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- 技术资料
- 保存条件:
保存在-20℃,避光,1年。
- 保质期:
保存在-20℃,避光,1年。
- 英文名:
Calcein-AM/PI,Live/Dead Cell Double Stain Kit
- 库存:
999
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- 规格:
100T/250T/500T
| 规格: | 100T | 产品价格: | ¥200.00 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 250T | 产品价格: | ¥480.00 |
| 规格: | 500T | 产品价格: | ¥800.00 |
产品说明:
Calcein-AM 是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,发绿色荧光(Ex=490nm, Em=515nm)。因其在传统的 Calcein(钙黄绿素)基础上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基团,增加了疏水性,使其能够轻易穿透活细胞膜。一旦进入细胞后,Calcein-AM(本身不发荧光)被细胞内的酯酶剪切形成膜非渗透性的极性分子 Calcein,从而被滞留在细胞内并发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如 BCECF-AM 和 CFDA)相比,由于 Calcein, AM 细胞毒性极低,是最适合用于活细胞染色的荧光探针,而且不会抑制任何的细胞功能,如增殖和淋巴球的趋化性。
由于死细胞缺乏酯酶,Calcein-AM 仅用于对活细胞的细胞生存能力测试和短期标记。因此,Calcein-AM 常常与死细胞荧光探针如碘化丙啶(PI)等联合使用,同时进行活细胞和死细胞的荧光双重染色。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)不能穿过活细胞的细胞膜,仅能穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的 DNA 双螺旋从而产生红色荧光(Ex=535 nm, Em=617 nm),因此PI 仅对死细胞染色。由于 Calcein 和 PI-DNA 都可被 490 nm 激发,因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。而用 545 nm 激发,仅可观察到死细胞。
本试剂盒的工作原理就在于 Calcein-AM 和 PI 的双重染料,来进行活细胞和死细胞的双重染色标记,从而进行活细胞和死细胞水平的分析。根据我司优化的实验体系,单次就 200µl 细胞悬液进行染色,可以做 500 次检测
答:您好,用荧光酶标仪进行定量分析是可行的,但您如果需要更精确的定量,可以使用流式细胞仪进行分析或者使用荧光显微镜拍照后进行图像分析。
答:您好,不建议用于细菌染色,由于细菌有致密肽聚糖细胞壁,对疏水性小分子有强烈分子筛和疏水屏障作用,Calcein-AM染料难以穿透进入胞质,无法标记活菌;PI 本身可以染死细菌,但由于无活细菌染色对照,无法形成 “绿活红死” 的双染区分,且细菌易非特异性吸附 PI,出现背景高、信噪比差等情况。
答:您好,主要成分可能是磷酸盐缓冲液,保持细胞活性



货号:CA1630
样本:Hela细胞
图注:
绿色:Calcein-AM标记活细胞
红色:PI标记死细胞
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色,或核呈分叶状,边集的Hoechst着色的为调亡细胞。我最近在作的试验就是用的这种方法,附上一张我染的PC12细胞的图片,请大家指教。更精确的定量可以通过流式细胞仪来检测。用PI和Hoechst33342双标鉴别调亡、坏死,这种方法简便易行,结果比较可靠。 2、PI和Calcein-Am双标: Calcein-AM 是一种绿色荧光标记物,可显示胞浆,为膜通透性的荧光染料。Calcein-AM 一旦进入胞内,便可被内源性酯酶水解成绿色荧光物质calcein, 并保留在胞浆中。细胞
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