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- Solarbio
- 北京
- C6700
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
2年
- 英文名：
Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone; m-Cl-CCP; Mesoxalonitrile 3-chlorophenylhydrazone;(3-Chlorophenyl)hydrazonomalononitrile
- 库存：
现货
- 供应商：
索莱宝
- 规格：
100ul
产品描述：
CCCP，即Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone，一种质子载体（H+ ionophore），是一种强效的线粒体氧化磷酸化解偶联剂，促使线粒体内膜对H+产生通透性，导致线粒体内膜两侧的膜电位丧失，诱导凋亡发生。也可作用于叶绿体膜，抑制光合作用；CCCP还可抑制内质网-高尔基体（ER-Golgi）之间的蛋白转运，高亲和力结合细胞色素C氧化酶。
CCCP还具有其他功能：
1）在牛蛙交感神经方面的实验表明，CCCP 可增强促黄体生成素释放激素的释放；
2）作为一种质子导体在葡萄糖存在的情况下影响E.coli 细胞活性；
3）对细胞内钙水平的各种调节效应；
4）抑制脂肝酶的分泌；
5）部分抑制pH梯度活化的Cl-摄取以及刷状缘膜的Cl-/Cl-交换等。
本品是溶于DMSO的CCCP溶液，浓度为50mM，体积为100μl（相当于1mg的总量），常用作一种阳性对照来诱导细胞凋亡，并配合线粒体膜电位检测探针JC-10（货号：J8050）来进行相关研究。
使用方法：
1）收到本品（CCCP，50 mM）后按照10-50µl的小量分装，冻存在-20℃，避免反复冻融。
2）推荐工作浓度为10-100µM，初次实验可按照1000×稀释起始浓度（如1µl起始母液加入1ml细胞培养液）进行凋亡诱导20min，随后进行JC-1或者JC-10线粒体膜电位丧失检测，呈绿色荧光。
注意事项：
对于特定的细胞，CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同，需自行参考相关文献资料决定。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验和JC-1染色工作液，详见产品使用说明。稀释好的1× JC- 1 Assay Buffer保存在4°C。 2．阳性对照设置，详见产品使用说明；细胞按照实验方案进行凋亡诱导。 3．诱导完成后的细胞，300 g离心5 min，弃上清，收集细胞，PBS轻轻重悬细胞并计数。 注：良好的细胞状态是实验的关键。贴壁生长的细胞用于凋亡检测时，可能会因为胰酶消化、吹打等处理导致细胞的坏死或凋亡，对实验结果可能存在不可控的影响，请谨慎处理。 4．取1-5 × 105重悬的细胞，300 g离心5 min，弃上清
PMSF （强大的蛋白酶抑制剂），1 mM EDTA（变性剂和稳定剂），5 µg/ml Aprotinin（蛋白酶抑制剂），5 µg/ml Leupeptin（蛋白酶抑制剂），1% Triton x-100（破坏细胞），1% Sodium deoxycholate（中度变性剂和蛋白溶解剂），0.1% SDS（强变性剂和蛋白溶解剂）。14、裂解buffer：50mM HEPES pH7.0，1mM 甘油，1mM DTT（还原剂），7M 尿素，2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解），1mM EDTA(金属鏊合剂
mM Tris-HCl pH 7.4（缓冲体系），150 mM NaCl（等渗体系），1 mM PMSF （强大的蛋白酶抑制剂），1 mM EDTA（变性剂和稳定剂），5 μg/ml Aprotinin（蛋白酶抑制剂），5 μg/ml Leupeptin（蛋白酶抑制剂），1% Triton x-100（破坏细胞），1% Sodium deoxycholate（中度变性剂和蛋白溶解剂），0.1% SDS（强变性剂和蛋白溶解剂）。14. 裂解buffer：50mM HEPES pH7.0，1mM
