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- 近岸蛋白(Novoprotein)
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- 2025年09月27日
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近岸
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750U
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· 核酸外切酶I 说明
核酸外切酶I（Exonuclease I, Exo I）是单链特异性3'→5'核酸外切酶，从ssDNA的3'-OH末端分解生成5'-单核苷酸。对单链DNA的特异性非常高，不分解双链DNA及RNA。可通过80℃，15分钟的热处理使之失活。本核酸外切酶I是把Exo I基因( E. coli)在大肠杆菌中进行表达后，经多次纯化分离而得到的。
· 核酸外切酶I 用途
酶解法清洁PCR反应产物。
如需对PCR产物进行测序，需去除反应体系中残存的引物及dNTP，否则测序反应则不能正常进行。核酸外切酶I 可用来去除残留的单链引物以及扩增反应中产生的多余的单链DNA。虾碱性磷酸酶（SAP）用来去除残存的单核苷酸（dNTP），之后不需要对PCR产物进行纯化，即可以进行测序反应。此法可以避免繁琐的胶回收、柱纯化、沉淀、磁珠、过滤、透析等方法。
在反应液中去除ssDNA fragment。
· 质量保证
本核酸外切酶I经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
· 其他说明
详细内容请参考说明书
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文献和实验在核酸水解酶中，是具有从分子链的末端顺次水解磷酸二酯键而生成单核苷酸作用的酶，与核酸内切酶相对应。可大致分为水解磷酸二酯键的 3′端生成 5′ -单核苷酸的酶，及水解 5′端生成 3′ -单核苷酸的酶。前者有蛇毒磷酸二酯酶及大肠杆菌核酸外切酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ等；后者有脾脏磷酸二酯酶、嗜酸乳杆菌（ Lac-tobacillus acidophilus）核酸酶。这些酶中还可以区别出从分子链的 3′末端或 5′末端开始切断和对单链 DNA或双链 DNA具有特异作用的酶。可利用这些酶水解
脾脏核酸外切酶spleen exonuclease，spleenphosphodiesterase
亦称脾脏磷酸二酯酶（spleen phosphodieste- rase）。系将具有 5′ -OH末端的 DNA和 RNA，从 5′末端向 3′方向不断使 3′ -核苷酸游离分解的酶。 EC3． 1． 16． 1。常从牛脾脏提纯的此种酶。高分子 DNA不易水解，但用 DNaseⅡ或普氏微球菌（ Micrococ-cus pyogenes）核酸酶处理，则可以完全水解。对碱基序列无特异性，但在 5′末端有磷酸单酯基则不水解。反应不需要 Mg2 ，但最适 pH在有 2× 10
实验原理核酸分子杂交是通过配对碱基对之间的非共价键（主要是氢键）结合，从而形成稳定的双链区。杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补，所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序（即某种程度的同源性）就可以形成杂交双链。分子杂交可在 DNA 与 DNA、RNA 与 RNA 或 RNA 与 DNA 的二条单链之间进行。由于 DNA 一般都以双链形式存在，因此在进行分子杂交时，应先将双链 DNA 分子解聚成为单链，这一过程称为变性，一般通过加热或提高 pH 值来实现。用分子
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