昆虫细胞蛋白提取试剂

【专题讨论】杆状病毒——昆虫细胞蛋白表达系统，影响蛋白表达的因素？

不知道有多少人成功用杆状病毒——昆虫细胞表达系统成功进行过蛋白表达？我最近表达一段病毒的非结构蛋白nsp-6，构建的重组Bacmid质粒经PCR鉴定正确，可是进行表达时，却未见蛋白表达，同时进行的试剂盒对照（含CAT基因的重组细胞中则有较好的表达。 我听说约有70%的蛋白在原核表达系统中是不表达的，但不知道这样的情况会不会发生在我用的昆虫细胞表达系统，除了实验操作失误方面的原因，还有什么因素是不使蛋白表达的，请大家讨论一下。 下面是我的实验过程，请高手指教，同时希望也给新手一个指导

种草一款无细胞蛋白质表达试剂盒

细胞表达系统的主要优点是蛋白翻译加工后机制接近体内的天然形式，容易保留生物活性，缺点是很难高通量表达，且建立稳定细胞系的技术难度大，操作繁琐，生产成本高。  无细胞表达系统 和传统的体内表达不同，无细胞表达系统是以细胞裂解液为基础，在试管中进行的蛋白表达。无细胞蛋白表达系统是一个开放系统，不需要依赖活细胞。使用从不同物种的细胞（例如，大肠杆菌、小麦胚芽、塔氏利什曼原虫、兔网织红细胞、昆虫或人类细胞）中提取的生物分子翻译机制，在溶液中对重组蛋白质进行生产的过程。 开放性系统赋予蛋白表达的灵活性，无细胞蛋白

基因重组中的关键反应和机制讲解【图文并茂版】

： （1）适当的cDNA(完整的编码序列); （2）适当的表达载体，提供特定多肽信息; （3）外部进行表达调控，表达系统设计有启动子。 产物特征： （1）真核细胞的蛋白由于不能羟基化而不稳定; （2）活性受限或无活性。 真核细胞基因在真核细胞中表达 真核宿主细胞提供一个相似但又不相同的环境。常采用酵母或昆虫细胞作为宿主。 应用于真核细胞蛋白质的大量制备，研究特定基因的表达。 产物翻译后羟基化，羧基化等，有加强蛋白的稳定和功能活性。二 、基因文库 基因