- ¥1000
- 钦诚生物
- 上海
- QC6769
- 2025年07月14日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
2年
- 供应商：
钦诚生物
- 规格：
5ug
pSPYCE-35S植物双分子荧光质粒
基本信息
原核抗性: 卡那霉素Kan
筛选标记: G418
克隆菌株: 大肠杆菌DH5α
培养条件: LB/37℃
质粒图谱
pSPYCE-35S植物双分子荧光质粒使用说明：
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pSPYCE-35S植物双分子荧光质粒注意事项：
1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。
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文献和实验在蛋白-蛋白互作研究中，荧光互补技术因其直观、原位、无需裂解细胞等优势，成为越来越多科研人员的首-选。 但面对BiFC（双分子荧光互补） 和LCA（萤光素酶互补实验） 这两项技术，很多人会有疑问：它们有什么区别？我的实验该选哪一个？ 今天，我们结合金开瑞荧光系列实验服务的实际经验，把这两种技术讲清楚。 一、BIFC技术 01 BiFC：看蛋白互作发生的“位置” 技术原理 双分子荧光互补（BiFC）技术将荧光蛋白（如YFP）切成N端和C端
的，为此政府已建立了检测食品中转基因成分的体制。其中，最重要的是转基因检测方法的可靠性和有效性。所以我们利用分子生物学技术建立起一套基于PCR反应的实验方案，用于食品质控实验室的工作。最要害的是第一步：DNA提取，我们做了很严格的监控 。我们依据植物基因组和质粒DNA的提取效率来选择DNA提取试剂盒。整个提取过程包括破坏细胞壁、去除RNA和利用沉淀去除蛋白质，然后将DNA吸附在层析柱上，经过洗涤后再洗脱下来。类似的方法已经用于从其他一些植物和病毒中提取DNA。PCR反应的过程分为三个阶段：(1)通过加热
三篇顶刊论文，同一个技术选择——BiFC如何破解植物蛋白互作难题？
酸）、生物与非生物胁迫响应等过程，都离不开对蛋白互作的深入理解。 今天，我们要介绍的双分子荧光互补技术（Bimolecular Fluorescence Complementation, BiFC），就是研究植物蛋白互作的得力工具。 什么是BIFC技术？ BiFC技术的原理十分巧妙：将一个完整的荧光蛋白（如YFP）在特定位置切割成两个不发光的片段（N端片段和C端片段），分别与待研究的两个目标蛋白（蛋白A和蛋白B）融合表达。 核心机制： ●如果蛋白A和蛋白B能够发生
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