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低温运输、-20℃保存
长期
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应Dicer(RNase III)(国产,进口),我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:Dicer(RNase III)(国产,进口)
规格:200U
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:BTN130676
Dicer(RNase III)能在含有锰离子的反应缓冲液中,将较长双链RNA切割成一组由18-25bp组成的小片段干扰RNA(siRNA),更适合用于哺乳动物细胞的RNA干扰实验。用1.5个单位(1μl)的Dicer(RNase III)能够将1μg的dsRNA完全切割成siRNA,其反应图如下:
产品特点:
1.为RNA干扰研究提供siRNA;
2.基因沉默;
3.靶标确认;
4.去除dsRNA;
5.无核酸内切酶和外切酶污染。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期两年。
活性定义:1单位指50μl的反应体系中,37℃条件下,20分钟将1μg dsRNA切割成siRNA所需要的酶量。
我公司的Dicer(RNase III)(国产,进口),性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
DP316 微量样品基因组DNA提取试剂盒
BL1397 SABC小鼠/兔IgG-FITC kit
BTN130864 Hoechst 33258干粉 Hoechst 33258 Powder
二十七烷 L-Asparagine Monohydrate 593-49-7
ARB12316 大鼠吡*(代"啶")酚(PYD)elisa检测 Rat pyridinoline,pyd ELISA KIT
2,5-二羟基*甲*(代"酸") Fmoc-D-Ala-OH 490-79-9
ARB11901 人磷酸果糖激酶(PFK)检测服务 Bovine phosphofructokinase,pfk ELISA KIT
ARB12075 大鼠内皮型NO合酶(eNOS)尿液中含量检测 Rat endothelial nitric oxide synthase enos ELISA KIT
PY01-175 酚红 ind 25克
二*基甲醇 TDT 91-01-0
F030209 HRP标记山羊抗小鼠IgG3抗体 Goat Anti-Mouse IgG3*HRP
甘*酸锌 o-Toluic acid 7214-08-6
ARB13369 牛总抗氧化能力(T-AOC)elisa检测操作说明书
BL0809 HRP标记羊抗人IgA抗体
Dicer(RNase III)(国产,进口)关键词:RNase III,Dicer,BTN130676,Dicer(RNase III),百奥莱博
·非冻型血液RNA保存液
编号:BTN111202
英文名称:RNAhold Blood RNA non-freezing preservation solution
规格:100mL
由于血液富含RNase,因此血液RNA非常容易降解,是临床分子生物学研究中的一个棘手的问题。为解决此问题,本公司在非冻型组织RNA保存液的基础上,开发了本产品。
产品特点:
1. 能快速渗透到新鲜血液细胞内,抑制RNA分子的降解。保存的血液RNA常温可放置3天,4℃可放置5天,-20℃可放置3个月。
2. 操作简单,直接将本产品和新鲜血液细胞沉淀按比例混合即可。
3.适用于人新鲜血和哺乳动物新鲜血液,不适用于陈旧血液和冻凝血液,也不适用于禽类血液和其他动物血液。
4. 重复性好,效果跟进口同类产品相当。
5. 保存的样品可直接用本公司血液RNA提取试剂盒提取RNA。
储存条件:室温运输及保存,有效期两年。
使用方法:
注意:RNase污染无处不在,最好用本公司的高效无毒固相RNase清除剂处理RNA工作区域,千万不要使用烷基化试剂DEPC(相当于芥子*(代"气"))。
一:以白细胞为材料的保存方法(此法效果好于全血保存法)
1.室温1500-2000 g离心新鲜抗凝血液10-15分钟,最上层为血浆,最下层为红细胞,中间层为膜状的、含白细胞的Buffy Coat(含白细胞多的血液此层可能很厚)。
2. 吸出血浆后,小心将中间的白细胞层吸出(允许污染部分红细胞)到新的离心管中,加入5-10倍体积的本产品,混匀后放常温(不超过30℃)保存不超过3天或者放-20℃保存3月(放-20℃前需要现在4℃放置过夜,然后再离心去除保存液,最后再把细胞沉淀放到-20℃。如果直接放入-20℃,冰晶会刺破白细胞,释放出其中的RNA,在后续实验去掉上清时会丢失)。
二:以EDTA抗凝全血为材料的保存方法
3. 将血液取到EDTA抗凝管中后,迅速将0.5mL血液与1.5mL本产品混合,充分颠倒混匀,然后放常温(不超过30℃)保存不超过3天或者放-20℃保存3月(放-20℃前需要现在4℃放置过夜,然后再离心去除保存液,最后再把细胞沉淀放到-20℃。如果直接放入-20℃,冰晶会刺破白细胞,释放出其中的RNA,在后续实验去掉上清时会丢失)。
三:血液RNA的提取(本产品不含RNA提取试剂。此处以本公司的跟Trizol相当的动物RNA提取试剂盒操作步骤为参考。用户也可以使用其他RNA纯化试剂)
4. 提取RNA时,如果保存的白细胞在-20℃,则需要先室温化冻,如果保存在常温或4℃,则直接使用。
5. 取1.8mL混合液到新的2mL离心管中,5000g室温离心1分钟。
6.小心吸弃上清液(本产品),细胞将形成沉淀(如果样品时全血,沉淀中将含有大量血液蛋白)。注意:上清一般会很浑浊,一定要尽可能弃尽。有时沉淀上面有白色晶体出现,属于正常现象。
7.在细胞沉淀中加入动物RNA提取试剂盒 1mL溶液A,剧烈震荡30秒(不能感觉到震荡即可,一定要看见管底液体旋转起来,否则只是液体表面的震动,下同)。震荡后颠倒几次看溶液是否均匀,如果有颗粒状物体说明还需要震荡裂解。
8.室温放置5分钟以使细胞充分裂解。
9. 将0.2mL自备的*仿加入到离心管中,剧烈震荡30秒。
10. 12000~15000g4℃离心3分钟。一般上清为无色的水相(含RNA,约0.5-0.9mL);中间层为白色,含有DNA、蛋白质和其他细胞破碎物,不要触及;下层为有机相,一般呈深红色。注意:有时水相比重大于有机相,出现反相现象,此时应该取下面的水相。
11.小心将水相转移到另一自备的1.5mL塑料离心管中。如果水相超过0.75mL,则需要分成2管,否则在下步没法加入等体积的异丙醇。
12. 加入等体积的异丙醇到水相中,充分颠倒混匀。
13. 12000~15000g4℃离心10分钟沉淀RNA。
14. 吸弃上清。注意:如果离心后出现两个相,则需要吸弃上面的一相,然后在下相(含RNA)中加入一倍体积的超纯水和一倍体积的异丙醇,混匀后12000~15000g4℃离心10分钟沉淀RNA,吸弃上清。
15. 将75% RNase-free乙醇加入到RNA沉淀中,震荡几秒后12000~15000g4℃离心1分钟。
16. 弃上清
17. 12000~15000g4℃离心半分钟,用移液枪去除残留的液体。
18. 将20-50μL DEPC处理的水加入到沉淀中并吹打溶解,立即用于下述完整性、产率和纯度的检测,也可直接用于后续RT-PCR等试验或存放于-80℃待用。
四: RNA的检测(列出步骤仅供参考,本产品不提供相关产品)
19. RNA完整性的电泳检测:强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶中单链RNA分子会自生折叠成各种形状,尤其不能使用DNA上样液,因为没有经过去RNase处理。
20. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA用TE缓冲液(pH8.2)稀释10倍后检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。人血RNA产率一般为2-5μg/mL。
21. RNA纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
Dicer(RNase III)(国产,进口)关键词:RNase III,Dicer,BTN130676,Dicer(RNase III),百奥莱博
·包涵体微量纯化试剂盒
编号:BTN90508
英文名称:Inclusion Body Miniprep Kit
规格:20次
包涵体是指超表达的蛋白在细胞胞浆内(如果超表达的是胞浆蛋白)或膜间内(如果超表达的是分泌蛋白)凝集形成的无活性的固体颗粒。包涵体形成的主要原因是在重组蛋白的表达过程中缺乏某些蛋白折叠辅助因子,或环境不适导致无法形成正确的蛋白质次级键。由于包涵体主要由超表达的重组蛋白质组成,因此分离纯化包涵体是分离纯化具有活性的重组蛋白的第一步。本产品就是用于快速的提取高质量的包涵体。
产品特点:
1.操作简单快速,整个过程只要三十分钟左右。
2.微量纯化,可以在1.5mL离心管中完成。
3.能有效去除包涵体中的细胞壁和细胞膜等非重组蛋白成份,使重组蛋白所占比重达到60%以上。
4.A型用于超声法裂菌,B型用于酶法裂菌。
5.可以选择盐*(代"酸")胍和尿素两种蛋白溶解方式。
6.得到的包涵体溶解液可以用于重折叠、SDS-PAGE或其他纯化处理。
试剂盒组成:
成分 | 20T(A型) | 20T(B型) |
溶液A | 5ml | 5ml |
溶液B | 50ml | 50ml |
包涵体溶解液 | 5ml | 5ml |
尿素 | 5g | 5g |
溶菌酶 | 无 | 600mg |
Benzonase(1U/μL) | 无 | 20μl |
我公司正在优惠促销工具酶等系列产品,期待您的咨询选购Dicer(RNase III)(国产,进口)。
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