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产品特点:
- 温和抽提 – 采用优化的、温和的非离子型去垢剂,可以从昆虫细胞中最大限度的抽提可溶性蛋白。
- 高效 – 比超声法更好的蛋白抽提方法。相容性强 – 与下游的蛋白免疫印迹、6x组氨酸标签蛋白纯化、蛋白分析以及离子交换色谱相容。
- 灵活 – 可以从悬浮培养或者贴壁培养的昆虫细胞中抽提蛋白质。
利用Thermo Scientific I-PER昆虫细胞总蛋白抽提试剂从被感染的Sf9细胞中高效地抽提重组蛋白(人Cyclin B1, 小鼠STAT 6和GFP)。利用I-PER昆虫细胞总蛋白抽提试剂从被感染的Sf9细胞中制备抽提物。首先对总蛋白、不可溶蛋白和可溶蛋白的量进行标准化,然后利用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对这些蛋白进行分离,最后进行蛋白质免疫印迹分析。
更多产品链接:http://www.thermo.com.cn/Product4002.html
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文献和实验【求助】新手 请问western-blot测NF-KB、FLT3是用总蛋白提取试剂盒吗
xungufeng820 各位大侠: 小弟是新手,师兄们也没做过的,不知western-blot测NF-KB、FLT3是用总蛋白提取试剂盒吗?急盼回复!万分感谢! snowxyh 我用过总蛋白提取试剂盒提蛋白,之后western-blot检测NF-KB,但是感觉这样得到的蛋白浓度很稀,需要比较大的上样量才能检测出来,个人感觉,还是用传统的细胞匀浆裂解,离心提取上清,这样得到的蛋白浓度大,做试验结果好
WB 是检测和定量磷酸化蛋白质的重要实验方法,然而大家一直都说磷酸化蛋白 WB 不好做!这是因为处于不同的细胞生长状况和 / 或特定的细胞周期时,磷酸化蛋白可能仅占细胞总蛋白中的一小部分,处理不得当时,还会快速的去磷酸化。磷酸化蛋白质 WB 做不好的原因有许多,比如封闭问题,抗体问题,或所需的磷酸化蛋白可能不存在于样品中或者低于 WB 检测的量。然而,有一个常被大家忽视的重要原因就是蛋白样品制备所用的方法是否适合于磷酸化蛋白的提取?其实蛋白质提取的方法不仅影响提取效率,还会影响蛋白的质量
diving 做转录因子的WB必须要用核蛋白提取吗? 平时的总蛋白提取包括核蛋白吗还是核被离心掉了? 有时候好像有人直接提取总蛋白做磷酸化的检测了,为什么? xhjggl 还是选择使用专门的核蛋白提取试剂盒吧,一般而言,总蛋白提取时核蛋白的提取效率不高 diving 提取总蛋白然后做的磷酸化水平比如P-Stat 有意义吗 xhjggl
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