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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
柱式质粒 DNAout
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50 次
(1) 柱式质粒 DNAout50 次费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
以下是柱式质粒 DNAout50 次费用的详细介绍点击了解更多DNA纯化产品:

储存事项:
A. 柱式质粒 DNAout50 次费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. 柱式质粒 DNAout50 次费用组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
小鼠白介素27(IL-27)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-27 ELISA Kit
大鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA检测试剂盒RatAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 96T/48T
人Toll样受体6(TLR6)免疫试剂盒 Human TLR6 ELISA Kit
英文名称Epithelialneuophilactivatingpeptide-78ELISAKit小鼠上皮中性粒细胞活化肽(ENA-78).规格:96T/48T
TOP10电转感受态细菌5X100微升
rabbitmaixmetalloproteinase4,MMP-4ELISA试剂盒兔子基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
猪血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human activated Hageman factor (F XII a) ELISA Kit 人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA试剂盒
RabbitapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 兔载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforANX-VELISAKit大鼠膜联蛋白Ⅴ规格:48T/96T
血小板活化因子乙酰水解酶(PAFAH)活性比色法定量检测试剂盒20次
PorcineIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAKit猪白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒规格:96T/48T
猪总蛋白(TPS)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
猪转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
猪主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
猪主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
肠道菌增菌肉汤2250g用于肠道菌的增菌培养
麦芽浸膏肉汤 (CM0057) Oxoid incubation media 麦芽浸膏肉汤 (CM0057) Oxoid
拟囊体侧耳、(鲍鱼菇) 用于酿造白葡萄酒 支/瓶
ModifiedSorbitolMacConkeyAgarAdditives
甘露醇盐琼脂培养基 250g 用于金黄色葡萄球菌选择性分离培养
磷酸盐缓冲液(PBS,pH7.2) 规格: 250g 用途: 用于样品稀释。(WS)
卵黄琼脂培养基基础 规格: 250g 用途: 加入卵黄,用于厌氧梭状芽孢杆菌的分离培养
庖肉牛肉粒 规格: 100g 用途: 加入庖肉培养基基础(027140),用于厌氧菌的增菌培养和保存,还用于厌氧梭状芽孢杆菌的检验
庖肉培养基基础 规格: 250g 用途: 加入疱肉牛肉粒(027150),用于厌氧菌的增菌培养和保存,还用于厌氧梭状芽孢杆菌的检验。
柱式质粒 DNAout50 次费用念珠菌显色培养基CRM000ml/瓶用于念珠菌特别是白色念珠菌的选择性分离和初步鉴别
5L incubation media 5L
栗酒裂殖酵母 模式菌株 支/瓶
LactoseBileFermentBroth
麦康凯琼脂培养基(MacC) 250g 用于肠道致病菌的选择性分离培养
服务流程:
1)柱式质粒 DNAout50 次费用客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
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文献和实验同其他昆虫传播的疾病一样,首先应对昆虫等中间或储存宿主加以控制和消灭,如灭鼠、灭虱。5、立克次氏体病病因病理近年来,随着立克次氏体分子生物学(16srRNA序列、DNA-DNA杂交、全DNA或基因片段、质粒等)研究的进展,旧的立克次体分类已不能完全反映立克次目中所有种属的全貌,应运而生的是根据遗传物质对立克次体进行新的分类。16srRNA序列的分析显示,立克次体可分为两个亚群,α亚群包括立克次体(Rickettsia)、埃立克体(Ehrlichia)、埃菲比体(Afibia)、考德里体(Cowdria
理想。 我一共做过四五个重组质粒,其中插入片段,大的有2000bp左右的,小的也有200bp左右的。其中200bp~900bp的不大不小的片段相对好做,2000bp的难度相对较大。而其中最难做的恐怕就是ShRNA表达质粒了,RNAi技术这些年是一个热点,但是把一个只有63bp的小片断DNA插入到4000bp~5000bp的质粒DNA当中,并不是一件容易的事情。期间我们做了近百次的尝试,总结出这么一些经验: 1、质粒酶切方式的选择。现在看来,如果质粒的条件允许,最好选择双酶切。因为双酶切操作相对简单
mmol/L Tris HCl(pH8.0)10 mmol/L EDTA(pH8.0)Tips:这一步主要作用是重悬菌体,EDTA 是金属螯合剂,主要作用是防止下一步的裂解过程中内切酶对质粒进行切割。4. 加入 200ul 新配置的溶液 II,盖紧管口,快速颠倒离心管 5 次,切勿震荡,将离心管置于冰上。溶液 Ⅱ0.2 mol/L NaOH(临用前用 10 mol/L 贮存液现用现稀释)1% SDS Tips:菌体在强碱性条件下裂解,释放出包括质粒在内的核酸,蛋白等物质。注意混匀要轻柔
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