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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Reduced Glutathione(GSH) Content Assay Kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC1170-50T/48S
- 规格:
50管/48样
还原型谷胱甘肽(GSH)含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC1170
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 试剂一 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 液体50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 标准品 | 粉剂×1支 | 2-8℃保存 |
1. 标准品:10mg还原型谷胱甘肽(GSH)。临用前加入1mL蒸馏水溶解,浓度为10mg/mL。2-8℃可以保存6周。
产品说明:
谷胱甘肽是由谷氨酸(Glu)、半胱氨酸(Cys)和甘氨酸(Gly)组成的天然三肽,是一种含巯基(-SH)的化合物,广泛存在于动物组织、植物组织、微生物和酵母中。谷胱甘肽能和5,5’-二硫代-双-(2-*甲酸)(5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid,DTNB)反应产生2-硝基-5--*甲酸和谷胱甘肽二硫化物(*)。2-硝基-5-*甲酸为黄色产物,在波长412nm处具有最大光吸收。
技术指标:
最低检出限:2.67 μg/mL
线性范围:3.125-250 μg/mL
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、分析天平、匀浆器/研钵/细胞超声破碎仪、低温离心机、水浴锅、移液器、1mL玻璃比色皿、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项:
- 若不确定样本中GSH含量的高低,可稀释几个梯度后再进行测量。
- 因为试剂一中含有蛋白质沉淀剂,因此上清液不能用于蛋白浓度测定。如需测定蛋白含量,需另取组织。
- 如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
- 取0.1002g大鼠肝脏加入1mL试剂一进行匀浆研磨,取上清之后按照测定步骤操作,使用1mL玻璃比色皿测得计算∆A=A测定-A空白=0.897-0.097=0.800,标准曲线y = 0.0045x - 0.0063,R2=0.9996,x=179.178,按样本质量计算得:GSH含量(μg/g 质量)= x÷W=1788.20μg/g 质量。
- 取0.1014g韭菜叶片加入1mL试剂一进行匀浆研磨,取上清之后按照测定步骤操作,使用1mL玻璃比色皿测得计算∆A=A测定-A空白=0.138-0.097=0.041,标准曲线y = 0.0045x - 0.0063,R2=0.9996,x=10.511,按样本质量计算得:GSH含量(μg/g 质量)= x÷W=103.66μg/g 质量。
- 取0.5mL鸡血清加入0.5mL试剂一,取上清之后按照测定步骤操作,使用1mL玻璃比色皿测得计算∆A=A测定-A空白=0.163-0.097=0.066,标准曲线y = 0.0045x - 0.0063,R2=0.9996,x=16.067,按样本体积计算得:GSH含量(μg/mL)= 2x =32.134μg/mL。
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BC1180/ BC1185 氧化型谷胱甘肽(*)含量检测试剂盒
BC1190/ BC1195 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px/GPX)活性检测试剂盒
BC1150/ BC1155 硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)活性检测试剂盒
BC1210/ BC1215 γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)活性检测试剂
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文献和实验| AuthorYu Zhang, Xiyou Du, Zhijing He, Shan Gao, Lei Ye, Jianbo Ji, Xiaoye Yang, Guangxi Zhai | Publish_toACS Nano |
| IF17.1000 | PMID37272777 |
一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;在细胞发生凋亡阶段,Caspase被激活,活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后,黄色
GSH和GSSG 参照 Anderson等 (1992)。取0.5 g样品,加入3 mL冰冷的6%的偏磷酸(含1 mmol•L-1 EDTA , pH 2.8),冰浴研磨,匀浆液以20,000 g,4 ℃离心15 min,取上清液来马上测定GSH和GSSG的含量或储存在-20 ℃下等待测定。总的GSH和GSSG含量测定如下:200 μL提取液加 1.2 mL反应液包含400 μL反应液1(110 mmol•L-1 Na2HPO4•7H20, 40 mmol•L-1 NaH2PO4•H2
(7)式或(9)式可计算叶绿素总量。 叶绿体色素的提取液中除含有叶绿素a与b外,还含有叶黄素和胡萝卜素,因为叶黄素和胡萝卜素的吸收光谱均在蓝光区,故不会干扰叶绿素含量在红光区的分光光度法测定。 器材与试剂 722分光光度计,叶绿体色素提取所需器材。 方法与步骤 1. 提取叶绿素。 2. 测定光密度。 在1cm比色杯中,注入叶绿素提取液(浓度大时需稀释)。另以叶绿素提取介质作为参比溶液注入同样的比色杯中。根据实验要求,选用相应的波长(测总量选用652nm,测叶绿素a、b含量
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