M15 感受态细胞0.1 mL×10品牌

实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。  
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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M15 感受态细胞0.1 mL×10品牌详细介绍：
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是M15 感受态细胞0.1 mL×10品牌的相关产品：
m7G(5´)ppp(5´)A 帽结构类似物25 OD  电泳级 SYBR Green I50μL
G(5´)ppp(5´)A 帽结构类似物25 OD  电泳级 MOPS100g
G(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物25 OD  第五章 核酸扩增产品
3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物25 OD  第四章 探针标记及检测产品
NTP 溶液，10mM0.5mL  第三章 “归去来”核酸电泳及回收产品
一步法质粒 DNAout 2.050 次  微量蛋白沉淀试剂盒50 次
一步法质粒 DNAout 2.0100 次  微量单链 DNA 定量试剂盒1mL
一步法无内毒素质粒 DNAout50 次  微量 RNA 助沉剂0.1mL
一步法大提质粒 DNAout5次  微量 RNA 定量试剂盒1mL
一步法 96 孔板质粒 DNAout( 离心法 )1次  微量 DNA 助沉剂0.1mL
土壤腐殖酸清除剂100mL  预混型丙 - 甲叉双丙烯干粉 (29:1)100g
一步离心式石蜡清除剂100 次  预混型丙 - 甲叉双丙烯干粉 (19:1)100g
菌体内毒素清除剂200mL  鱼类种属鉴定 PCR Mix100 次
红细胞裂解液 A 型 ( 核酸纯化 ) 100mL  荧光尺1个
红细胞裂解液 B 型 ( 流式细胞分析用 ) 100mL  银染清除剂30 次
鲍曼不动杆菌   缺陷短波单胞菌 ATCC 19146
营养琼脂培养基90mm   生孢梭菌CMCC64941冻干粉
紫红曲霉   地衣形芽孢杆菌
蜃楼耶尔森氏菌   紫红曲霉
卡尔斯伯酵母   深红酵母
短裙竹荪东北变种   浅天蓝链霉菌 Streptomyces coerulescens
硫乙醇酸盐平板培养基70mm   胰蛋白胨大豆琼脂表面培养基60mm/25cm2
弗氏柠檬酸杆菌   乙酸钙不动杆菌
豇豆慢生根瘤菌   平展米曲霉（米曲霉平展变种）
新月弯孢霉   香蕉炭疽盘长孢菌
M15 感受态细胞0.1 mL×10品牌褐球固氮菌   丙丁醇梭菌（丙丁醇杆菌）  利用玉米原料生产丙丁醇
韩国丛毛单胞菌   粪链球菌
青色链霉菌   猪霍乱沙门氏菌猪霍乱亚种  试验用菌
葱头伯克氏菌   金黄色葡萄球菌ATCC6538冻干粉
黄色长孢链霉菌   产朊假丝酵母
操作步骤:
1. M15 感受态细胞0.1 mL×10品牌匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。