase Reporter Gene Assay Component萤火虫萤光素酶检测组分

Luciferase Reporter Gene Assay

Component萤火虫萤光素酶检测组分
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  • 11407ES60
  • 上海
  • 2025年12月10日
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    • 英文名

      Luciferase Reporter Gene Assay Component

    • 保质期

      有效期1年

    • 供应商

      翌圣生物科技(上海)股份有限公司

    • 保存条件

      -20度

    • 规格

      100T

    产品信息

     

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

     

    Luciferase Reporter Gene Assay Component

    11407ES60

    100 T

    279.00

    11407ES76

    500 T

    775.00

    11407ES80

    1000 T

    1398.00

     

    产品描述

     

    萤火虫萤光素酶(Firefly luciferase)是一种分子量约为61 kDa的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,能够催化萤光素(luciferin)氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中会发出波长为560 nm左右的生物荧光,该萤光可通过化学发光仪进行测定。检测原理如图所示:

    image.png 

    图1:萤火虫萤光素酶检测原理图

    本试剂盒是一闪光型萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂,用于检测裂解液裂解后释放荧光素酶的产物,具有灵敏度高的特点,可以高灵敏的检测萤光素酶在哺乳动物细胞中的表达。建议搭配双萤光素酶报告基因检测裂解组分(Cat NO.11406)一起使用,效果更佳。

     

    产品组分

     Luciferase Reporter Gene Assay

    组分编号

    组分名称

    产品编号/规格

    11407ES60(100 T)

    11407ES76(500 T)

    11407ES80(1000 T)

    11407-A

    萤火虫萤光素酶检测组分

    10 mL

    5×10 mL

    10×10 mL

     

    运输与保存方式

     

    干冰运输。-20℃保存,有效期1年。

    不能反复冻融,建议分装-20℃或-80℃保存。

     

    注意事项

     

    1)检测过程中需自备耗材和设备包括如下:PBS、100 μL移液器或者排枪、不透光白色酶标板、Luminometer发光计、多功能酶标仪或者其他能够检测生物发光的仪器;

    2)反应温度:酶促反应对温度较为敏感,加样检测前务必将所有试剂平衡至室温(20-25℃)再使用;

    3)检测仪器:能检测化学发光的仪器都适用,但由于不同仪器的设置和灵敏度不同,测得的光信号值也会不同;

    4)检测设置:Luminescence,350-700 nm,建议检测时间设为2-10 sec;

    5)检测板:为防止孔间干扰,推荐使用不透光白色酶标板。黑色酶标板也可用,但因黑色会吸收光信号,可能会降低信号;

    6)单管荧光测定仪测定,每个样品与测定试剂混合后到测定前的时间应保持一致;

    7)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

      

    实验步骤
     

    1)准备裂解产物。

    2)按照仪器说明书要求将荧光测定仪打开,设定参数,测定时间为10 sec,测定间隔为2 sec。

    3)取20 μL裂解产物加入测量管中(保持每次样品的加样量一致),另外加入100 μL萤火虫萤光素酶检测试剂,震板混匀

    2-3次,充分混匀后测定RLU(Relative light unit)。

    4)分析数据。

    ①实验设计:根据不同实验目的,在每个培养板中都应设置对照组、实验组和空白对照组。为了保证实验准确性,理论上每个实验组(包括对照组)都应当减去空白对照组的萤火虫萤光素酶的发光测量值。

    a.空白对照组:

    背景F:未转染细胞+萤火虫萤光素酶检测试剂。

    注:空白对照组的样品量必须与实验样品量相同,包含与实验样品相同的培养基/血清组合,并加上完全相同的检测试剂。

    b.实验组:转染细胞经实验化合物处理(即实验组F)。

    c.对照组:转染细胞不经处理,用以标准化结果(即对照组F)。

    ②计算结果:

    实验组=实验组F-背景F。

    对照组=对照组F-背景F。

    表达倍数=实验组/对照组。

     

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    产品名称

    货号

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    HB220325

     

     

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