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- KA&M-BIO
- 上海
- MZ17041
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 英文名：
pSPYCE(M)
- 库存：
999
- 供应商：
圻明生物
- 规格：
管
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pSPYCE(M)质粒圻明公司现货供应，可按客户需求单独构建载体，
一、载体构建：
(1)目的DNA片段和载体的制备；
(2)目的DNA片段和载体的连接；
(3)连接产物的转化；
(4)克隆筛选。
(5)测序验证及目标质粒交付
二、详细内容
1、以PCR扩增为基础的各类载体构建，如大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、杆状病毒表达载体、哺乳动物表达载体；报告基因载体等；
2、基因定点突变，包括单点突变，多点突变，基因缺失等；
3、载体元件替换和改造；
4、siRNA载体和miRNA表达载体构建；
5、过表达载体构建。
详询客服。公司整合了国外数个基因库资源，具有以下优势：
种属齐全：人、小鼠、大鼠、其它种属；
数量众多：多达几万数量cDNA克隆（cDNA模板质粒）和ORF克隆（ORF表达质粒）；
质量优异：保证目的基因序列正确，无氨基酸突变，每个克隆质粒均可提供相应的测序报告；
价格实惠：与您亲自调取基因相比，我们的服务让您更加省时、省力、省心；
pCR-XL-TOPO-ZNF236(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-HTR3D(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-XL-TOPO-ACIN1(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-XL-TOPO-BZRAP1(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-FAM38A(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-POC5(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-ZNF404(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-TRIM60(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-NT5C1A(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-RGL4(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-ANKRD23(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-PLEKHN1(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-XL-TOPO-SLIT1(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-ETV1(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-ANKDD1A(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR4-TOPO-AFF3(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Amp
pCR4-TOPO-ZNF709(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Amp
pCR4-TOPO-OR2W5(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Amp
pCMV-SPORT6-MAT2B(cattle) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 牛 Amp
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文献和实验这些引物.对所挑选的菌落中的质粒进行 PCR 扩增以鉴定是否有插入片段以及插入片段的大小.例如 T-A 克隆载体,克隆位点两侧有 T 7 、 SP 6 和 M 13 启动子通用序列,用 PCR 鉴定就非常方便.但是多数实验室更喜欢用酶切鉴定。 (二)插入片段方向性鉴定 如果需要 基因表达 ,必需鉴定外源基因在重组质粒中的连接方向.这对于在克隆时使用单酶切位点的情况尤为重要.可以利用联合酶切方案进行目的基因的插入方向鉴 定.在基因插入的邻近末端部位选择一个单酶切点( B
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的0.5×SSC液洗涤磁珠，共3次，最后一次洗后要尽可能全部弃去SSC而不搅动磁珠，即得所需分离的模板。陈伟红等。磁性分离法快速提取HCV mRNA用于RT-PCR检测。临床肝胆病杂志，1996，12（3）。6、质粒DNA的提取以Sambrook的碱裂解法为基础 ，通过控制菌体培养时间，适当调整提取过程中 3种溶液的比倒及作用时问，摸索出 一种适合于提取苏云金芽孢杆菌质粒 DNA的方法．该法与常规碱裂解法相比具有重复性好、质粒 DNA质量高等优点．1 茵体培养将 WB50菌株接种在LB平板上，培养 16
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