T7 核酸外切酶

♦ 5' →3' 核酸外切酶

♦ 切下 DNA 的 5' 单核苷酸

本酶作用于双链 DNA，沿 5´→3´方向催化去除 5´单核苷酸，它既能从 5´末端起始消化，也能从双链 DNA 的切刻或缺口处起始消化(1) 。它既能降解 5´磷酸化DNA也能降解5´去磷酸化 DNA。据报道，它能沿 5´→3´方向降解 RNA/DNA 杂交双链上的 RNA 或 DNA，但不能降解双链或单链 RNA(2) 。该酶是 T7 噬菌体基因 6 的产物。

纯化自含 TYB12 内含肽融合子的 E. coli 菌株。

1X NEBuffer 4 [50 mM KAc， 20 mM Tris-Ac， 10 mM Mg(Ac)₂  ， 1 mM DTT (pH 7.9)]。25°C 温育。

无核酸内切酶和外切酶污染。

1 单位指在 50 μl 反应体系中，25°C 条件下，30 分钟内能从双链 DNA 底物上催化产生 1 nmol 的酸溶性脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。

1X NEBuffer 4 和 0.15 mM 超声波破碎的双链 [³ H]-DNA。

10,000 units/ml。

10 mM Tris-HCl (pH 8.0)，0.1 mM EDTA,，5 mM DTT 和 50% 甘油。于-20°C 贮存。

无。

(1) Kerr, C. and Sadowski, P.D. (1972) J. Biol. Chem ., 247, 305–318.
(2) Shinozaki, K. and Okazaki, T. (1978) Nucl. Acids Res ., 5, 4245–4261.