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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Lactic acid (LA) content detection kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC2230-50T/24S
- 规格:
50管/24样
L-乳酸(L-LA)含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC2230
规格:50T/24S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液一 | 液体30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 提取液二 | 液体5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 液体60 μL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体24mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂四 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂五 | 液体5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 标准品 | 粉剂×1支 | 2-8℃保存 |
- 试剂二:临用前按试剂二(V):蒸馏水(V)=10μL:450μL的比例配制试剂二溶液,现用现配;
- 试剂四:临用前每瓶加入8 mL 蒸馏水混匀,可分装后-20℃保存,避免反复冻融,-20℃保存4周;
- 标准品:临用前加入1.04 mL蒸馏水配成100 μmol/mL 的标准溶液;2-8℃保存4周。
乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物,与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关,乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成*酸,同时使NAD+还原生成NADH和H+,H+传递给PMS生成的PMSH2还原MTT生成紫色物质,在570nm处有特征吸收峰。
技术指标:
最低检出限:0.0387 μmol/mL
线性范围:0.039-1 μmol/mL
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
天平、研钵/匀浆器、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅或者恒温培养箱、乙醇和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项:
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- 如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
- 提取液一中含有蛋白质沉淀剂,因此上清液不能用于蛋白浓度测定。如需测定蛋白含量,需另取样本。
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- 取0.1g兔心加入1mL提取液一进行匀浆研磨离心,取0.8mL上清后加0.15mL提取液二,离心取上清后稀释5倍,之后按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=1.137-0.125=1.012,根据标准曲线y=0.7826x+0.0215,计算x=1.266,按样本质量计算含量得:
- 取100μL小鼠血清加入1mL提取液一,取0.8mL上清后加0.15mL提取液二,离心取上清,之后按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=1.152-0.407=0.745,根据标准曲线y=0.7826x+0.0215,x=0.924,按照液体体积计算含量得:
相关发表文献:
- Meixi Peng,Dan Yang,Yixuan Hou,et al.Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis. Cell Death and Disease. March 2019;(IF5.959)
- Xiaojin Luo,Weihua Shi,Haoming Yu,et al. Wearable Carbon Nanotube-Based BioSensors on Gloves for Lactate. Sensors. October 2018;(IF3.031)
- Zhou F, Du J, Wang J. Albendazole inhibits HIF-1α-dependent glycolysis and VEGF expression in non-small cell lung cancer cells[J]. Molecular and cellular biochemistry, 2017, 428(1-2): 171-178.
[1] Jin Bingjun, Li Taiyuan, Zhang Chunfeng. Determination of lactic acid concentration in bovine blood by enzymatic method [J]. Chinese Journal of Veterinary Medicine, 1990, 16(07): 23-25. [2] Eolbergrová J, MacMillan V, Siesjö B K. The effect of moderate and marked hypercapnia upon the energy state and upon the cytoplasmic NADH/NAD+ ratio of the rat brain[J]. Journal of neurochemistry, 1972, 19(11): 2497-2505.
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文献和实验| AuthorWang Xiaotang, Fan Wei, Li Na, Ma Yan, Yao Mudi, Wang Guoqing, He Siyuan, Li Wanqian, Tan Jun, Lu Qi, Hou Shengping | Publish_toGENOME BIOLOGY |
| IF17.9060 | PMID37085894 |
一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;在细胞发生凋亡阶段,Caspase被激活,活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后,黄色
度。 (2) 吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液,在规定的波长处测定其吸收度,再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时,应注意仪器的校正和检定。 (3) 计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种,使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时,影响精度的因素较多,故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品,如维生素A测定法,则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。
一、测定溶液中物质的含量 可见或紫外分光光度法都可用于测定溶液中物质的含量。测定标准溶液(浓度已知的溶液)和未知液(浓度待测定的溶液)的吸光度,进行比较,由于所用吸收池的厚度是一样的。也可以先测出不同浓度的标准液的吸光度,绘制标准曲线,在选定的浓度范围内标准曲线应该是一条直线,然后测定出未知液的吸光度,即可从标准曲线上查到其相对应的浓度。 含量测定时所用波长通常要选择被测物质的最大吸收波长,这样做有两个好处: ⑴灵敏度大,物质在含量上的稍许变化将引起较大的吸光度差异; ⑵可以避免










