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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
47
- 英文名：
XL10-Gold 感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
0.1 mL×10
实验步骤：
(1) XL10-Gold 感受态细胞0.1 mL×10说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
以下是XL10-Gold 感受态细胞0.1 mL×10说明书的详细介绍点击了解更多“克必隆”克隆及表达产品：
储存事项:
A. XL10-Gold 感受态细胞0.1 mL×10说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. XL10-Gold 感受态细胞0.1 mL×10说明书组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活剂 ) 1mg Ac-DEVD-FMK(Caspase3Inhibitor)20μL
Pifithrin-a(p53 抑制剂 )5mg Ac-DEVD-CHO(Caspase3 抑制剂 )100μL
PMA/TPA (PKC 激活剂 )1mg 96 孔板质粒 DNAout( 真空法 )1次
Rapamycin(FRAPOR 抑制剂 )100μg 96 孔板质粒 DNAout( 离心法 )1次
SB203580(p38M
E 电泳液 ,10×250mL 石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒30 次
电泳液 ,10×2500mL 石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒50 次
碱性胶电泳液 ,10×250mL 石蜡包埋组织 RNAout30 次
RNA 电泳液 ,10×100mL 石蜡包埋组织 DNAout30 次
RNA 电泳液 ,10×250mL 十二烷基磺酸清除剂25mL
酸酚100mL 中草药 DNAout20 次
超纯水100mL 中草药 DNAout100 次
DEPC 水100mL 中 pH 缓冲液套装30 次
RNase-free 水1mL 质谱兼容型蛋白银染试剂盒10 次
RNase-free 水10mL 质粒 ( 载体 ) 系列产品2μg
扁柄侧耳 刺孢吸水链霉菌北京变种
皮状丝孢酵母 嗜水气单胞菌
金黄色葡萄球菌 膜醭毕赤酵母
0.1%蛋白胨水溶液100ml 杰丁汉逊酵母
金龟子绿僵菌小孢变种 贝雷丝孢酵母
多型孢毛霉 肠炎沙门氏菌肠炎亚种 ControlCulturemediatestingpreparatorytestcontrol
苏云金芽胞杆菌山东亚种Bacillusthuringiensissubsp.shandongiensis 纺缍形赖酸芽孢杆菌
结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂90mm 10 个/包 链格孢
蜜环菌 李克犁头霉（伞枝梨头霉）
马红球菌 粗毛斗菇
XL10-Gold 感受态细胞0.1 mL×10说明书黑曲霉菌冻干粉 Georgeniamuralis
阿尔莱特葡萄球菌 华美链霉菌
越南伯克霍尔德氏菌 谢杆菌
滑菇、光帽黄伞 巴西毛壳
多主枝孢（蜡叶芽枝霉） 金黄色葡萄球菌冻干粉
服务流程：
1）XL10-Gold 感受态细胞0.1 mL×10说明书客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
(1) XL10-Gold 感受态细胞0.1 mL×10说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
以下是XL10-Gold 感受态细胞0.1 mL×10说明书的详细介绍点击了解更多“克必隆”克隆及表达产品：
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A. XL10-Gold 感受态细胞0.1 mL×10说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. XL10-Gold 感受态细胞0.1 mL×10说明书组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活剂 ) 1mg Ac-DEVD-FMK(Caspase3Inhibitor)20μL
Pifithrin-a(p53 抑制剂 )5mg Ac-DEVD-CHO(Caspase3 抑制剂 )100μL
PMA/TPA (PKC 激活剂 )1mg 96 孔板质粒 DNAout( 真空法 )1次
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SB203580(p38M
E 电泳液 ,10×250mL 石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒30 次
电泳液 ,10×2500mL 石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒50 次
碱性胶电泳液 ,10×250mL 石蜡包埋组织 RNAout30 次
RNA 电泳液 ,10×100mL 石蜡包埋组织 DNAout30 次
RNA 电泳液 ,10×250mL 十二烷基磺酸清除剂25mL
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服务流程：
1）XL10-Gold 感受态细胞0.1 mL×10说明书客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
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