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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 供应商:
钦诚生物
- 规格:
5ug
pSPYNE-35S植物双分子荧光质粒
基本信息
原核抗性: 卡那霉素Kan
筛选标记: G418
克隆菌株: 大肠杆菌DH5α
培养条件: LB/37℃
质粒图谱

pSPYNE-35S植物双分子荧光质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pSPYNE-35S植物双分子荧光质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。
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文献和实验的,为此政府已建立了检测食品中转基因成分的体制。其中,最重要的是转基因检测方法的可靠性和有效性。所以我们利用分子生物学技术建立起一套基于PCR反应的实验方案,用于食品质控实验室的工作。最要害的是第一步:DNA提取,我们做了很严格的监控 。我们依据植物基因组和质粒DNA的提取效率来选择DNA提取试剂盒。整个提取过程包括破坏细胞壁、去除RNA和利用沉淀去除蛋白质,然后将DNA吸附在层析柱上,经过洗涤后再洗脱下来。类似的方法已经用于从其他一些植物和病毒中提取DNA。PCR反应的过程分为三个阶段:(1)通过加热
4.亚细胞共定位技术 5.噬菌体展示技术(PDT) 6.荧光共振能量转移技术(FRET) 7.双分子荧光互补技术(BIFC) 其中实验室比较常用的研究方法主要是前三种。这里对酵母双杂交技术略作介绍和评述。 原理: 酵母双杂交系统由Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立的。酵母的半乳糖苷酶基因的转录激活因子GL4有两个独立的结构域 :N末端的DNA结合域(BD)和C末端的转录激活域(AD)。BD与DNA分子结合,AD激活下游基因的转录,只有两者在空间上充分接近
g/mL 无 DNA 酶的 RNA 酶,37 ℃ 温育 1 h,以除去残留的 RNA。6. 重复步骤 4、5。1 g 细胞大约能提取到 2 mg DNA。(二)从植物组织中提取基因组 DNA【实验试剂与器材】1. CTAB 抽提液:2% (w/v) CTAB (十六烷基三甲基溴化铵),100 mM Tris.Cl,pH8.0, 20 mM EDTA,pH8.0,1.4M NaCl2. CTAB/NaCl 溶液:10% CTAB,0.7M NaCl配制方法:在 80 mL 双蒸水中溶解 4.1 g
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