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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
297
- 英文名:
Lambda Exonuclease
- 保质期:
3年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1000U|5000U
特别提示:包括λ核酸外切酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:λ核酸外切酶
英文名称:Lambda Exonuclease
产品货号:MT0086
产品规格:1000U|5000U
Lambda核酸外切酶 作用于双链DNA,沿 5′→3′方向逐步切去5′单核苷酸。zuì适底物是5′磷酸化的双链 DNA,也能缓慢降解单链DNA和非磷酸化底物。该酶不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。
产品组成:
| 组分 | 1000U | 5000U |
| Lambda Exonuclease(5 U/μl) | 200μl | 1ml |
| 10×Lambda Exo Buffer | 1ml | 1ml×5 |
保存条件:置于-20℃,可保存3年。
单位定义:1单位指在50μl反应体系中,37℃条件下,30分钟内能从双链DNA底物上催化产生10nmol酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。
使用注意事项:
1.1×Lambda Exo Buffer:67 mM Glycine-KOH(pH 9.4 @ 25℃),2.5 mM MgCl2,50μg/ml BSA,37℃温育。
2.该酶的zuì佳反应温度为37℃,75℃ 10分钟可失活。
3.5′-0H端的切割速度比5′-PO4端慢20倍。单链DNA 比双链DNA慢100倍。
核酸酶选择指南:
| 货号 | 酶 | 消化活性 | 底物 | 产物 | 用途 |
| MT0068 | Benzonase核酸酶 | 核酸内切酶活性 | 任何形式的DNA/RNA | 3-5bp寡核苷酸 | 消化任何形式的核酸; 去除蛋白样品中的核酸污染。 |
| MT0084 | T5核酸外切酶 | 5"-3"核酸外切酶活性 | 单链和双链DNA | dNMP至6寡核聚体 | DNA消化和Gibson组装 |
| MT0085 | T7核酸外切酶 | 5"-3"核酸外切酶活性 | 双链DNA | ssDNA和二核苷酸 | 消化双链DNA |
| MT0086 | λ核酸外切酶 | 5"-3"核酸外切酶活性 | 单链和双链DNA | ssDNA和dNMP | 消化双链DNA |
| MT0087 | 核酸外切酶I | 3"-5"单链外切酶活性 | 单链DNA | dNMP、二核苷 | PCR扩增后降解消化引物 |
| MT0088 | 热敏双链DNA核酸酶) | 双链DNA核酸酶活性 | 双链DNA | 2-8bp寡核苷酸 | 去除RNA样品中的DNA污染。 |
| MT0089 | Rnase H | 核糖核酸内切酶活性 | 杂交到DNA链上的RNA | ssDNA和2-8bp的 5"磷酸寡核苷酸 |
除去杂交到poly(dT)上的mRNA poly(A); 在cDNA第二链合成时除去mRNA。 |
| MT0090 | Dnase I | 核酸内切酶活性 | 单链和双链DNA | 2-3bp寡核苷酸 | 蛋白样品中DNA的去除 |
| MT0091 | Rnase A | 核酸内切酶活性 | 单链RNA | 3"-核苷磷酸 | 质粒或基因组中RNA污染的去除 |
| MT0092 | DNA损伤修复酶 | 核酸外切酶活性 | DNA | DNA修复 |
我公司销售的λ核酸外切酶,Lambda Exonuclease质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
核苷酸激酶缓冲液中进行。 质量保证: 无核酸内、外切酶污染。每批T4 DNA连接酶均通过模拟克隆实验进行检测,该实验可以检测出待连接DNA末端的任何破坏。结果表明>99.9%的DNA末端未受任何降解。 单位定义(粘性末端活性单位):在20µl连接反应体系、0.12µM (300µg/ml)的5'-末端浓度条件下,16°C反应30分钟,能使50% 的经Hind Ⅲ消化的λDNA片段连接所需的酶量定义为一个NEB单位。 一个粘端连接活性单位=0.015个韦氏(ATP-PP交换)单位
表达 ATP依赖型 DNA重组酶,它在λ-噬菌体与基因组 DNA的溶原重组时起作用,同时具有对 DNA放射性损伤的修复功能。由 recA基因的变异所产生的基因型使同源或异源 DNA的重组不能进行,保持插入 DNA的稳定性,对 DNA的转化有利。一个菌株的基因型如果是 recA,则说明此菌株的表现型是重组缺陷的。 recB (Recombination) 功能:recB基因表达 ATP依赖型 DNase和核酸外切酶V的一个亚基,对recA的DNA重组酶起辅助和促进作用。DNase催化双链DNA的解旋和解
臂区域如果 GC 含量过高过低,或者有重复序列,都可能在核酸外切酶切割后形成发卡结构,影响重组效率,可以使用质粒设计软件来检查同源重组臂的设计。 ⑤插入序列本身的问题:有些序列本身存在连接载体困难、连接产物不稳定、连接产物在大肠杆菌中复制困难等问题。对于这类序列可以考虑将序列打断后分步构建,或者更换载体或感受态的方式尝试解决。 2. 质粒提取量不足 质粒提取量少常见的原因可能是: ①摇菌时间过长:大肠杆菌生长已经超过对数期,细菌老化,导致细胞和 DNA 降解。 ②摇菌时间不足:细菌生长不充分
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