- ¥1000
- 钦诚生物
- 上海
- QC0386
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
2年
- 供应商：
钦诚生物
- 规格：
5ug
基本信息
| 质粒分类: | 链霉菌系列质粒 |
|---|---|
| 质粒大小: | 10.4kb |
| 原核抗性: | 安普霉素（阿伯拉霉素）Apr |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃，有氧，LB |
| 表达宿主: | 链霉菌 |
| 培养条件: | 参考相关文献 |
质粒图谱
质粒序列
APR测序序列：
1 ttctctgctc ttgccgagtt gatggcaaag gttccctatg gggtgccgag acactgcacc
61 attcttcagg atggcaagtt ggtacgcgtc gattatctcg agaatgacca ctgctgtgag
121 cgctttgcct tggcggacag gtggctcaag gagaagagcc ttcagaagga aggtccagtc
181 ggtcatgcct ttgctcggtt gatccgctcc cgcgacattg tggcgacagc cctgggtcaa
241 ctgggccgag atccgttgat cttcctgcat ccgccagagg cgggatgcga agaatgcgat
301 gccgctcgcc agtcgattgg ctgagctcat gagcggagaa cgagatgacg ttggaggggc
361 aaggtcgcgc tgattgctgg ggcaacacgt ggagcggatc ggggattgtc tttcttcagc
421 tcgctgatga tatgctgacg ctcaatgccg tttggcctcc gactaacgaa aatcccgcat
481 ttggacggct gatccgattg gcacggcgga cggcgaatgg cggagcagac gctcgtccgg
541 gggcaatgag atatgaaaaa gcctgaactc accgcgacgt ctgtcgagaa gtttctgatc
601 gaaaagttcg acagcgtctc cgacctgatg cagctctcgg agggcgaaga atctcgtgct
661 ttcagcttcg atgtaggagg gcgtggatat gtcctgcggg taaatagctg cgccgatggt
721 ttctacaaag atcgttatgt ttatcggcac tttgcatcgg ccgcgctccc gattccggaa
781 gtgcttgaca ttggggaatt ctacttcgtc gaggactggc gcatccgcgg ttcccctctt
841 ggatg
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文献和实验1、将适量的菌体悬浮于500μl溶菌酶溶液（2%）中，37℃温育1hr 左右至完全溶菌，2、加入500μl碱性SDS溶液（0.3mol/L NaOH, 2%SDS），立即振荡混合完全，3、打开管盖，在70℃放置15min（对大于20kb的质粒则最好放在55℃， 30min），然后于水浴中冷却至室温，4、加入100μl酸性苯酚/氯仿溶液，用混合器振荡至液体彻底混合均匀，12000rpm离心5min,移取上清液，弃去白色中间层。5、用中性苯酚/氯仿重复抽提直至看不见（或非常少）中间
；⑦ 扩增DNA 文库；⑧ 评估文的质量。吉赛生物cosmid基因组文库构建法cosmid（黏粒/柯斯质粒），指带有黏端位点(cos)的质粒。黏粒是由人工构建的含有λ噬菌体DNA的cos序列和质粒复制子的载体。黏粒的组成包括质粒复制起点（ColE1）、抗生素抗性标记、cos位点，常用的黏粒有SupercosI,pOJ436等。黏粒有4个特点：1、具有λ噬菌体的特性。2、具有质粒的特性。3、克隆外源DNA的容量大。4、能与有同源序列的质粒进行重组。所以使用Cosmid构建基因文库具有相当的优势，使用
原理 加利利链霉菌ATCC31671产生2-羟基阿克拉菌酮（2-hydroxyaklavinone）。将含有聚酮体酮基还原酶（polyketide ketoreductase，PKR）的质粒pWX03转入加利利链霉菌ATCC31671，可以产生阿克拉菌酮（aklavinone）。 第一部分 链霉菌质粒DNA提取 实验材料和试剂 菌种：质粒pWX03（含PKR）/变铅青链霉菌（S. lividans
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